科研人员利用农杆菌转化法将抗病毒蛋白基因C导入番木瓜,培育出转基因抗病番木瓜,Ti质粒如图所示。下列叙述,正确的是( )
A.农杆菌的拟核DNA与番木瓜基因发生重组
B.构建重组质粒需要限制酶和DNA聚合酶
C.含重组Ti质粒的农杆菌具有四环素抗性
D.转基因抗病番木瓜不具有卡那霉素抗性
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科研人员利用农杆菌转化法将抗病毒蛋白基因C导入番木瓜,培育出转基因抗病番木瓜,Ti质粒如图所示。下列叙述,正确的是( )
A.农杆菌的拟核DNA与番木瓜基因发生重组
B.构建重组质粒需要限制酶和DNA聚合酶
C.含重组Ti质粒的农杆菌具有四环素抗性
D.转基因抗病番木瓜不具有卡那霉素抗性
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科研人员利用现代生物技术培育出双转基因奶牛新品种,以便通过乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白肽(抗细菌)和人干扰素(抗病毒)。下图1为重组质粒,图2为培育流程。
(1)构建重组质粒时,若人干扰素基因的序列是已知的,则可以通过_________获得该基因,然后再利用_________技术进行扩增。
(2)据图可知,人干扰素基因与_________基因可同时转录。人乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞中表达,人干扰素基因则可在全身细胞表达,这与构建重组质粒时_________的选择不同有关。
(3)通常利用_________(方法)将重组质粒导入③,在导入前需用_________将②进行分散处理培养。
(4)④过程涉及到的现代生物技术有_________、胚胎体外培养等。
(5)在培育转基因奶牛⑦时,下列有关叙述正确的是_________
A. 需从表达人干扰素基因的人体细胞中获取目的基因
B. 获得的重组胚胎需要进行性别鉴定才能进行⑤过程
C. 奶牛⑥为一般品种,需进行同期发情处理并未经配种
D. 通常利用DNA分子杂交技术检测转基因奶牛培育是否成功
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生物·选修3:现代生物科技专题
科研人员将病毒外壳蛋白(CP)基因转移到甜椒体内,培育出的抗病毒甜椒具有很好的抗病毒效果。请回答下列有关抗病毒甜椒培育过程的问题:
(1)获取含氨苄青霉素抗性基因的质粒:先在含_________________的培养基上培养细菌,然后从菌体中分离出含氨苄青霉素抗性基因的质粒。
(2)获取CP基因:从感染病毒的植物体内获得_____,然后用反转录的方法获得___(填“基因组”或“cDNA”)文库。基因组文库与cDNA文库相比,两者最显著的区别是____。
(3)构建基因表达载体:经反转录获得的目的基因的两端是平末端,需要用________连接酶将其与含平末端的载体连接。
(4)导入受体细胞:甜椒为双子叶植物,科研人员常用__________法导入,然后将受感染的组织细胞培育成愈伤组织,再经___________培育成转基因甜椒。
(5)目的基因的裣测与鉴定:目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键___________。
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PRSV是单链RNA病毒,由蚜虫传播危害木瓜,华南农业大学通过农杆菌转化法成功培育出中国首例抗PRSV转基因木瓜。通过转基因技术培育植物抗病毒品种是目前常用的方法,请回答:
(1)基因与染色体的关系是:一条染色体上有多个基因,基因在___________________。
(2)转基因技术的核心步骤是基因表达载体的构建,该步骤必须用到的工具酶包括限制酶和_______________,基因表达载体中含有启动子和终止子,这两者是___________(填“复制”或“转录”)过程所必须的。此步骤中一般用两种___________处理,目的是防止Ti质粒或______________自身环化、防止目的基因和Ti质粒反向连接。
(3)农杆菌转化法的原理是当植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的_________化合物,吸引农杆菌移向这些细胞;如果将目的基因插入到Ti质粒的_____________上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因进入植物细胞,并将其插入到植物细胞的染色体DNA上。
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鸡干抗素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,①-④表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:
(1)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是_____________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了______________和_____________序列,以便于后续的剪切和连接。
(2)步骤②所构建的基因表达载体中末标注出的必需元件还有_______________________,步骤③中需先用__________________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过逆转录获得DNA,再通过PCR扩增制备探针,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是_________________________。
(4)用烟草花叶病毒对获得的转基因烟草和普通烟草进行接种实验,接种后第19天对照组植株进入病情指数(植物受病毒侵染的严重程度)为100的平台期,而转基因植株在第______天才进入平台期,但此时的病情指数为79,说明转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性,但抗性较低,可能的原因有_______________________________。
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鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:
(1)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是_________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了________和________序列,以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用两种限制酶,选择的原则是:Ti质粒内,每种限制酶有________个切割位点,酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列_______(相同/不相同)
(2)步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有________,步骤③中需先用________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过________获得DNA,再进行PCR扩增,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是________________。
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鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:
(1)表格中的限制酶EcoRⅠ切割DNA分子后形成的黏性末端是_________________。
(2)步骤①是利用PCR技术扩增鸡干扰素基因,进行PCR的前提是___________。
(3)图中选用两种限制酶分别处理鸡干扰素基因和农杆菌Ti质粒,这样做的优点有_________。
(4)步骤②所构建的基因表达载体中启动子的作用是 ____________。
(5)步骤③中需先用____________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(6)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过逆转录获得DNA,再通过PCR扩增制备探针,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是__________________。
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鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:
(1)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是__________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了__________和__________序列,以便于后续的剪切和连接,一个DNA分子三轮复制以后,含有两种引物的DNA分子有__________个。为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用两种限制酶,选择的原则是__________。
A. Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点
B. 目的基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点
C. 酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列不相同
D. 酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
(2)步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有__________,步骤③中需先用__________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过__________获得DNA,再进行PCR扩增,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是__________。
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鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:
(1)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是_________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了________和________序列,以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用两种限制酶,选择的原则是:Ti质粒内,每种限制酶有________个切割位点,酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列_______(相同/不相同)
(2)步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有________,步骤③中需先用________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过________获得DNA,再进行PCR扩增,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是________________。
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鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:
(1)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是____。科研人员还在两种引物的一端分别加上了__________和___________序列,以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用两种限制酶,选择的原则是_________。
A.Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点
B.目的基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点
C.酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列不相同
D.酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
(2)步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有___________,步骤③中需先用______处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过________获得DNA,再进行PCR扩增,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是___________。
(4)用烟草花叶病毒对获得的转基因烟草和普通烟草进行接种实验,接种后第19天对照组植株进入病情指数(植物受病毒侵染的严重程度)为100的平台期,而转基因植株在第______天才进入平台期,但此时的病情指数为79。说明转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性,但抗性较低,可能的原因有__________。
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