从土壤中分离纤维素分解菌的基本程序如图甲所示;图乙是在刚果红培养基上培养得到的纤维素分解菌...

从土壤中分离纤维素分解菌的基本程序如图甲所示;图乙是在刚果红培养基上培养得到的纤维素分解菌菌落。分析下图,回答有关问题。

(1)根据物理状态划分,图乙中使用的培养基属于______培养基。

(2)微生物接种技术的核心是______。使用图甲的接种方法,在培养基的______(填序号)区域更容易获得单菌落。

(3)得到图乙中的菌落,应采用的接种方法为_____ ,该方法还可以对样品中的活菌进行______。

(4)根据图乙中菌落周围______的大小,可以判断出______ (填编号)是最理想的菌株。若要长期保存分离得到的纤维素分解菌,可以采用______的方法。

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下列关于培养基的叙述，正确的是（　　 ）

A.从土壤中分离分解纤维素的微生物，可以先用不加刚果红的液体培养基选择培养，以增加纤维素分解菌的浓度

B.可利用液体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型

C.培养微生物时，培养基中均需添加水、碳源、氮源、无机盐

D.感染杂菌的培养基和使用过的培养基都必须经灭菌处理后才能丢弃

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请回答下列问题：

（1）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

注：“+”表示有，“－”表示无。

据表判断，培养基甲______（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_________________________________________；培养基乙______（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是________________________________。

（2）为测定培养液中某细菌数量，某小组同学抽取1mL培养液经10倍的梯度稀释后进行接种培养，每个培养基上接种量为0.1mL，随后对每个培养基中出现的菌落进行计数（结果如下）。培养液中菌体数目约为__________________个/mL

【答案】　 不能　 液体培养基不能分离单菌落　 不能　 乙培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌　 3.9×107

【解析】试题分析：本题考查微生物的分离与计数，考查对纤维素分解菌分离、鉴定、计数原理的理解，解答此题，可根据纤维素分解菌的分离、鉴定原理判断甲、乙两个培养基是否符合实验要求，根据平板计数原则计算培养液中菌体数目约。

（1）据表判断，培养基甲不含有琼脂，为液体培养基，不能形成菌落，不能用于分离和鉴别纤维素分解菌；培养基乙没有纤维素，虽然含有CR，但不会形成CR-纤维素红色复合物，即使含有纤维素分解菌也不会出现透明圈，不能根据菌落特征分离和鉴别纤维素分解菌。

（2）进行菌落计数时应选择菌落数在30~300之间的平板进行计数，据表可知稀释4次后接种的培养基只有1号平板符合要求，稀释5次后接种的平板1号、4号平板符合要求，因此应选择稀释5次后接种的平板进行计数，平板上平均菌落数为（38+40）/2=39个，则培养液中菌体数目约为39÷0.1×105=3.9×107个/mL。

【题型】非选择题
【结束】
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绿藻A是某种单细胞绿藻，能够合成物质W。某小组为探究氮营养缺乏对绿藻A增殖及物质W累计的影响，将等量的绿藻A分别接种在氮营养缺乏和氮营养正常的两瓶培养液中，并在适宜温度和一定光强下培养。定时取样并检测细胞浓度和物质W的含量，结果如图。

（1）本实验的实验组为___________________。从图甲可知，在氮营养正常培养液的瓶中，绿藻A的种群增长曲线呈_________型。

（2）综合图甲和图乙的信息可知，在生产上，若要用少量的绿藻A获得尽可能多的物质W，可以采取的措施是_________________________________________________________。

（3）在以上研究的基础上，某人拟设计实验进一步研究氮营养缺乏程度对物质W积累的影响，则该实验的自变量是_____________。

（4）物质W为无色针状晶体，易溶于极性有机溶剂，难溶于水，且受热、受潮易分解。在提取物质W时，最好应选用的一种原料是____________（填“高温烘干”“晾干”或“新鲜”）的植物甲，不宜选用其他两种的原因是___________________________________________。

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下列与纤维素分解菌及其分离实验的有关说法，错误的是（　　 ）

A.纤维素酶至少包括三种组分：C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶

B.正确的操作流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→挑选菌落

C.刚果红可与纤维素形成透明复合物，所以可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌

D.通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中纤维素酶产量

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下列有关培养基和菌种鉴定的叙述，错误的是（　　 ）

A. 可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型

B. 为了确定得到的是纤维素分解菌，还需要发酵产纤维素酶的实验

C. 利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌

D. 在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌

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下列关于纤维素分解菌分离实验的说法不正确的是

A．通常采用刚果红染色法筛选纤维素分解菌

B．从土壤中分离含量较多的微生物时，选择培养可以省略

C．该实验用到选择和鉴别培养基

D．在用刚果红染色法中，若将微生物培养在事先加入刚果红的培养基上，出现透明圈的菌落肯定为所需菌种

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以下关于微生物的分离、培养和鉴定实验，说法错误的是（　　）

A.鉴定纤维素分解菌用刚果红染色法

B.鉴定分解尿素的细菌需在培养基中加入酚红指示剂

C.计数土壤中的尿素分解菌应选择菌落数在300以上的平板

D.分离土壤中的纤维素分解菌要到富含纤维素的环境中去寻找

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在筛选纤维素分解菌的培养基中加入刚果红染料，研究者观察到几个有透明圈的菌落。据图分析正确的是　　 （　 ）

A.透明圈内的刚果红染料已被分解

B.菌落②中的菌株降解纤维素能力最强

C.图中菌落可能是细菌也可能是真菌

D.图中培养基可用牛肉膏、蛋白胨配制

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微生物在生产实践中应用广泛，请回答下列有关问题。

（1）从土壤中分离纤维素分解菌，所用的培养基应以________作为唯一碳源。这种培养基属于________培养基（依据用途划分）。

（2）制作葡萄醋的工艺流程如下：

挑选葡萄→冲洗→榨汁→发酵→过滤灭菌。

①在此过程中最关键的步骤是________。制作过程中为了防止发酵液被污染，应做好如下工作：__________________________、_________________________等。

②发酵时温度应控制在________，并且要适时____，原因是________________________________（

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在从土壤中分离出分解纤维素的微生物的实验中，先进行选择培养，再用刚果红染色法进行分离，先选择培养的目的是（　　 ）

A. 浓缩目标菌种　　 B. 除去杂菌，获得能分解纤维素的纯种菌

C. 杀灭不需要的微生物　　 D. 在微生物的菌落上获得纤维素分解菌菌种

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