下图为利用基因工程在大肠杆菌中生产人胰岛素的部分过程示意图，请回答下列问题：
（1）图示过程应为基因工程中________________这一步骤，其中①②代表的物质分别是_____________________________。③④⑤所示过程代表的是利用______________扩增DNA。图中核酸酶H的作用是______________________________________________________。
（2）利用以上方法得到的胰岛素基因的编码序列与直接从人体细胞中获取的胰岛素基因编码序列相比更适合导入大肠杆菌细胞中，其主要原因是__________________________________________________。
（3）在获得胰岛素基因的编码序列前接上在大肠杆菌中可以适用的_______，另外加上__________基因，构建成表达载体。导入大肠杆菌后在含四环素的培养基上进行筛选。
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下图为利用基因工程在大肠杆菌中生产人胰岛素的部分过程示意图，请回答下列问题：
（1）图示过程应为基因工程中________________这一步骤，其中①②代表的物质分别是_____________________________。③④⑤所示过程代表的是利用______________扩增DNA。图中核酸酶H的作用是______________________________________________________。
（2）利用以上方法得到的胰岛素基因的编码序列与直接从人体细胞中获取的胰岛素基因编码序列相比更适合导入大肠杆菌细胞中，其主要原因是__________________________________________________。
（3）在获得胰岛素基因的编码序列前接上在大肠杆菌中可以适用的_______，另外加上__________基因，构建成表达载体。导入大肠杆菌后在含四环素的培养基上进行筛选。
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胰岛素是治糖尿病的重要药物。下图是利用大肠杆菌生产人胰岛素的部分过程示意图。请据图分析回答下列问题
（1）过程②称为______。若以某种生物发育的某时期的mRNA经过程②产生的多种互补DNA片段，与载体结合后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群称为这种生物的_______。
（2）____（能/不能）用人体皮肤细胞来完成①过程，简述理由：_______________。
（3）与基因组文库的基因相比，由过程④获得的目的基因中不包含___________。
（4）在基因工程操作步骤中，获得A的步骤称为________________，A的名称是___________。
（5）若目的基因中有a个碱基对，其中鸟嘌呤b个，则过程③扩增循环3次，至少提供胸腺嘧啶____个。
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下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图。请回答下列问题:
（1）图中②获取目的基因的方法是______________。
（2）A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，若③④⑤过程连续进行4次，第4次至少需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸____________个。
（3）⑧过程可用___________处理D，使它成为感受态细胞。
（4）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？___________。请说明理由:______________。
（5）图中B应至少有一个标记基因，其作用是_________________。
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胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。如图是利用大肠杆菌生产人胰岛素的部分过程示意图。请据图分析回答下列问题：
(1)过程②称为__________。若将某种生物发育的某个时期的mRNA经过程②产生的多种互补DNA片段与载体结合后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体称为这种生物的_______文库。
(2)________(填“能”或“不能”)用人体皮肤细胞来完成过程①，简述理由_____________。
(3)与基因组文库的基因相比，由过程④获得的目的基因中不包含________________。
(4)在基因工程操作步骤中，获得A的步骤称为________________，A的名称是____________。
(5)该目的基因在大肠杆菌表达出来的产物却没有生物活性，其主要原因是_______________。
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胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。目前，人类已经成功的利用大肠杆菌生产出重组人胰岛素。请回答下列问题：
（1）用基因工程生产人胰岛素时，可先提取人胰岛B细胞中的_________，通过逆转录获得胰岛素基因，再利用__________技术扩增目的基因。胰岛素基因能被准确扩增的原因是________________。
（2）大肠杆菌常用作基因工程的受体菌，主要原因是_________________。
（3）为使人胰岛素基因在大肠杆菌体内成功表达，需要构建基因表达载体，在基因的首端需要添加人胰岛素基因的______________，其作用是__________________。
（4）从大肠杆菌中得到的胰岛素需经体外加工才具有生物活性，原因是大肠杆菌_______。制备好的胰岛素通常要低温冷藏，过高的温度会使胰岛素的_____________被破坏，从而变性失活。
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利用工程菌生产人类医用蛋白是基因工程的重要应用之一。请回答下列问题：
（1）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，最好从___________（填“基因组文库”或“cDNA文库”）中获取目的基因。将目的基因表达载体导入大肠杆菌，应用___________处理细胞，使其成为能吸收周围环境中DNA分子的___________细胞。
（2）基因工程构建基因表达载体时需要DNA连接酶，根据酶的来源不同分为两类，其中“缝合”双链DNA片段平末端的是___________。构建的基因表达载体一般包括目的基因、启动子、___________、标记基因和复制原点，其中标记基因的作用是___________。
（3）目的基因能否在工程菌内稳定遗传的关键是_______________________，这需要通过检测才能知道，可利用___________技术进行检测。
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胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。人类已经成功的利用大肠杆菌生产出重组人胰岛素。请回答下列问题：
(1)用基因工程生产人胰岛素时，可先提取人胰岛B细胞中的mRNA作___________，然后在___________的作用下合成胰岛素基因。
(2)利用PCR技术扩增胰岛素基因前根据一段已知目的基因的核苷酸序列合成___________，扩增后的胰岛素基因不能直接导人大肠杆菌体内的原因是____________________________________________。
(3)利用大肠杆菌生产出重组人胰岛素的核心是______________________，基因工程中的转化是指_________________________________的过程。将重组胰岛素基因导入大肠杆菌内，最常用的转化方法是______________________。
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胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。如图是利用大肠杆菌生产人胰岛素的部分过程示意图。请据图分析回答下列问题：
(1)过程②称为__________。若将某种生物发育的某个时期的mRNA经过程②产生的多种互补DNA片段与载体结合后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体称为这种生物的_______文库。
(2)________(填“能”或“不能”)用人体皮肤细胞来完成过程①，简述理由_____________。
(3)与基因组文库的基因相比，由过程④获得的目的基因中不包含________________。
(4)在基因工程操作步骤中，获得A的步骤称为________________，A的名称是____________。
(5)该目的基因在大肠杆菌表达出来的产物却没有生物活性，其主要原因是_______________。
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人胰岛素由A、B两条肽链构成。研究人员用大肠杆菌作生产菌，利用基因工程技术分别生产两条肽链，并在体外将两条肽链加工成胰岛素。请回答下列问题：
(1)由A、B两条肽链可推导出A、B基因的碱基序列，依据是___________。因为A、B基因中的脱氧核苷酸数较少，因此常用___________的方法获取目的基因。
(2)在基因表达载体中，标记基因的作用是___________。基因工程中不能将A、B基因直接导入大肠杆菌的原因是___________。
(3)检测A、B基因是否导入受体菌时，常用___________作探针。若A、B基因表达的肽链中氨基酸数目增多，肽链后延，则需对A、B基因进行改造，这个改造是___________。
(4)引导肽是由引导肽基因控制合成的一段多肽序列，若在A、B肽链的前端加上引导肽序列后，可将A、B肽链引导到大肠杆菌的细胞膜外，便于A、B肽链提取。为实现上述目的，在基因层面的操作是___________。在以后的体外加工过程中，需要用___________切除引导肽。
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（14分）小鼠是继果蝇之后的又一种模式动物，下图1表示生产长效胰岛素转基因小鼠培育过程示意图，图2表示图1中③表达载体构建过程图示。请回答下列问题：
（1）图1中的过程①注射A物质的目的是使供体母鼠__________________，若进行体外受精，则需将未成熟的卵子培养至_______________才具备受精能力。
（2）在图2中，当目的基因的DNA用HindⅢ、BamhⅠ完全酶切后反应管中有________种DNA片段，经过程⑧形成的重组质粒上将有______________限制酶的切点。
（3）为确保目的基因在小鼠细胞中进行表达，图2的⑧过程在构建基因的表达载体时，需将目的基因插在____________________两种片段之间，将表达载体送入细胞时，图1中的过程④常用的方法是_______________________________________。
（4）为检测目的基因是否成功表达，通常采用的方法是____________________。
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