雪灵芝是青藏高原特有的野生药材，为研究雪灵芝提取物对人胃癌细胞增殖的影响，科研人员利用含不...

（题文）雪灵芝是青藏高原特有的野生药材．为研究雪灵芝提取物对人胃癌细胞增殖的影响，科研人员利用含不同浓度雪灵芝提取物的培养液培养人胃癌细胞，一段时间后检测胃癌细胞周期中各期细胞百分比，结果如表．下列叙述正确的是（　　）

（注：分裂间期分为G1、S、G2三个阶段，其中S期进行DNA复制；M为分裂期．）

A. 雪灵芝提取物可阻止胃癌细胞从G1期进入S期

B. 若用高倍显微镜观察发现胃癌细胞膜糖蛋白大量减少

C. 四组实验中c组胃癌细胞分裂期持续时间最长

D. d组雪灵芝提取物浓度为抑制胃癌细胞增殖最适浓度

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雪灵芝是青藏高原特有的野生药材，为研究雪灵芝提取物对人胃癌细胞增殖的影响，科研人员利用含不同浓度雪灵芝提取物的培养液培养人胃癌细胞，一段时间后检测胃癌细胞周期中各期细胞百分比，结果如图所示。下列叙述正确的是

注：分裂间期分为G1、S、G2三个阶段，其中S期进行DNA复制，M为分裂期。

A. 雪灵芝提取物可阻止胃癌细胞从G1期进入S期

B. 用高倍显微镜观察发现胃癌细胞膜糖蛋白大量减少

C. 四组实验中c组胃癌细胞分裂期持续时间最长

D. d组雪灵芝提取物浓度为抑制胃癌细胞增殖的最适浓度

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研究人员为探究紫檀芪对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其机理，进行了如下实验，以期为临床应用提供依据。

实验一：紫擅芪对胃癌细胞增殖影响研究取等量旺盛增殖的胃癌细胞，分别接种到含不同浓度紫檀芪的培养液中，分别培养24、48、72h后收集细胞。运用台盼蓝拒染法统计活细胞数量，并计算癌细胞增殖抑制率，结果如图1。注：癌细胞增殖抑制率=（对照组活细胞数-实验组活细胞数）/对照组活细胞数×100%。

实验二：紫擅芪对胃癌细胞凋亡蛋白表达的影响研究用含不同浓度紫檀芪的培养液培养旺盛增殖的胃癌细胞。48h后电泳比较几种细胞凋亡指示蛋白的含量（Caspase-9是一种凋亡启动因子；Bax能引起线粒体穿孔导致线粒体内物质外流；Bcl-2蛋白是细胞存活促进因子，能抑制细胞凋亡），结果如图2。

请回答下列问题：

（1）培养胃癌细胞时，培养液中加入胎牛血清的作用是___________，培养箱中充入5% CO2的作用是___________。在进行传代培养时不能使用胃蛋白酶的原因是___________。

（2）实验一中用台盼蓝拒染法检测细胞存活率时，活细胞未被染成蓝色是因为___________。根据图一结果，研究人员建议临床上选择浓度为40μmol·L-1的紫檀芪进行化疗，其依据是___________，为了达到更理想的治疗效果还需要注意___________。

（3）根据实验二结果分析，紫檀芪能诱导胃癌细胞凋亡的机理有___________（至少答两点）。

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请分析回答下列有关动植物生命活动影响因素的相关问题：

（1）科研人员为研究JS-K（一种新合成的抗肿瘤药物）对胃癌细胞的抑制效应及机制进行了相关实验。

①配制不同浓度的JS-K溶液，添加于各组完全培养液中，每隔一段时间检测胃癌细胞存活率如图1，研究结果表明：JS-K抑制胃癌细胞存活，且抑制效果随着剂量的增加和处理时间的延长而______________。

②实验过程中还用到一种Z试剂，相关结果如图2，根据结果推测，Z试剂可能是细胞凋亡的___________（填“促进”或“抑制”）剂。

③研究者进一步研究了JS-K诱导胃癌细胞凋亡的机制，发现JS-K是通过促进活性氧的产生诱导胃癌细胞凋亡的。研究者川JS-K和NAC同时处理胃癌细胞，发现其与______________的胃癌细胞存活率相似，但比用______________处理的胃癌细胞存活率显著高，猜测NAC是一种______________的清除剂。

（2）科研人员为研究某种植物侧芽前发生长的影响因素进行相关实验。对具有顶端优势的杜鹃兰假鳞茎分别进行打顶、顶芽涂抹三碘苯甲酸（能抑制生长素的运输）处理，对照组不作处理。第5天后处理组侧芽开始萌发并在第9天后快速生长，分别检测各组侧芽处的生长素（IAA）和细胞分裂素（CTK）的含量结果如图甲和乙所示。

①打顶后，侧芽处植物内源激素出现下降的是___________________，以促进侧芽萌发。

②本实验研究的影响因素有___________________、___________________、___________________。

③IAA/CTK的值比未萌发时___________________（变小、变大、不变）有利于侧芽萌发，当杜鹃兰侧芽快速生长时，两种激素含量变化是___________________。

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研究发现，细胞癌变与染色体结构变异有关，大蒜中的大蒜素能影响癌细胞的增殖。科研小组利用大蒜素和胃癌细胞进行实验，探究不同浓度的大蒜素对癌细胞的存活率（实验72h时测定）和细胞周期中不同时期细胞数量的影响，结果如表所示。下列有关叙述不正确的是（　　 ）

不同浓度大蒜素对癌细胞存活率及细胞周期不同时期细胞数量的影响

（注：G0表示细胞周期间暂不分裂时期，G1、S、G2、M分别表示细胞周期的DNA复制前期、DNA复制期、DNA复制后期和分裂期）

A.染色体部分片段的缺失或重复可能会引起胃细胞发生癌变

B.一定浓度范围内，随着大蒜素浓度的增加，胃癌细胞存活率降低

C.大蒜素是通过影响DNA复制期抑制胃癌细胞增殖的

D.胃癌患者日常饮食中多食用大蒜可能有利于控制病情

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研究发现，青蒿素能抗癌，并有可能彻底改变癌症的治疗方法。研究人员从青嵩中提取出青蒿素，加入细胞培养液中培养人乳腺癌细胞，检测青蒿素对癌细胞增殖的影响。青蒿素浓度和实验结果如图1所示。

（1）此实验中还应有一组对照实验，其处理是_________________________________。

（2）图1结果说明青蒿素能___________，且青蒿素作用的效果受___________和___________的影响。

（3）研究发现，人体内大多数癌细胞都表现出较高的端粒酶活性。选用青蒿素浓度为40μg•mL-1的培养液培养癌细胞，测定端粒酶活性，结果如图2所示。综合两个实验结果，可以得出结论：______________。

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相关研究表明，蜂毒素可引起细胞凋亡。科研人员为进一步研究蜂毒素对人胃癌细胞的影响及作用机制，进行了以下实验。请完善相关实验并回答问题。

（1）方法步骤：

a．取4只相同的培养瓶，编号，分别加入等量的完全培养液和__________。

b．1号培养瓶为空白对照，向2-4号培养瓶中分别加入____________。

c．培养48h后，检测并统计____________，结果如下图所示：

（2）分析与讨论：

a．图-1表明：_______________。增强

b．图-1、图-2表明：促进胃癌细胞凋亡的是__________，抑制胃癌细胞凋亡的是____________ 。因此，从基因水平上看，蜂毒素诱导胃癌细胞凋亡的原理是____________。

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吴茱萸是一种中药，其主要成分为吴茱萸碱（EVO）。为研究EVO对人胃癌细胞增殖的影响及作用机制，科研人员做了以下实验。请回答问题：

（1）检测EVO对胃癌细胞BGC-823增殖的影响。

①用含动物血清的DME/F-12培养基置于恒温培养箱中培养BGC-823，动物血清的作用是___________。

②取出上述培养的细胞，加入胰蛋白酶制成________细胞悬液，置于加入不同浓度EVO的多孔板中进行培养。

③EVO对BGC-823细胞增殖影响的实验结果如图1。

实验结果表明____________________。

（2）检测EVO对BGC-823细胞周期的影响，结果如下表。

细胞周期中各期的细胞比例

据表可知，EVO能诱导细胞周期阻滞于__________期。

（3）检测EVO对BGC-823细胞周期和细胞凋亡相关蛋白表达的影响，结果如图2。

①根据上述实验，可判断__________是细胞周期抑制蛋白，该蛋白能与细胞周期蛋白基因的启动子结合，抑制其__________，从而抑制BGC-823细胞周期的运行。

②细胞凋亡蛋白Caspase-3表达量__________，该蛋白参与细胞的__________死亡过程。

（4）综上所述，推测EVO对人胃癌细胞的作用机制是____________________。

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科研人员为研究 JS-K（一种新合成的抗肿瘤药物）对胃癌细胞的抑制效应及机制进行了相关实验。

（1）体外癌细胞培养：胃癌细胞培养于含动物血清（目的是更好地模拟体内的 ________成分） 的完全培养液中，并补充_________以防污染。经_________消化制成细胞悬液。将装有细胞悬液的培养瓶置于 CO2 恒温培养箱中培养。

（2）配制不同浓度的 JS-K 溶液，添加于各组完全培养液中。每隔一段时间检测胃癌细胞存活率。

（3）研究结果表明：JS-K 抑制胃癌细胞存活，且抑制效果随着剂量的增加和处理时间的延长而 ________，如图 1。在图中画出 24h 时各浓度下胃癌细胞的存活率曲线_________。本实验的可变因素是____。

（4）实验过程中还用到一种 Z 试剂，相关结果如图 2。根据结果推测，Z 试剂可能是细胞凋亡的____________ （填“促进”或“抑制”）剂。

（5）研究者进一步研究了 JS-K 诱导胃癌细胞凋亡的机制，发现 JS-K 是通过促进活性氧的产生诱导胃癌细胞凋亡的。研究者用 JS-K 和 NAC 同时处理胃癌细胞，发现其与____________ 的胃癌细胞存活率相似，但比用__________________处理的胃癌细胞存活率显著高。猜测 NAC 是一种 _________________的清除剂。

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科研人员想研究“在胰岛素使用总量不变的前提下，胰岛素使用次数对同一组织不同细胞株克隆效率的影响”。请完成实验思路，并分析实验结果。

实验材料：M浓度胰岛素溶液(小鼠血浆昼夜平均胰岛素浓度)、培养液、小鼠皮肤生发层组织(能增殖)、胰蛋白酶、3种抗体、生理盐水等。

(要求与说明：答题时不考虑加入胰岛素溶液后的培养液体积变化等误差；不同浓度的胰岛素溶液加入细胞培养液的间隔时间为24小时；抗体能识别特定的膜蛋白质，但不损伤细胞)

(1)实验思路：

①向有小鼠皮肤生发层组织的培养液中加入　　 获得单细胞悬浮液，在每瓶中加入　　 从而获取3种特殊细胞，分别命名为细胞株1、2、3。

②将M浓度胰岛素溶液分别稀释到原浓度的1/2、1/3，备用。

③实验分组及操作。若实验在适宜条件下进行72小时，以细胞株1为例，将细胞株1均分为3份实验，请完成下列表格。

(2)实验分析：

①本实验用克隆化细胞株而不是原代培养物作实验材料，原因是克隆化细胞株中的细胞具有　　 的特点，这样可以减少实验误差。

②按照上述实验操作，可能还会产生一定的误差，改进的办法是　　 。

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