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为培育矮秆性状的水稻，科研人员进行了下列研究。
（1）科研人员构建含T－DNA的重组质粒，在T－DNA区段中含有已知序列的潮霉素抗性基因。将水稻W的愈伤组织浸入含有上述重组质粒的__________菌液中，20 min后转入水稻愈伤组织培养基培养，3天后转入含__________的培养基中筛选抗性愈伤组织。诱导愈伤组织的材料取自水稻W的未成熟胚，其原因是____________________。
（2）提取转基因水稻W叶片细胞的总DNA，利用T－DNA区段中的__________序列设计引物，用PCR法对转基因水稻进行____________________。
（3）将抗性愈伤组织__________形成的水稻幼苗移栽至大田，得到T0代转基因水稻。以__________为对照，对T0代水稻进行表型分析，筛选得到矮秆突变体G。判断G的矮秆突变性状是否为可遗传变异的常用方法是观察G的自交后代（T1代）____________________。
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科研人员利用现代生物技术培育出双转基因奶牛新品种，以便通过乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白肽（抗细菌）和人干扰素（抗病毒）。下图1为重组质粒，图2为培育流程。
（1）构建重组质粒时，若人干扰素基因的序列是已知的，则可以通过_________获得该基因，然后再利用_________技术进行扩增。
（2）据图可知，人干扰素基因与_________基因可同时转录。人乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建重组质粒时_________的选择不同有关。
（3）通常利用_________（方法）将重组质粒导入③，在导入前需用_________将②进行分散处理培养。
（4）④过程涉及到的现代生物技术有_________、胚胎体外培养等。
（5）在培育转基因奶牛⑦时，下列有关叙述正确的是_________
A. 需从表达人干扰素基因的人体细胞中获取目的基因
B. 获得的重组胚胎需要进行性别鉴定才能进行⑤过程
C. 奶牛⑥为一般品种，需进行同期发情处理并未经配种
D. 通常利用DNA分子杂交技术检测转基因奶牛培育是否成功
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科研人员利用农杆菌转化法将抗病毒蛋白基因C导入番木瓜，培育出转基因抗病番木瓜，Ti质粒如图所示。下列叙述，正确的是（ ）
A.农杆菌的拟核DNA与番木瓜基因发生重组
B.构建重组质粒需要限制酶和DNA聚合酶
C.含重组Ti质粒的农杆菌具有四环素抗性
D.转基因抗病番木瓜不具有卡那霉素抗性
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科研人员利用转基因技术将乙烯形成酶（EFE)反义基因导入番茄中获得耐储存番茄。
（1）科研人员将EFE反义基因与T——DNA构建重组质粒，将番茄的愈伤组织侵入含有上述重组质粒的
_________菌液中，通过该菌的 作用使EFE反义基因进入番茄细胞并插入到细胞的 上。
（2）将上述愈伤组织细胞进行 即可诱导得到试管苗，该过程体现了植物细胞具有 。
（3）为检测耐储存番茄中EFE反义基因是否转录处mRNA，首先要从该番茄中提取mRNA，然后将放射性同位素等标记的 作为探针，根据是否形成 进而判断EFE反义基因是否转录出mRNA，从个体生物学水平上鉴定，耐储存番茄产生的 （激素）比正常的番茄少。
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我国科研人员应用基因工程技术制备生物源鲜味八肽，下图为重组质粒构建过程及限制酶切割位点。请回答下列问题：
（1）已知鲜味八肽的氨基酸序列，科研人员利用序列设计软件，通过________法，最终得到DNA片段的序列为：
5＇-CCCAGATCTGGG……TAGGAATTCGAGCTC-3＇
3＇-GGGTCTAGACCC……ATCCTTAAGCTCGAG-5＇
用限制酶切割上述DMA片段后，获得含目的基因的DNA片段为__________________。
（2）使用上述两种限制酶较只使用一种限制酶的优点是_________________。构建该重组质粒过程中T4DNA连接酶________(能、否）用E.coliDNA连接酶替代，原因是_________________。
（3）目的基因PCR时，需先合成相应的引物。下列引物中热稳定性较高的是_____________。
引物P1:5＇-TAATACGACTCACTATAG-3＇
引物P2:5＇-AGCAAGAGACTCCTCATCACCCTT-3＇
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为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。
（1）将草甘膦抗性基因作为_____，与Ti质粒用相同的_____和DNA连接酶处理构建基因表达载体。
（2）用_____处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加_____的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。
（3）利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5'﹣﹣﹣ATGGCT………AGGAAC﹣﹣﹣3'
3'﹣﹣﹣TACCGA………TCCTTG﹣﹣﹣5'
根据上述序列应选择引物_____（填字母）进行PCR。
A．引物：5'﹣TACCGA﹣3'
B．引物：5'﹣GTTCCT﹣3'
C．引物：5'﹣AUGGCU﹣3'
D．引物：5'﹣ATGGCT﹣3'
（4）PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计_____种引物，其原因是_____。
（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否_____。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的_____过程，获得转基因水稻。
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为了提高水稻的抗倒伏能力，科研人员从其他植物中得到矮杆基因C（图1），将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入水稻中。
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）用__________构建重组质粒；一般使用__________将重组质粒导入农杆菌。
（2）用含C基因的农杆菌侵染水稻的__________，将C基因导入细胞；在培养基中添加__________，筛选被转化的水稻细胞；要得到相应的水稻植株，要利用__________。
（3）用__________检测C基因是否整合到染色体上；此外，还需要在个体水平上进行检测。如果检测显示C基因整合到染色体上，但水稻并没有矮化，请分析可能的原因：__________；__________。（至少答两点）
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科研人员在流感疫苗开发中考虑用基因工程技术实现对人流感病毒H3和禽流感病毒H5进行共预防，利用p质粒构建p-H5/H3共表达的重组质粒，如图所示，以下说法不正确的是（ ）
A.质粒中应含有标记基因，以便将含有目的基因的细胞筛选出来
B.为达到实验目的，需要在目的基因两端引入酶切位点
C.需用农杆菌转化法将重组质粒导入小鼠细胞进行试验
D.与传统疫苗相比，该疫苗不具有“病毒”疫苗的危险性
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时，选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割，可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①〜⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________，因此，可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程，培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功？____________________________。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时，选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割，可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①〜⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________，因此，可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程，培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功？____________________________。
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