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真核生物基因中通常有内含子(位于编码蛋白质序列内的非编码DNA片段),而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。有人利用RT-PCR技术(mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增),获得了牛的G基因,导入到大肠杆菌中,成功表达出G蛋白(一种免疫蛋白)。请回答下列问题:

(1)RT-PCR过程需要的酶有_____________;在进行PCR扩增时需要设计_________种引物。

(2)RT-PCR的产物经过BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切后,与经过同样双酶切得到的PBV载体连接,该操作程序属于_________,也是基因工程的核心步骤。与单一酶切相比,双酶切具有的优点是________________(答出两点)。

(3)若要检测G基因是否翻译出G蛋白,可采用的分子水平的检测方法是_________________。

(4)有人从牛的基因组文库中获得了G基因,同样以大肠杆菌作为受体细胞却未得到G蛋白,其原因是________________。

高三生物非选择题困难题

少年,再来一题如何?
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