某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计单位体积内的活菌数目。按照培养基的配方称取，并将...

某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计单位体积内的活菌数目。按照培养基的配方称取，并将各种物质溶解后，用蒸馏水定容、灭菌，制成固体培养基备用。回答问题：

（1）在配制培养基时，需加入___________作为唯一的氮源，该培养基从功能上看属于________培养基，配制好的培养基应用_____________法灭菌。

（2）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是

____________________________________________。

（3）若要统计土壤样品中尿素分解菌的数目，宜采用____________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中的活菌数。一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为24.6，则每毫升样品中的活菌数是（所用稀释液的体积为0.2mL）

___________________________________________。

（4）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

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某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计单位体积内的活菌数目。按照培养基的配方称取，并将各种物质溶解后，用蒸馏水定容、灭菌，制成固体培养基备用。回答问题：

（1）在配制培养基时，需加入___________作为唯一的氮源，该培养基从功能上看属于________培养基，配制好的培养基应用_____________法灭菌。

（2）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是

____________________________________________。

（3）若要统计土壤样品中尿素分解菌的数目，宜采用____________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中的活菌数。一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为24.6，则每毫升样品中的活菌数是（所用稀释液的体积为0.2mL）

___________________________________________。

（4）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

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某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_______（填“能”或“不能”），原因是___________________________。

（2）培养基用_________方法灭菌，培养皿用____________方法灭菌，待培养基冷却到________℃（填“20”、“30”、“40”或“50”）左右时，在________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止__________，以免造成污染。

（3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用__________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

（4）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。

（5）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过_________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

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【生物一选修1生物技术实践】某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？________（填“能”或“不能”），原因是_________________。

（2）培养基用________方法灭菌，培养皿用________方法灭菌，待培养基冷却到________℃（填“20”、“30”、“40”或“50”）左右时，在________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止________，以免造成污染。

（3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的________就能大约推测出样品中活菌数。

（4）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。

（5）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

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某生物兴趣小组想对土壤中能分解尿素的细菌进行分离，并统计每克土壤样品中的活菌数目，确定了培养基配方(如下表)。将配方中各种物质溶解后，用蒸馏水定容到l 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基以备用。

（1）培养皿用_____灭菌；培养基灭菌后，待培养基冷却到________℃(填“20”“30”“40”或“50”)左右时，在酒精灯附近倒平板；待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止__________________，造成污染。

（2）根据培养基的成分判断，该同学不能分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是__________________。

（3）该同学采用稀释涂布平板法检测样液中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______________________；然后，将l mL样液稀释l00倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、38和37，据此可得出每升样液中的活菌数为___________。

（4）若该同学采用显微镜直接计数法测量细菌数量，左下图是一块血细胞计数板正面示意图，其上有________个计数室。右下图是计数室中一个中格的细菌分布示意图，该中格内细菌数量应计为____________。

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【选修1——生物技术实践】尿素是一种高浓度氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后,被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

（1）根据培养基的成分分析，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？____(填“能”或“不能”），原因是____。在接种前需要检测培养基灭菌是否彻底，常用的检测方法是____。

（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，最好采用____法接种。某同学取稀释倍数为105倍的菌液0.1ml接种后，测得平板上菌落数为156、178和191，则每毫升样品中的菌落数为____。

（3）某同学在分离纯化土壤中分解尿素的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，可能的原因是____，为避免此种现象发生，正确的操作方法是____。

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尿素是一种高浓度氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后,被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

（1）根据培养基的成分分析，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？_____(填“能”或“不能”），原因是_____。在接种前需要检测培养基灭菌是否彻底，常用的检测方法是_____。

（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，最好采用_____法接种。某同学取稀释倍数为105倍的菌液0.1ml接种后，测得平板上菌落数为156、178和191，则每毫升样品中的菌落数为_____。

（3）某同学在分离纯化土壤中分解尿素的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，可能的原因是_____，为避免此种现象发生，正确的操作方法是_____。

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尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌的分解作用，才能被植物吸收利用．某同学要分离出土壤中能分解尿素的细菌，并尝试进行计数，培养基配方如下：

K2HPO4　　 NaCl　　 H2O　　 葡萄糖　　 尿素　　 酚红　　 琼脂

0.12g　　 0.12g　　 15mL　　 0.025g　　 2.0g　　 0.25mg　　 0.5g

（1）分解尿素的细菌都能合成 脲酶 ，该种细菌在生态平衡中起到什么作用？ 参与了氮循环（或维持氮平衡） ．写出细菌分解尿素的方程式 ．

（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？ 不能 （能/不能），原因是 琼脂是未被纯化的混合物，内含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物 ．

（3）分离得到分解尿素的细菌后，如果要扩大培养，则应选择 培养基进行培养．培养一段时间后，使用 对微生物细胞进行计数．计数过程中，下列哪种行为会影响计数的准确性 A

A．计数时直接从静置培养的试管底部取培养液进行计数

B．如果方格内微生物细胞数量多于300 个，培养液先稀释后再计数

C．如果微生物细胞有粘连，要数出团块中的每一个细胞

D．压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数

（4）为了提高尿素肥效，可以将分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”．为了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用 固定化酶 技术．

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Ⅰ.某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列问题：

（1）在分离土壤中能分解尿素的细菌的实验中，用于接种的培养基常用________法灭菌，要统计每克土壤样品中活菌数目时，常用___________法接种培养后统计数目。

（2）实验室中筛选微生物的原理一般是_______________________________________。

Ⅱ.乳酸菌是存在于人体肠道内的益生菌，能助消化，利于肠道健康，因此常用于酸奶的制作。回答下列题：

（3）含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，原因是_______________。

（4）酸奶制作时杀菌很重要，牛奶一般用______法杀菌。

（5）乳酸菌也常用于泡菜的制作，腌制泡菜过程中亚硝酸盐含量的总体变化是____。

（6）在市场上购买的真空包装泡菜，在没有发生漏气状态下出现了“胀袋”现象，A同学怀疑是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，你支持谁的观点并写出理由。支持____同学的观点，理由是________________。

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[生物——选修1：生物技术实践专题]（15分）

下面是某同学制作果酒和果醋的实验流程图以及预分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方，请回答有关问题。

（1）图1中方框内应该填写的的实验步骤是　　　　　　 ，此步骤中起主要作用的微生物是　　　　 ，其发

酵时　　　 （需要／不需要）氧气，适宜的发酵温度范围是　　　 。　

（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？　　　　　　 (能/不能)，原因

是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）如果想进一步对初步筛选得到的菌株进行纯化并计数，可采用的接种方法是　　 。通常鉴定分

解尿素的细菌的方法是在培养基中加入　　　　 指示剂。

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