金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题:
(1)从高表达MT 蛋白的生物组织中提取mRNA,通过______________获得______________用于PCR扩增。
(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的______________位点。设计引物时需要避免引物之间形成______________,而造成引物自连。
(3)图中步骤1代表______________,步骤2代表退火,步骤3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环。
(4)PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破_________的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但____________的引物需要设定更高的退火温度。
(5)如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有___________(填序号:①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物)。
高三生物综合题中等难度题
金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题:
(1)从高表达MT 蛋白的生物组织中提取mRNA,通过___________获得___________用于PCR扩增。
(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的____________位点。设计引物时需要避免引物之间形成____________,而造成引物自连。
(3)图中步骤1代表变性,步骤2代表退火,步骤3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环。PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏____________的碱基配对。
(4)如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有____________ (填序号:①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物)。
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金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题:
(1)从高表达MT 蛋白的生物组织中提取mRNA,通过______________获得______________用于PCR扩增。
(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的______________位点。设计引物时需要避免引物之间形成______________,而造成引物自连。
(3)图中步骤1代表______________,步骤2代表退火,步骤3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环。
(4)PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破_________的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但____________的引物需要设定更高的退火温度。
(5)如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有___________(填序号:①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物)。
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(8分)金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题:
(1)从高表达MT 蛋白的生物组织中提取mRNA,通过______________获得______________用于PCR扩增。
(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的______________位点。设计引物时需要避免引物之间形成______________,而造成引物自连。
(3)图中步骤1代表______________,步骤2代表退火,步骤3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环。
(4)PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破_________的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但____________的引物需要设定更高的退火温度。
(5)如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有___________(填序号:①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物)。
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金属硫蛋自(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋自,某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。请回答下列问题:
(1)在进行基因工程操作时,需要从高表达的MT蛋白的生物组织中提取mRNA,提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是____________________,以mRNA为材料可以获得cDNA,其原理是____________________________。
(2)PCR之前,需要设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),两种引物之间不能存在互补配对序列,原因是____________________________________。
(3)在PCR反应体系中,除具备缓冲液、模板DNA分子和引物外,还应有__________(选填编号)。
①Taq酶,②dNTP(dCTP、dATP、dGTP和dTTP),③四种碱基,④ATP,⑤氨基酸。
(4)PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏_______的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但_______的引物需要设定更高的退火温度。
(5)如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有_______(填序号:①升高退火温度②降低退火温度③重新设计引物)。
(6)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是________________________________(答出两点即可)。
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如图是获得药用乳腺生物反应器转基因小鼠的流程图。回答下列问题:
(1)图中在Ⅰ过程前提取mRNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是___。
通过PCR扩增目的基因的过程中,两个引物是___的结合位点,也是子链延伸的起点。
(2)图中Ⅱ过程在构建基因表达载体时,有时需要使用两种限制酶切割目的基因所在的片段,同时也用这两种限制酶切割质粒,这样做的优点是___。
(3)图中Ⅲ过程获得的小鼠Es细胞在饲养层细胞上培养,Es细胞表现为__的特点。Ⅳ过程中要将含外源基因的Es细胞导入囊胚的,然后进行胚胎移植。若要一次获得多只相同性状的后代,胚胎移植前应采用___技术,通常选择发育良好、形态正常的囊胚或进行操作。
(4)若获得的已整合药用蛋白基因的转基因小鼠分泌的乳汁中检测不到药用蛋白,根据中心法则分析,其可能的原因是__。
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如图是获得药用乳腺生物反应器转基因小鼠的流程图。回答下列问题:
(1)图中在Ⅰ过程前提取mRNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是___。
通过PCR扩增目的基因的过程中,两个引物是___的结合位点,也是子链延伸的起点。
(2)图中Ⅱ过程在构建基因表达载体时,有时需要使用两种限制酶切割目的基因所在的片段,同时也用这两种限制酶切割质粒,这样做的优点是___。
(3)图中Ⅲ过程获得的小鼠Es细胞在饲养层细胞上培养,Es细胞表现为__的特点。Ⅳ过程中要将含外源基因的Es细胞导入囊胚的,然后进行胚胎移植。若要一次获得多只相同性状的后代,胚胎移植前应采用___技术,通常选择发育良好、形态正常的囊胚或进行操作。
(4)若获得的已整合药用蛋白基因的转基因小鼠分泌的乳汁中检测不到药用蛋白,根据中心法则分析,其可能的原因是__。
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【生物——现代生物科技专题】下面是利用奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图,请回答下列问题:
(1)若要大量获得目的基因,可使用 扩增白蛋白基因,通过③构建的重组表达载体包括目的基因、启动子、终止子和 、复制原点等部分。该重组表达载体导入的受精卵性染色体组成应为 。
(2)如果需要通过①采集到更多的卵子,常用的激素是 ;通过②采集的精子需 后才能进行受精作用。
(3)在体外培养受精卵时,除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外,还需要提供 (气体)以维持 。
(4)为使⑤能成功进行,需要对奶山羊C进行 处理,使之与供体的生理状况保持相同。
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【生物——现代生物科技专题】下面是利用奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图,请回答下列问题:
(1)若要大量获得目的基因,可使用 扩增白蛋白基因,通过③构建的重组表达载体包括目的基因、启动子、终止子和 、复制原点等部分。该重组表达载体导入的受精卵性染色体组成应为 。
(2)如果需要通过①采集到更多的卵子,常用的激素是 ;通过②采集的精子需 后才能进行受精作用。
⑶在体外培养受精卵时,除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外,还需要提供 (气体)以维持 。
(4)为使⑤能成功进行,需要对奶山羊C进行 处理,使之与供体的生理状况保持相同。
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【生物---现代生物技术】下面是利用奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图,请回答下列问题:
(1)若要大量获得目的基因,可使用 扩增白蛋白基因,通过③构建的重组表达载体包括目的基因、启动子、终止子和 、复制原点等部分。该重组表达载体导入的受精卵性染色体组成应为 。
(2)如果需要通过①采集到更多的卵子,常用的激素是 ;通过②采集的精子需 后才能进行受精作用。
(3)在体外培养受精卵时,除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外,还需要提供 (气体)以维持 。
(4)为使⑤能成功进行,需要对奶山羊C进行 处理,使之与供体的生理状况保持相同。
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下面是利用奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图,请回答下列问题:
(1)若要大量获得目的基因,可使用 扩增白蛋白基因,通过③构建的重组表达载体包括目的基因、启动子、终止子和 、复制原点等部分。该重组表达载体导入的受精卵性染色体组成应为 。
(2)如果需要通过①采集到更多的卵子,常用的激素是 ;通过②采集的精子需 后才能进行受精作用。
(3)在体外培养受精卵时,除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外,还需要提供 (气体)以维持 。
(4)为使⑤能成功进行,需要对奶山羊C进行 处理,使之与供体的生理状况保持相同。
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