（题文）雪灵芝是青藏高原特有的野生药材．为研究雪灵芝提取物对人胃癌细胞增殖的影响，科研人员...

（题文）雪灵芝是青藏高原特有的野生药材．为研究雪灵芝提取物对人胃癌细胞增殖的影响，科研人员利用含不同浓度雪灵芝提取物的培养液培养人胃癌细胞，一段时间后检测胃癌细胞周期中各期细胞百分比，结果如表．下列叙述正确的是（　　）

（注：分裂间期分为G1、S、G2三个阶段，其中S期进行DNA复制；M为分裂期．）

A. 雪灵芝提取物可阻止胃癌细胞从G1期进入S期

B. 若用高倍显微镜观察发现胃癌细胞膜糖蛋白大量减少

C. 四组实验中c组胃癌细胞分裂期持续时间最长

D. d组雪灵芝提取物浓度为抑制胃癌细胞增殖最适浓度

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雪灵芝是青藏高原特有的野生药材，为研究雪灵芝提取物对人胃癌细胞增殖的影响，科研人员利用含不同浓度雪灵芝提取物的培养液培养人胃癌细胞，一段时间后检测胃癌细胞周期中各期细胞百分比，结果如图所示。下列叙述正确的是

注：分裂间期分为G1、S、G2三个阶段，其中S期进行DNA复制，M为分裂期。

A. 雪灵芝提取物可阻止胃癌细胞从G1期进入S期

B. 用高倍显微镜观察发现胃癌细胞膜糖蛋白大量减少

C. 四组实验中c组胃癌细胞分裂期持续时间最长

D. d组雪灵芝提取物浓度为抑制胃癌细胞增殖的最适浓度

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研究发现，细胞癌变与染色体结构变异有关，大蒜中的大蒜素能影响癌细胞的增殖。科研小组利用大蒜素和胃癌细胞进行实验，探究不同浓度的大蒜素对癌细胞的存活率（实验72h时测定）和细胞周期中不同时期细胞数量的影响，结果如表所示。下列有关叙述不正确的是（　　 ）

不同浓度大蒜素对癌细胞存活率及细胞周期不同时期细胞数量的影响

（注：G0表示细胞周期间暂不分裂时期，G1、S、G2、M分别表示细胞周期的DNA复制前期、DNA复制期、DNA复制后期和分裂期）

A.染色体部分片段的缺失或重复可能会引起胃细胞发生癌变

B.一定浓度范围内，随着大蒜素浓度的增加，胃癌细胞存活率降低

C.大蒜素是通过影响DNA复制期抑制胃癌细胞增殖的

D.胃癌患者日常饮食中多食用大蒜可能有利于控制病情

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研究人员为探究紫檀芪对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其机理，进行了如下实验，以期为临床应用提供依据。

实验一：紫擅芪对胃癌细胞增殖影响研究取等量旺盛增殖的胃癌细胞，分别接种到含不同浓度紫檀芪的培养液中，分别培养24、48、72h后收集细胞。运用台盼蓝拒染法统计活细胞数量，并计算癌细胞增殖抑制率，结果如图1。注：癌细胞增殖抑制率=（对照组活细胞数-实验组活细胞数）/对照组活细胞数×100%。

实验二：紫擅芪对胃癌细胞凋亡蛋白表达的影响研究用含不同浓度紫檀芪的培养液培养旺盛增殖的胃癌细胞。48h后电泳比较几种细胞凋亡指示蛋白的含量（Caspase-9是一种凋亡启动因子；Bax能引起线粒体穿孔导致线粒体内物质外流；Bcl-2蛋白是细胞存活促进因子，能抑制细胞凋亡），结果如图2。

请回答下列问题：

（1）培养胃癌细胞时，培养液中加入胎牛血清的作用是___________，培养箱中充入5% CO2的作用是___________。在进行传代培养时不能使用胃蛋白酶的原因是___________。

（2）实验一中用台盼蓝拒染法检测细胞存活率时，活细胞未被染成蓝色是因为___________。根据图一结果，研究人员建议临床上选择浓度为40μmol·L-1的紫檀芪进行化疗，其依据是___________，为了达到更理想的治疗效果还需要注意___________。

（3）根据实验二结果分析，紫檀芪能诱导胃癌细胞凋亡的机理有___________（至少答两点）。

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吴茱萸是一种中药，其主要成分为吴茱萸碱（EVO）。为研究EVO对人胃癌细胞增殖的影响及作用机制，科研人员做了以下实验。请回答问题：

（1）检测EVO对胃癌细胞BGC-823增殖的影响。

①用含动物血清的DME/F-12培养基置于恒温培养箱中培养BGC-823，动物血清的作用是___________。

②取出上述培养的细胞，加入胰蛋白酶制成________细胞悬液，置于加入不同浓度EVO的多孔板中进行培养。

③EVO对BGC-823细胞增殖影响的实验结果如图1。

实验结果表明____________________。

（2）检测EVO对BGC-823细胞周期的影响，结果如下表。

细胞周期中各期的细胞比例

据表可知，EVO能诱导细胞周期阻滞于__________期。

（3）检测EVO对BGC-823细胞周期和细胞凋亡相关蛋白表达的影响，结果如图2。

①根据上述实验，可判断__________是细胞周期抑制蛋白，该蛋白能与细胞周期蛋白基因的启动子结合，抑制其__________，从而抑制BGC-823细胞周期的运行。

②细胞凋亡蛋白Caspase-3表达量__________，该蛋白参与细胞的__________死亡过程。

（4）综上所述，推测EVO对人胃癌细胞的作用机制是____________________。

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请分析回答下列有关动植物生命活动影响因素的相关问题：

（1）科研人员为研究JS-K（一种新合成的抗肿瘤药物）对胃癌细胞的抑制效应及机制进行了相关实验。

①配制不同浓度的JS-K溶液，添加于各组完全培养液中，每隔一段时间检测胃癌细胞存活率如图1，研究结果表明：JS-K抑制胃癌细胞存活，且抑制效果随着剂量的增加和处理时间的延长而______________。

②实验过程中还用到一种Z试剂，相关结果如图2，根据结果推测，Z试剂可能是细胞凋亡的___________（填“促进”或“抑制”）剂。

③研究者进一步研究了JS-K诱导胃癌细胞凋亡的机制，发现JS-K是通过促进活性氧的产生诱导胃癌细胞凋亡的。研究者川JS-K和NAC同时处理胃癌细胞，发现其与______________的胃癌细胞存活率相似，但比用______________处理的胃癌细胞存活率显著高，猜测NAC是一种______________的清除剂。

（2）科研人员为研究某种植物侧芽前发生长的影响因素进行相关实验。对具有顶端优势的杜鹃兰假鳞茎分别进行打顶、顶芽涂抹三碘苯甲酸（能抑制生长素的运输）处理，对照组不作处理。第5天后处理组侧芽开始萌发并在第9天后快速生长，分别检测各组侧芽处的生长素（IAA）和细胞分裂素（CTK）的含量结果如图甲和乙所示。

①打顶后，侧芽处植物内源激素出现下降的是___________________，以促进侧芽萌发。

②本实验研究的影响因素有___________________、___________________、___________________。

③IAA/CTK的值比未萌发时___________________（变小、变大、不变）有利于侧芽萌发，当杜鹃兰侧芽快速生长时，两种激素含量变化是___________________。

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在一定剂量范围内苜蓿中的黄酮对动物乳腺上皮细胞增殖具有一定促进作用。为研究不同浓度苜蓿黄酮对乳腺上皮细胞的增殖及其对乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响，科研人员用MTT法以细胞悬液OD值为观测指标测定细胞增殖能力，进行了相关实验研究。请完善实验思路，并根据实验结果进行分析。

实验材料与仪器：

用二甲基亚砜（DMSO）配置的浓度为25、50、75和100µ/mL苜蓿黄酮溶液、用动物细胞培养液配制的一定密度的动物乳腺上皮细胞悬液、光电比色计、MTT法细胞增殖测定仪器等

（要求与说明：MTT法测定细胞增殖具体操作不作要求；乳酸脱氢酶（LDH）活性检测不作要求；在一定细胞数范围内，OD值与细胞数成正比；培养过程中培养液变化忽略不计；实验条件适宜）

（1）完善实验思路

①取若干培养瓶，各加入998mL的细胞悬液，分为5组，编号甲~戊，每组5个重复。

②甲组：加入2mL二甲基亚矾；_______。

③________。

④实验第5天，_______。

⑤________。

（2）结果分析与结论

苜蓿黄酮对某动物乳腺上皮细胞增殖及其乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响

注：表中*表示与对照组比较有统计学上的显著差异，不带*数据表示与对照组无显著差异；（单位：略）

根据上表可得实验结论：

结论一：作用时间较短时（3天），苜蓿黄酮对细胞增殖无明显作用；

结论二：_______；

结论三：_______。

（3）实验分析

细胞呼吸中，乳酸脱氢酶（LDH）催化的反应_______（填“产生”或“不产生”）ATP，这一催化反应发生在_______（填“需氧”或“厌氧”）呼吸中。本实验中还可用细胞培养上清液中LDH的浓度代表细胞的受损程度的原因是_______。为减少微生物对实验结果带来的干扰，实验中的动物细胞培养基中添加的胎牛血清可采用_______（方法）去除杂菌。

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铁皮石斛是一种名贵中药材。野生的铁皮石斛有的生长在背阴处，有的生长在向阳处，但由于其对生长条件要求特殊、细胞分裂缓慢等原因，导致产量极低。某科研人员为了探究不同光照强度下温度对铁皮石斛生长的影响，进行了相关实验，其实验的结果如下图。分析回答：

（1）铁皮石斛叶肉细胞进行光合作用时，驱动光反应与暗反应进行的能量分别是____________。测定铁皮石斛净光合速率是在密闭的反应室中进行，室内除____________外，其它条件均应处于比较适宜的状态。

（2）由图可知，当栽培温度从15℃增加到25℃时，O→M点净光合速率明显增加，这主要是因为__________；而从P→N点净光合速率增加不明显，这是因为光照不足，叶绿体的类囊体上生成____________等物质的速率减慢，导致暗反应阶段C3转化为____________的过程变慢。

（3）分析实验结果可知，在铁皮石斛的生长期应控制的适宜条件是____________。

（4）研究发现，叶绿体的大小、数目会随植物生存环境的不同而不同。试比较生长在向阳处与背阴处的铁皮石斛细胞中叶绿体的大小和数目的多少。________________________。

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蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽，具有抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛的生物学效应。 体外研究发现，蜂毒素对多种癌细胞具有强烈的杀伤作用。研究表明，阻断癌细胞增殖周期可引起细胞凋亡．科研人员为研究蜂毒素对人胃癌细胞的影响及作用机制，进行了以下实验。请完善实验并回答问题。

①方法步骤：

a．取4只相同的培养瓶编号，分别加入等量的完全培养液并接种等量离体胃癌细胞。

b．I号培养瓶为空白对照，向2～4号培养瓶中分别加入______μg/mL蜂毒素溶液。

c．培养48小时后，检测并统计______，结果如图1所示。

d．重复a、b步骤，检测凋亡基因（Bax、Bel-2）的表达，结果如图2所示。

②分析讨论：

a．图1表明　　　　　　　　 　　　　　 。

b．图1、图2表明：从基因水平上看，蜂毒素诱导胃癌细胞凋亡与______有关。当 Bel-2蛋白/Bax蛋白的比值出现______趋势时，将会诱导胃癌细胞凋亡。

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胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，发病率及死亡率都较高。Akt是一种蛋白激酶，在肿瘤的发生发展中起着重要作用。科研人员研究了Akt抑制剂对人胃癌细胞细胞周期的影响。

（1）环境中的致癌因子使细胞中　　　　 发生突变，导致正常细胞变成癌细胞。由于癌细胞膜上的

　　　　　　　　　　　　 等物质减少，使癌细胞容易在体内转移。

（2）取人胃癌组织加入　　　　 将其分散成单个细胞，制成细胞悬液。接种于培养瓶中，加入Akt抑制剂进行培养，同时设置对照组。由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全明确，因此在制备的培养液中通常需加入　　　　 等天然成分。将培养瓶置于5%CO2培养箱中进行培养的原因是　　　　　　　　 。

（3）细胞周期包括分裂间期和分裂期（M期）。分裂间期又包括一个DNA复制期（S期）和复制期前后的两个间隙期（G1期和G2期）。Akt抑制剂对人胃癌细胞细胞周期影响的实验结果如图。图中a峰与c峰之间的b段细胞发生的主要变化是　　　　 。该结果说明Akt抑制剂可以将细胞阻滞于细胞周期中的　　　　 期，这为胃癌的临床治疗提供了理论依据。

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