【生物——选修1:生物技术实践】科学工作者按如下实验计划分离土壤中能分泌淀粉酶的枯草芽孢杆...

【生物——选修1:生物技术实践】科学工作者按如下实验计划分离土壤中能分泌淀粉酶的枯草芽孢杆菌，请根据相关生物学原理和方法答下列问题：

(1)选择培养基的成分包括:水、牛肉膏、蛋白胨、NaCl、_________。该培养基中，能分泌淀粉酶的枯草芽孢杆菌_____________,使不能分泌淀粉酶的微生物生长受到抑制。

(2)取少许选择培养的菌液进行梯度稀释,以______________的方法接种于鉴别培养基上，37℃恒温培养24小时。

(3)选择合适的平板,加入碘液，选周围出现较明显________的菌落纯化留种。

(4)能大量分泌淀粉酶的枯草芽抱杆菌，通过____________技术制作成商品重复使用。

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【生物-选修1：生物技术实践】

下图表示分离、纯化及保存枯草芽孢杆菌菌株的简要过程，回答下列问题：

（1）将土壤表层泥土稀释液煮沸15min后获得的样品中，仍然含有一些活的菌种，原因是_____________。

（2）图中将菌种接种到平板1的方法是_______；将菌种接种到平板2之前，接种工具常用_______法进行灭菌。为了逐步分离、纯化得到目的菌种，平板1和平板2中的培养类型都应该属于______培养基。对于使用频繁的菌种可接种到上图试管中的______培养基上临时保藏。

（3）用稀释涂布平板法在5个平板上都接种稀释倍数为104的样品液0.1mL，培养一段时间后，平板长出来的菌落数分别为182、160、168、175和190，据此推测，每mL样品液中的细菌数量为__________个。稀释涂布平板法能够通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数目，原因是_____________。

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【生物—生物技术实践 】（15分）

某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

（1）采样与培养：将采集的土样混匀后称取lg，置于经过 ________法灭菌处理的液

体培养基中，28℃振荡培养。

（2）接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，

将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计________作为空白对照。

（3）筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是________，则说明此种菌能够________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用________法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。

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（8分）【生物—生物技术实践 】

某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

（1）采样与培养：将采集的土样混匀后称取lg，置于经过 ________法灭菌处理的液体培养基中，28℃振荡培养。

（2）接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计________作为空白对照。

（3）筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是________，则说明此种菌能够________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用________法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。

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【生物技术实践】(15分)

某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

(1)采样与培养：将采集的土样混匀后称取1 g，置于经过灭菌处理的________(填“固体”或“液体”)培养基中，28℃振荡培养。

(2)接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于以________ 为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计________作为空白对照。

(3)筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是________，则说明此种菌能够____________________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用________法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。

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根据微生物培养技术回答下列问题：

（1）用紫外光处理枯草芽孢杆菌，可获得不能合成淀粉酶的突变体。检测发现，诱变后的枯草芽孢杆菌没有丢失DNA片段，那么推测其DNA分子发生了怎样的变化，以致该菌不能合成淀粉酶？___________。

（2）在紫外光处理过程中，若处理时间过短，则获得的突变体不足；若紫外光处理时间过长，又会导致枯草芽孢杆菌大量死亡。为了探究紫外光处理最佳时间，需测定紫外光处理后枯草芽孢杆菌的突变率和存活率。请完成相关实验步骤：

①从临时保存菌种的___________培养基中挑取菌体，制备成菌液，用稀释涂布平板法或___________方法测定枯草芽孢杆菌的浓度；

②______________________，分别用相同强度的紫外灯处理1min、3min、5min；

③将每组处理后的菌液稀释适宜倍数，部分涂布在1个___________的培养基上，等量菌液涂布在1个牛肉膏蛋白胨培养基上。37℃培养48h。

④计数每个平板上的菌落数。牛肉育蛋白胨培养基上的菌落数可用于计算___________，其与另一种培养基上的菌落数可用于计算_____________________。

（3）为了使上述实验结果更精确可信，请提出一项改正措施______________________。

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枯草芽孢杆菌是一种细菌，能分泌淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶和纤维素酶等多种水解酶类， 且不会产生毒素，是一种无致病性的安全微生物，能在人胃内酸性环境中保持活性， 可以耐唾液和胆汁的攻击。以下关于此菌说法错误的是（　　 ）

A.菌体内的酶合成后经内质网、高尔基体加工转运至菌体外

B.可经过人体的口腔、食道、胃等器官安全进入小肠

C.以人肠道内氨基酸、葡萄糖等为营养，属于异养型微生物

D.在人肠道内与人互利共生，可弥补人消化酶的分泌不足

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【生物—选修I:生物技术实践】下图是分离、纯化及保存枯草芽抱杆菌菌株的过程示意图:将土壤表层土稀释液煮沸巧分钟(枯草芽抱杆菌的芽抱不会失去活性)静置5分钟后获得样品，进行如下操作:

请回答下列问题:

(1)可知，除用选择培养基外，还有__________起到筛选作用。

(2)上图的划线操作中，培养基从物质状态分类上属于_______，接种环用____法进行灭菌，划线过程中第一区和最后一区的划线_______________(能/不能)相连。

(3)用稀释涂布平板法在5个培养基平板上，均接种稀释倍数为104的样品液0.1ml,培养一段时间后，平板长出来的菌落数分别为13. 160, 532, 175和187。每毫升样品中的细菌数量为

_______________个。

(4)用上述方法统计出的菌落数往往比样品中活菌的实际数目_____，原因是____。

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【生物——选修l：生物技术实践】塑料袋造成的“白色污染”早已成为地球公害，塑料袋的自然分解需要20 -1000年不等。科学工作者从土壤中找到了一类假单胞杆菌，能将聚乙烯塑料的自然降解过程缩短至3个月，而且分解产物只有水和二氧化碳。从土壤中分离出聚乙烯降解菌的大致过程如下图：

（1）图中“……”表示对土壤悬浮液进行一系列的　　 ，目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在I号培养基表面形成单个　　　 。

（2）从功能方面看，I号培养基属于　　 培养基，其作用是使目的菌能“脱颖而出”。如图采用的接种方法为____　　 。，使用Ⅱ号培养基的目的是使目的菌数目增多，培养基中必须包含水、无机盐、____、 ____等基本营养成分。

（3）为避免杂菌污染培养物和环境，微生物培养的培养基在接种前和完成实验后都要进行　　　　 ；接种时要在____．　　 附近操作。

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【生物一选修1生物技术实践】某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？________（填“能”或“不能”），原因是_________________。

（2）培养基用________方法灭菌，培养皿用________方法灭菌，待培养基冷却到________℃（填“20”、“30”、“40”或“50”）左右时，在________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止________，以免造成污染。

（3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的________就能大约推测出样品中活菌数。

（4）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。

（5）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

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