[生物一选修1:生物技术实践]某小组开展“市售鲜猪肉中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析”的研...

[生物一选修1:生物技术实践]

某小组开展“市售鲜猪肉中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析”的研究，进行了相关实验操作，回答下列问题：

（1）菌株的分离纯化:切取鲜猪肉表层样品接入蛋白胨大豆肉汤培养基中，放在37℃摇床振荡培养18h。取肉汤接种于琼脂平板培养基上，培养后再挑取单菌落，接种培养，培养一段时间后，再次挑取单菌落接种于固体培养基上，多次重复此步骤。菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的______________；操作过程中液体培养的目的是______________，反复接种固体培养基的目的是____________________________。

（2）下面是纸片扩散法对猪大肠杆菌的耐药性实验。

步骤1:用打孔器制成直径约6 mm的圆形滤纸片，浸入一定浓度的氨苄西林，烘干；

步骤2:取含大肠杆菌的菌液均匀涂布于______________上；

步骤3：在培养基上，每隔一定距离贴一片含药物的圆形滤纸片，培养，观察。

分析与评价：

①观察发现，在每个纸片周围都形成了抑菌圈，其直径的大小表示大肠杆菌对氨苄西林的敏感性。抑菌圈直径越大，敏感性越______________（填“高”或“低”）。

②发现在抑菌圈外长满多种不同形态的菌落，其原因可能是_________________________。

③欲比较五倍子和黄连提取液对猪大肠杆菌的抑制作用，为治疗提供依据。请写出实验思路:________。

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【生物-选修模块1：生物技术实践】

我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如图甲，伊红美蓝培养基配方如图乙。

回答下列相关问题：

（1）图甲中滤膜的孔径应______（“大于”或“小于”）大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌? ______。

（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入______（一种营养成分），以及______。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于______培养基。

（3）该小组通过统计______的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际______（“偏高”或“偏低”），理由是______。

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【生物-选修模块1：生物技术实践】

我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如图甲，伊红美蓝培养基配方如图乙。

回答下列相关问题：

（1）图甲中滤膜的孔径应______（“大于”或“小于”）大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌? ______。

（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入______（一种营养成分），以及______。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于______培养基。

（3）该小组通过统计______的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际______（“偏高”或“偏低”），理由是______。

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【生物-选修模块1：生物技术实践】

我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如图甲，伊红美蓝培养基配方如图乙。

回答下列相关问题：

（1）图甲中滤膜的孔径应______（“大于”或“小于”）大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌? ______。

（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入______（一种营养成分），以及______。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于______培养基。

（3）该小组通过统计______的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际______（“偏高”或“偏低”），理由是______。

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【生物-选修模块1：生物技术实践】

我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如图甲，伊红美蓝培养基配方如图乙。

回答下列相关问题：

（1）图甲中滤膜的孔径应______（“大于”或“小于”）大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌? ______。

（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入______（一种营养成分），以及______。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于______培养基。

（3）该小组通过统计______的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际______（“偏高”或“偏低”），理由是______。

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【生物一选修1生物技术实践】自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般先要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤如下：

A．制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。

B．在适宜温度下培养。

（1）为了得到更加准确的结果，你选用的接种方法是__________。

（2）测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是______。其理由是　　　　　　　　 。

A．一个平板，统计的菌落数是53

B．两个平板，统计的菌落数是62和76，取平均值69

C．三个平板，统计的菌落数分别是61、35和82，取平均值59

D．四个平板，统计的菌落数分别是21、42、61和55，取平均值45

（3）一同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为43．4，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0．2 mL）__________。

（4）用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量________，因为____________。

（5）下表是某同学测定某土壤样品中自生固氮菌数量时配制的培养基配方。

有同学认为此培养基配方有误，请指出： _____________________。

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[生物——选修1：生物技术实践]如图是“DNA粗提取与鉴定”相关实验步骤，请据图分析回答：

（1）鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料，这是因为_________________，从鸡血细胞中释放出核物质的处理方法是向鸡血中加入________________，并__________。如果选用植物细胞，需要选用洗涤剂______________。

（2）图a表示释放核物质后进行过滤的过程，过滤后取______进行下一步实验。

（3）图b表示的相关操作过程中，加入2mol/LNaCl溶液的作用是__________________。

（4）图c表示在滤液中加入冷却的______________，进一步提取含杂质更少的DNA。

（5）实验室提取高纯度的DNA时，通常采用______________、SDS、吐温等化学试剂。

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【生物一选修1生物技术实践】下图是生物兴趣小组为研究“金河牌酸奶中乳酸菌种类及其耐药情况”而制定的流程图。请分析回答：

（1）与酵母菌相比，乳酸菌在结构上的主要区别是　　　 　　　　　　 ，　　 　　　　 （有、无）染色体。

（2）本研究使用的细菌培养基中特别加入了一定量的碳酸钙，乳酸菌在　　 　　　　 （生理过程）中产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可溶性的乳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈。从物理形态分析，本研究使用的培养基属于　　　　　 　 （类型）。

（3）在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，把锅内水加热煮沸，必须

后，将锅密闭，继续加热以保证锅内气压上升，达到121 ℃。灭菌后的培养基应当冷却后，在　　　　 　 附近倒平板。

（4）请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”实验操作步骤：

步骤1：分别取　　　　　　 　　 加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并冷却到50 ℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。

步骤2：向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

步骤3：将接种后的三组培养基和一个　　　　　 都置于适宜温度等条件下培养若干天，观察比较培养基中菌落生长情况。

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[生物——选修1，生物技术实践]某兴趣小组用新鲜的泡菜滤液为实验材料，分离纯化乳酸菌。并査阅相关资料得到如图所示的数据。

请回答下列问题：

(1)第3天至第5天乳酸菌种群数量保持稳定，从种群的数量特征分析，其原因是_______________。

(2)图中第3天pH开始下降，原因是乳酸菌发酵过程中产生__________。制作泡菜过程中泡菜坛一般用水密封，目的是___________________。

(3)若取第4天的新鲜泡菜滤液，用于分离纯化乳酸菌，首先需要用______对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是____________。

(4)分离纯化所用固体培养基中常添加碳酸钙，导致培养基不透明，而乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。可推测培养基中加入碳酸钙的作用是______________，分离纯化时应挑选出_________的菌落作为候选菌。

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【生物——选修1：生物技术实践】某研究小组从泡菜浸泡液中分离出两种不同的乳酸菌（植物乳酸杆菌和布氏乳酸杆菌），并探究接种不同乳酸菌泡菜中亚硝酸盐含量的变化趋势，结果如下图。请回答。

(l)分离和纯化细菌的接种方法有____，通过观察菌落的____（至少答3点）特征区分不同种类的细菌。

(2)泡菜发酵过程中，分析图中第1～2天亚硝酸盐含量变化的原因是____； 第2～5天亚硝酸盐含量变化的原因是____。

(3)制作果酒时利用的微生物主要是________，制作腐乳的过程中，主要是利用毛霉等微生物分泌的____　 等物质。

(4)泡菜制作和果醋制作的最终产物是________（答“单一”或“多种”）组分。

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