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人体内的t-PA蛋白能高效降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药。然而，为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血，其原因在于t-PA与血纤维蛋白结合的特异性不高。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。据此，先对天然的t-PA基因进行序列改造，然后再采取传统的基因工程方法表达该突变基因，可制造出性能优异的t-PA突变蛋白。
（1）已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的编码序列（即模板链的互补链序列）为TGT，而丝氨酸的密码子为UCU，因此突变基因编码该氨基酸的编码序列应设计为_________。
（2）若获得的t-PA突变基因如图1所示，那么质粒pCLY11需用限制酶_________和_______切开，才能与t-PA突变基因高效连接。
（3）将连接好的DNA分子导入大肠杆菌中，含t-PA突变基因重组DNA分子的细胞应具有的性状是_______________。
A. 新霉素抗性且呈蓝色 B. 新霉素敏感且呈蓝色
C. 新霉素抗性且呈白色 D. 新霉素敏感且呈白色
（4）层析是蛋白质或酶分离提纯的重要步骤。在图2所示的层析装置中，层析柱内装填了特定的细小固体颗粒（称为层析介质），待分离的蛋白质或酶混合溶液流进流出层析柱，便可将目标蛋白与杂蛋白高效分离。试根据题干信息判断，为了高效分离t-PA 突变蛋白，层析介质表面事先应交联或固定___________________。制造该性能优异t-PA突变蛋白的过程称为___________工程。
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人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药。然而，为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血，其原因在于t-PA与纤维蛋白结合的特异性不高。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。据此，先对天然的t-PA基因进行序列改造，然后再采取传统的基因工程方法表达该改造后的基因，可制造出性能优异的改良t-PA蛋白。（注：下图表示相关的目的基因、载体及限制酶。pCLY11为质粒，新霉素为抗生素。）
回答下列问题：
（1）己知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板链碱基序列为ACA，而丝氨酸的密码子为UCU，因此改造后的基因决定第84位丝氨酸的模板链的碱基序列应设计为____。
（2）若t-PA改良基因的粘性末端如图所示，那么需选用限制酶____和____切开质粒pCLY11，才能与t-PA改良基因高效连接，在连接时需要用到 ___酶。
（3）应选择____（能／不能）在加入新霉素的培养基中生存并形成菌落的大肠杆菌作为受体细胞，目的是____。在加入新霉素的培养基中形成菌落的受体细胞并非都是目的菌株，需选择呈____色的菌落，进一步培养、检测和鉴定，以选育出能生产改良t-PA蛋白的工程菌株。
（4）以上制造性能优异的改良t-PA蛋白的过程称为____工程。
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人体内的t-PA蛋白能高效降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药。
（1）为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。据此，先对天然的t-PA基因进行改造，再采取传统的基因工程方法表达该突变基因，可制造出性能优异的t-PA突变蛋白，该工程技术称为__________。
（2）若获得的t-PA突变基因如图所示，那么质粒pCLY11需用限制酶__________和__________切开，才能与t-PA突变基因高效连接。
（3）将连接好的DNA分子导入大肠杄菌中，对大肠杆菌接种培养。在培养基中除了加入水、碳源、氮源等营养物质外，还应加入__________进行选择培养，以筛选成功导入pCLY11的细菌。配置好的培养基通常采用__________法进行灭菌。
（4）对培养得到的菌落进行筛选，其中菌落为__________色的即为含t-PA突变基因重组DNA分子的大肠杆菌。得到的大肠杆菌能否分泌t-PA突变蛋白，可通过该细胞产物能否与__________特异性结合进行判定。
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人体内的t-PA蛋白能高效降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药。
（1）为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。据此，先对天然的t-PA基因进行改造，再采取传统的基因工程方法表达该突变基因，可制造出性能优异的t-PA突变蛋白，该工程技术称为__________。
（2）若获得的t-PA突变基因如图所示，那么质粒pCLY11需用限制酶__________和__________切开，才能与t-PA突变基因高效连接。
（3）将连接好的DNA分子导入大肠杄菌中，对大肠杆菌接种培养。在培养基中除了加入水、碳源、氮源等营养物质外，还应加入__________进行选择培养，以筛选成功导入pCLY11的细菌。配置好的培养基通常采用__________法进行灭菌。
（4）对培养得到的菌落进行筛选，其中菌落为__________色的即为含t-PA突变基因重组DNA分子的大肠杆菌。得到的大肠杆菌能否分泌t-PA突变蛋白，可通过该细胞产物能否与__________特异性结合进行判定。
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人体内的t-PA蛋白能高效降解血栓，是心梗和脑血栓的急救药。然而，为心梗患者注射大剂量的t-PA会诱发颅内出血，其原因在丁t-PA作用的特异性不高。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。
(1)依据所需t-PA蛋白的结构和功能，对天然的t-PA基因进行序列改造，可制造出性能优异的t-PA突变蛋白，该技术称为_______________。
(2)已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板链序列为ACA，而丝氨酸的密码子为UCU，因此突变基因编码该氨基酸的模板链序列应设计为______________。
(3)若获得的t-PA突变基因如下图所示，那么质粒pCLY11需用_______________两种限制酶切开，才能与t-PA突变基因高效连接。
(4)将连接成功的基因表达载休导入大肠杆菌中，在含有___________的培养基上挑选颜色呈____________的菌落，初步筛选导入成功的细胞。
(5)检测t-PA突变基因是否导入大肠杆菌，可利用t-PA突变基因制备探针，进行_______________，检测是否有杂交链；也可依据t-PA突变基因两端的序列设计引物对大肠杆菌的DNA进行PCR扩增，若出现了_______________说明t-PA突变基因已经导入了受体细胞。
(6)在上述步骤成功的基础上，若没有能从大肠杆菌中提取到相应的t-PA突变蛋白，其可能的原因是________________。
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人 t-PA 蛋白能高效溶解血纤维蛋白凝聚的血栓。用传统基因工程生产的t-PA给心梗患者大剂量注射却会诱发颅内出血，原因在于其与血纤维蛋白结合的特异性低，但若将其第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，就能显著降低出血副作用。据此，科学家对人t-PA 基因进行序列改造，再采取传统的基因工程方法表达该突变基因，制造出了高性能的t-PA 突变蛋白。
（1）人 t-PA 基因第84位半胱氨酸的模板链碱基序列为ACA。丝氨酸的密码子为UCU，突变基因中对应该氨基酸密码子的碱基序列应设计为______。
（2）上述获得突变目的基因的基本途径是 ___。
（3）如图所示 t-PA 突变基因、质粒，用__________限制酶切开该质粒较好。
（4）将相应的重组质粒导入大肠杆菌中，含 t-PA 突变基因的细胞应具有的性状是______。
（5）上述生物工程技术是以_______为基础的，首先通过________，再进行______，以满足医疗需求的。
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老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β一淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降。正常老年人体中某些基因的突变会导致β一淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是（ ）
A．胚胎移植技术 B．胚胎干细胞技术C．单克隆抗体技术D．基因治疗技术
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血栓主要由不溶性的纤维蛋白等物质组成。纳豆激酶(NK)是一种在纳豆发酵过程中由纳豆菌产生的蛋白酶，它不但能直接作用于纤维蛋白(A过程)，还能间接激活体内纤溶酶原(B 过程)。如图是有关纳豆激酶溶栓机理简图，请据图回答问题：
(1)研究NK直接水解作用：给定纤维蛋白平板，将________滴加其上，若出现相应的溶解圈，则可说明___________________。
(2)NK 的间接作用是通过____________激活体内纤溶酶原，增加纤溶酶的量和作用，溶解血栓。
(3)请根据下列给出的实验材料，比较NK 与内源性纤溶酶溶栓效果，并在下面横线位置上，补全相应内容。
实验材料：NK溶液、内源性纤溶酶溶液、纤维蛋白块、缓冲液、量筒、试管和秒表。
实验步骤：
观察记录：观察纤维蛋白块分解情况，并记录分解的________。
请预测一种实验结果并分析：__________________________。
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血栓主要由不溶性的纤维蛋白等物质组成。纳豆激酶(NK)是一种在纳豆发酵过程中由纳豆菌产生的蛋白酶，它不但能直接作用于纤维蛋白(A过程)，还能间接激活体内纤溶酶原(B过程)。如图是有关纳豆激酶溶栓机理简图，请据图回答下列问题。
(1)研究NK直接水解作用：给定纤维蛋白平板，将______________滴加其上，若出现相应的溶解圈，则可说明________________________________。
(2)NK的间接作用是通过________________________________________________激活体内纤溶酶原，增加纤溶酶的量和作用，溶解血栓。
(3)请根据下列给出的实验材料，比较NK与内源性纤溶酶的溶栓效果，并补全表格空白位置上的相应内容。供选实验材料：NK溶液、内源性纤溶酶溶液、纤维蛋白块、蛋清溶液、缓冲液、双缩脲试剂、量筒、试管和秒表。实验步骤：(“＋”表示添加，“－”表示未添加)
| 加入物质的成分 | 试管1 | 试管2 |
| 1 | A____________ | ＋ | ＋ |
| 2 | 缓冲液 | ＋ | ＋ |
| 3 | 纳豆激酶(NK)溶液 | ＋ | － |
| 4 | B____________ | － | ＋ |
①表格中A处添加的物质是______________，B处添加的物质是__________________。
②实验结果的鉴定所用的观察方法是_____________________________________。
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血栓主要由不溶性的纤维蛋白等物质组成。纳豆激酶(NK)是一种在纳豆发酵过程中由纳豆菌产生的蛋白酶，它不但能直接作用于纤维蛋白(A过程)，还能间接激活体内纤溶酶原(B过程)。如图是有关纳豆激酶溶栓机理简图，请据图回答下列问题。
(1)研究NK直接水解作用：给定纤维蛋白平板，将______________滴加其上，若出现相应的溶解圈，则可说明________________________________。
(2)NK的间接作用是通过________________________________________激活体内纤溶酶原，增加纤溶酶的量和作用，溶解血栓。
(3)请根据下列给出的实验材料，比较NK与内源性纤溶酶的溶栓效果，并补全表格空白位置上的相应内容。供选实验材料：NK溶液、内源性纤溶酶溶液、纤维蛋白块、蛋清溶液、缓冲液、双缩脲试剂、量筒、试管和秒表。实验步骤：(“＋”表示添加，“－”表示未添加)
| 加入物质的成分 | 试管1 | 试管2 |
| 1 | A____________ | ＋ | ＋ |
| 2 | 缓冲液 | ＋ | ＋ |
| 3 | 纳豆激酶(NK)溶液 | ＋ | － |
| 4 | B____________ | － | ＋ |
①表格中A处添加的物质是______________，B处添加的物质是________________。
②实验结果的鉴定所用的观察方法是________________________________________。
