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[生物——选修3：现代生物科技专题]下图表示利用羊生产抗凝血酶的过程，图中ampR表示氨苄青霉素抗性基因，tetR表示四环素抗性基因，BamH I、Hind Ⅲ、Sma I为三种限制酶及酶切位点，据图回答问题：

（1）通常采用_______技术来扩增获得抗凝血酶基因，其原理是_________，需要_______酶。据图分析，可将目的基因插入________抗性基因中。

（2）质粒的化学本质是______，除质粒外，还有______（至少写出两种）也可以充当载体。

（3）过程①可采用______的方法将重组质粒导入羊受精卵中，可采用_____技术来检测抗凝血酶基因是否转录成功。

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【选修3：现代生物科技专题】

人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示，请回答以下问题：

（1）①过程常采用的方法是_____________________________。

（2）构建基因表达载体时，需要将人乳铁蛋白基因嵌入到启动子和__________________ 之间，这样人乳铁蛋白基因就能在乳腺细胞中表达。

（3）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是___________。

（4）据图分析，筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含________________ （填“四环素”或“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_____________。

（5）若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为__________________________，对于该部位，这两种酶_____________________（“都不能”或“只有一种能”）切开。

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人乳铁蛋白是一种药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示，请回答以下问题：

（1）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是___________，酶能起催化作用的原理是____________________________________________。

（2）据图分析筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含______________________（填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_________________________________。

（3）若 BamH I酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为___________，对于该部位，这两种酶___________（填“都不能”或“只有一种能”）切开。

（4）培养出早期胚胎后，科学家欲进行胚胎分割移植，则应该选择发育良好、形态正常的___________，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割。

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人乳铁蛋白是一种药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示，请回答以下问题：

（1）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是_________，酶能起催化作用的原理是_________________________________。

（2）据图分析筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含___________________（填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_________________________________。

（3）若 BamH I酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为___________，对于该部位，这两种酶___________（填“都不能”或“只有一种能”）切开。

（4）培养出早期胚胎后，科学家欲进行胚胎分割移植，则应该选择发育良好、形态正常的___________，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割。

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人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示，请回答以下问题：

（1）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是___________，酶能起催化作用的原理是___________。

（2）据图分析，筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含___________（填“四环素”、“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄靑霉素”）的培养基上进行，原因是___________。

（3）若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为________，对于该部位，这两种酶__________（填“都不能”或“只有一种能”）切开。

（4）培养出早期胚胎后，科学家欲进行胚胎分割移植，则应该选择发育良好、形态正常的____________，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割。

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[生物——选修3:现代生物科技专题]质粒常作为基因工程的运载体，下图为某质粒及限制酶酶切图谱，Ampr为氨苄青霉素抗性基因。请回答下列问题：

(1)在基因工程中使用的载体除质粒外，还包括_________、______________。

(2)若将人生长激素基因插入到该质粒中，应该选用限制酶__________对质粒进行切割。不能用HindⅢ酶切割质粒的原因是______________。

(3)质粒中Ampr的化学本质是___________，其作用是___________________________。

(4)常用___________技术将重组质粒导入动物的受精卵中。

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加试题回答下列（一）、（二）小题：

（一）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。

据图回答：

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。

（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________（填字母代号）。

A．ampR　　　　　　 B．启动子　　　C．终止子　　　　　　 D．复制原点　

（3）过程①可采用的操作方法是_______(填字母代号)。

A．农杆菌转化　　　 B．显微注射　　　 C．大肠杆菌转化　　 D．细胞融合

（4）过程②采用的生物技术是______。

（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的_____性。

（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_____（填字母代号）技术。

A．核酸分子杂交　　 B．基因序列分析　 C．PCR　　　　　　 D．抗原—抗体杂交

（二）利用废弃的秸秆生产燃料乙醇，不仅缓解了资源危机、环境污染，同时更为可持续发展提供了保证。下面是利用玉米秸秆来生产乙醇的流程：

（1）从纤维素丰富的土壤中获取微生物1，进行一系列的操作后，用 _________ 将菌种涂布在相应的固体培养基中。

（2）下列有关涂布分离法的叙述错误的是_______

A．从土壤稀释液中取样时，不能只取悬液

B．接种时，涂布工具需先在酒精灯火焰上引燃

C．培养后菌落在整个平板表面分散均匀

D．涂布分离法比划线分离法更易获得单菌落

（3）为了提高生产效率，也可通过培养微生物1获得 ______________酶，并将该酶固定在某介质上制成固定化酶。　　

（4）微生物2通常是_______________，为了确保获得产物乙醇，接种微生物2时要注意避免_____________，发酵时要注意_____________。这样得到的乙醇浓度不会很高，最高是_________，所以要对生产出来的乙醇经过蒸馏、提纯等加工，才可以得到浓度大于90%的燃料乙醇。

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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，BAmHI、HinDIII、SmA I直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用__________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含____________的培养基上进行。能驱动人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控因子是图中的____________。过程①采用的操作方法通常是_____________。

（2）过程②代表的生物技术是_____________。对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。目前最常见的是经分割产生的同卵______胎。

（3）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用____________技术。

（4）对代孕牛的要求是_________________。

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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、Sma I直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用__________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含____________的培养基上进行。能驱动人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控因子是图中的____________。过程①采用的操作方法通常是_____________。

（2）过程②代表的生物技术是_____________。对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。目前最常见的是经分割产生的同卵______胎。

（3）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用____________技术。

（4）对代孕牛的要求是_________________。

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下图表示培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。请据图回答:

(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有_____________(答出两点即可)。图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用____和____限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是____。

(2)过程①可采用的操作方法是________。

(3)对早期胚胎进行切割,经过程②可获得多个新个体,这利用了细胞的______性。

(4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用________技术。

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