【生物—选修I:生物技术实践】下图是分离、纯化及保存枯草芽抱杆菌菌株的过程示意图:将土壤表...

【生物—选修I:生物技术实践】下图是分离、纯化及保存枯草芽抱杆菌菌株的过程示意图:将土壤表层土稀释液煮沸巧分钟(枯草芽抱杆菌的芽抱不会失去活性)静置5分钟后获得样品，进行如下操作:

请回答下列问题:

(1)可知，除用选择培养基外，还有__________起到筛选作用。

(2)上图的划线操作中，培养基从物质状态分类上属于_______，接种环用____法进行灭菌，划线过程中第一区和最后一区的划线_______________(能/不能)相连。

(3)用稀释涂布平板法在5个培养基平板上，均接种稀释倍数为104的样品液0.1ml,培养一段时间后，平板长出来的菌落数分别为13. 160, 532, 175和187。每毫升样品中的细菌数量为

_______________个。

(4)用上述方法统计出的菌落数往往比样品中活菌的实际数目_____，原因是____。

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【生物-选修1：生物技术实践】

下图表示分离、纯化及保存枯草芽孢杆菌菌株的简要过程，回答下列问题：

（1）将土壤表层泥土稀释液煮沸15min后获得的样品中，仍然含有一些活的菌种，原因是_____________。

（2）图中将菌种接种到平板1的方法是_______；将菌种接种到平板2之前，接种工具常用_______法进行灭菌。为了逐步分离、纯化得到目的菌种，平板1和平板2中的培养类型都应该属于______培养基。对于使用频繁的菌种可接种到上图试管中的______培养基上临时保藏。

（3）用稀释涂布平板法在5个平板上都接种稀释倍数为104的样品液0.1mL，培养一段时间后，平板长出来的菌落数分别为182、160、168、175和190，据此推测，每mL样品液中的细菌数量为__________个。稀释涂布平板法能够通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数目，原因是_____________。

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【生物一选修1生物技术实践】

传统发酵技术和微生物分离、纯化过程中，无菌操作是微生物接种技术的关键。某实验小组欲从油脂污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株。

（1）在菌株筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_________为唯一碳源的固体培养基上；随后对培养基采用高压蒸汽灭菌，目的是__________________。

（2）为了筛选出目的菌株，可将适量的_________(试剂）滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后若菌落周围出现________________，则说明此菌株能够降解脂肪。

（3）把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，需利用_____________法进行接种，注意每次操作前均要___________；操作时首尾区______________。

（4）细菌培养产生的单个菌落在生态学中称为_________________；实验结束后，使用过的培养基应该进行____________处理后才能倒掉。

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[生物一选修1:生物技术实践]

某小组开展“市售鲜猪肉中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析”的研究，进行了相关实验操作，回答下列问题：

（1）菌株的分离纯化:切取鲜猪肉表层样品接入蛋白胨大豆肉汤培养基中，放在37℃摇床振荡培养18h。取肉汤接种于琼脂平板培养基上，培养后再挑取单菌落，接种培养，培养一段时间后，再次挑取单菌落接种于固体培养基上，多次重复此步骤。菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的______________；操作过程中液体培养的目的是______________，反复接种固体培养基的目的是____________________________。

（2）下面是纸片扩散法对猪大肠杆菌的耐药性实验。

步骤1:用打孔器制成直径约6 mm的圆形滤纸片，浸入一定浓度的氨苄西林，烘干；

步骤2:取含大肠杆菌的菌液均匀涂布于______________上；

步骤3：在培养基上，每隔一定距离贴一片含药物的圆形滤纸片，培养，观察。

分析与评价：

①观察发现，在每个纸片周围都形成了抑菌圈，其直径的大小表示大肠杆菌对氨苄西林的敏感性。抑菌圈直径越大，敏感性越______________（填“高”或“低”）。

②发现在抑菌圈外长满多种不同形态的菌落，其原因可能是_________________________。

③欲比较五倍子和黄连提取液对猪大肠杆菌的抑制作用，为治疗提供依据。请写出实验思路:________。

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[生物——选修1：生物技术实践] 欲降低农作物表面农药甲氰菊酯的残留量，现从土壤中分离纯化能降解甲氰菊酯的菌株，分离方法如下图示:

（1）土样选自_________的土壤中；富集培养基需含丰富的______、 _______水和无机盐。

（2）在操作过程中，取土样用的小铁铲和剩土样的信封在使用前 ________（“需要”或“不需要”）灭菌，并在_______附近将取好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。

（3）培养基换成“基础培养基+甲氰菊酯500mg/mL”的目的是______。

（4）最后一步分离纯化菌种的方法一般是_________（“能”或“不能”） 用来统计样品中的活菌数目。

（5）欲选择高效降解甲氰菊酯的菌株，还需将分离的各菌株接种在 _______的甲氰菊酯作营养的基础培养基上，选择适应浓度高、生长繁殖快而旺盛的单菌落保存。

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[生物——选修1：生物技术实践]　 欲降低农作物表面农药甲氰菊酯的残留量，现从土壤中分离纯化能降解甲氰菊酯的菌株，分离方法如下图示:

（1）土样选自_________的土壤中；富集培养基需含丰富的______、 _______水和无机盐。

（2）在操作过程中，取土样用的小铁铲和剩土样的信封在使用前 ________（“需要”或“不需要”）灭菌，并在_______附近将取好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。

（3）培养基换成“基础培养基+甲氰菊酯500mg/mL”的目的是______。

（4）最后一步分离纯化菌种的方法一般是_________（“能”或“不能”） 用来统计样品中的活菌数目。

（5）欲选择高效降解甲氰菊酯的菌株，还需将分离的各菌株接种在 _______的甲氰菊酯作营养的基础培养基上，选择适应浓度高、生长繁殖快而旺盛的单菌落保存。

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[生物选修1:生物技术实践]根据微生物分离和培养的知识，回答下列问题：

（1）分离纯化大肠杆菌的关键步骤是　　　　 　　 。该步骤常用的方法有两种:　　　　　　 和　　　　　　 ,其中一种方法是将菌液进行一系列的　　　　　　 ，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。

（2）在微生物的实验室培养过程中．获得纯净培养物的关键是　　　　　　　　 ,因此需要对培养基和培养皿进行　　　　　　　　　 处理，操作者的双手需要逬行清洁和　　　　 　　　　 。

（3）分离分解尿素的细菌的培养基中要以尿素为唯一　　　　　　　　 （填“碳源”或“氮源”）。

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【生物—选修模块1：生物技术实践】

请回答与微生物分离和培养有关的问题:

（1）稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是___________（填序号）。为减少误差，在设置平板是一般要______或以上数目平板；若统计出在稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为0．2ml，则每克样品中的菌落数为_______________。

①土壤取样

②称取10g土壤加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液

③吸取0．1ml溶液进行涂布平板

④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度

（2）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。其中对培养基和培养皿进行灭菌的常用方法分别是___________、__________；要求实验操作应在_____________进行，以避免周围环境中微生物的污染。

（3）要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌，而寻找耐热菌要从高温热泉中，这说明寻找目的菌的方法是：______________。

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[生物——选修1:生物技术实践）有些细菌可以分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_____________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于_____________培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_____________和_____________。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_______。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常采用的灭菌方法有灼烧灭菌、_________和_______。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_____________（1分）附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

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【生物—选修1：生物技术实践】

有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以　　　　　 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于　　　　　　 培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即　　　　　　 和　　　　　　 。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力　　 。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、　　　　　 和　　　　 。无菌技术要求实验操作应在　　　　　　　 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

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