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（除标明外，每空1分，共14分）
Ⅰ．利用酵母菌制作果酒
（1）在葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌的来源是________。
（2）利用酵母菌制作果酒的反应式为________。
（3）现代工厂化生产果酒，为提高果酒的品质，更好地抑制其他微生物的生长，采取的措施是________。
（4）果汁发酵后是否有酒精产生，可用________来检验。
Ⅱ．自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。
实验步骤：
（1）制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。
（2）为了得到更加准确的结果，你选用________法接种样品。
（3）适宜温度下培养。
结果分析：
（1）测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是暋暋暋，其理由是________。
A．一个平板，统计的菌落数是230
B．两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240
C．三个平板，统计的菌落数分别是210、50和520，取平均值260
D．四个平板，统计的菌落数分别是210、300、240和250，取平均值250
（2）一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0．2mL）________。
（3）用这种方法测定的大肠杆菌密度，实际活菌数量要比测得的数量________，因为________。
（4）某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的菌种被污染了?________为什么?（2分）。
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某研究小组欲用葡萄汁为原料，利用发酵瓶制作果酒和果醋，请分析回答：
（1）将葡萄汁放入发酵瓶时，要预留约_________的空间。在果酒的自然发酵过程中，酵母菌的来源是_________。
（2）酒精发酵时，一般将温度控制在_________℃范围内。在发酵过程中，随着酒精度数的提高，葡萄酒呈现深红色的原因是__________________。葡萄酒的发酵液中，除酵母菌外，绝大多数微生物的生存受到抑制，其原因是___________________________。
（3）变酸的果酒表面有一层醋酸菌形成的菌膜，当________都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的______分解成醋酸。若要在该菌膜中筛选醋酸菌菌株，可通过_________法进行。
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（选修1．《生物技术实践》）（18分）下图为酿制葡萄酒的两个简易装置，请回答：
（1）在葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌的来源是________。
（2）制作果酒，需将温度严格控制在________℃。制作果酒后制果醋，应将温度控制在________℃。
（3）甲装置中， NaHCO3溶液的作用是________；若用乙装置，在发酵过程中，必须进行的操作是________。
（4）葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1／3的空间，这是因为________。
（5）果汁发酵后是否有酒精产生，可用________来检验。在酸性条件下，该试剂与酒精反应呈现________。在果酒酿造过程中，如果果汁灭菌不严格，含有醋酸杆菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸? ________。
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回答下列（一）、（二）小题。
（一）回答与果酒及果醋制作有关的问题：
（1）葡萄酒的自然发酵过程中，菌种的来源主要是附在葡萄皮上的野生型酵母菌。要筛选得到纯净的酵母菌种，首先要配置培养基，配好后应置于压力锅内加热一段时间，以达到____________目的。加热结束后，不能立刻开锅，否则培养基会____________。在固体培养基上划线分离时，单菌落会出现在__________。在上述筛选过程中，不该出现的操作是____________。
（2）下图装置中弯曲的安全玻璃管可以让瓶中的二氧化碳气体排出，还可以____________。为了制作酒精含量较高（体积分数约为15%）、糖含量也较高的葡萄酒，可以向果汁中加入适量____________。
（3）果醋发酵过程中，随着发酵的进行，乙醇含量逐渐下降，这是由于醋杆菌在____________和酸性环境下将乙醉氧化为醋酸。
（二）基因敲除是针对某个序列己知但功能未知的基因，改变其基因结构，令该基因功能丧失，从而对生物体造成影响，进而推测出该基因功能的一门技术。以下是制备APOE 基因敲除小鼠的常规过程：
备注：neo基因是抗新霉素的抗药基因；APOE是指载脂蛋白E，参与脂蛋白的代谢与转化。
请回答：
（1）为了获得APOE基因，可以用____________或者PCR扩增。过程②中所需的工具酶有__________。Nco基因除了破坏APOE基因外，还具存的作用最可能是____________。
（2）培养小鼠胚胎干细胞时，首先要在培养皿底部制备饲养层，用于饲养层的细胞—般是__________。经过⑥克降以后的细胞的后裔细胞辟称为纯系，细胞纯系的特点是____________，从而便于研究。
（3）纯合的APOE基因敲除小鼠____________（能/不能）表达APOE，与正常小鼠相比表现出 ____________性状。
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下列关于生产果酒的说法中正确的是（ ）
A．利用自然菌种发酵时，应将装有葡萄汁的发酵并进行高压灭菌
B．酵母菌的生命力强，因此果酒制作时不需要对所用器具消毒和灭菌
C．红葡萄皮的色素在发酵过程中会进入发酵液，使葡萄酒呈红色
D．在碱性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色
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下列关于生产果酒的说法中正确的是
A．利用自然菌种发酵时，应将装有葡萄汁的发酵瓶进行高压灭菌
B．酵母菌的生命力强，因此果酒制作时不需要对所用器具消毒和灭菌
C．红葡萄皮的色素在发酵过程中会进入发酵液，使葡萄酒呈红色
D．在碱性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色
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利用传统发酵技术制作的果酒、果醋、腐乳、泡菜极大地丰富了人们的饮食。回答下列问题。
（1）在葡萄酒自然发酵过程中，起主要作用的菌种来自___________。酵母菌液体培养时，若通入氧气，可促进___________；若进行厌氧培养，可促进___________。
（2）果醋发酵过程中．适宜的温度为______℃。当缺少糖源时，醋酸菌可以将乙醇作为底物，将___________（填乙醇转变为醋酸的过程），从而实现醋酸发酵。该过程需在___________（填“有氧”或“无氧”）条件下进行。
（3）豆腐富含蛋白质和脂肪，由于微生物的作用，腐乳中甘油、脂肪酸及小分子肽、氨基酸的含量增加，说明这些微生物能产生___________。
（4）泡菜发酵中期，主要是___________（填微生物种类）进行发酵，pH明显下降，其他微生物的生长受到抑制。
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人们利用微生物发酵制作果酒、果醋的历史，源远流长。果酒的制作离不开酵母菌，果醋的制作需要醋酸菌。
（1）果酒的制作流程是：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵。在这个过程中没有接种酵母菌的环节，发酵时的酵母菌来自____________________；若用密闭的装置进行酒精发酵，则在发酵过程中需每隔12小时左右将瓶盖拧松一次，这样做的目的是__________。果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。其原理是在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现__________色。
（2）为提高果酒的品质，更好的抑制其他微生物的生长，可以直接在果汁中加入人工培养的酵母菌。人工培养酵母菌时可从土壤中分离、再培养。从土壤中分离酵母菌，基本步骤包括：取样土壤+无菌水，制作成土壤溶液；对土壤溶液进行过滤；取滤液进行__________；再用_________在专用的培养基上进行初步的筛选。为了防止杂菌污染，分离所用器具、培养基等都需__________处理。
（3）果醋的制作是在果酒制作的基础上进行的。该过程与果酒制作过程比较，在条件控制上除了需要控制不同的温度外，果醋的制作还需要向发酵装置内__________。
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近年来，纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品。请分析回答下列问题：
(1)在葡萄酒的自然发酵过程中，醉母菌的来源是______________。
(2)腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。用盐腌制时，应注意控制____________；配制卤汤时，要使卤汤中酒精的含量控制在___________%左右。
(3)微生物培养时，如果想让培养基内只生长真菌，不长细菌，则可用含___________的培养基；后期进行菌落统计时，一般选择菌落数在______________间的平板进行计数。
(4)制作泡菜过程中，会产生亚硝酸盐，在________________________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生___________反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成________色燃料。
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⑴果酒的制作离不开酵母菌，最适合酵母菌繁殖的的温度为_______℃左右，在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的_______型酵母菌。在发酵过程中，随着酒精度数的提高，红葡萄皮的_________也进入发酵液，使葡萄酒呈现深红色。在________________的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。
⑵腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是________，腐乳 “尝着鲜”是在发酵过程中产生了特殊的__________ ，发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制________生长。
⑶制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是________。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是________。泡菜坛内有时会长一层白膜，这是__________大量繁殖的结果。
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