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【生物——选修3:现代生物科技专题】
噬菌体抗体库技术是指将人的全部抗体基因插入噬菌体的基因组中,然后让该噬菌体感染大肠杆菌，最终使抗体以融合蛋白的形式表达于噬菌体的表面，形成含有全套抗体谱的噬菌体抗体库。请问答下列问题：
（1）人体内的抗体是在________(细胞名称)中合成后，以胞吐的方式分泌到内环境中的。
（2）若要获取人的抗体基因，可以从细胞中提取相应的RNA，通过逆转录过程获 取______片段，再合成目的基因。采用PCR技术扩增目的基因的过程中,需要的物质除模板链、四种脱氧核苷酸外,还需要____________。
（3）构建重组DNA分子的目的是______________。在噬菌体抗体库的构建过程中，是否需要利用CaCl2处理大肠杆菌以制备感受态细胞？请写出原因:_______。
（4）检测大肠杆菌转录出的相应RNA时应采用_______技术，即从原核细胞中提取RNA,以________为探针,与RNA杂交。该技术的原理是___________。
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噬菌体抗体库技术是指将人的全部抗体基因插入到噬菌体的基因组中，然后让该噬菌体感染大肠杆菌，最终使抗体以融合蛋白的形式表达于噬菌体的表面，形成含有全套抗体谱的噬菌体抗体库，回答下列问题：
（1）获取人的全部抗体基因时，可以提取人淋巴细胞的全部RNA，然后通过_______过程获得含有抗体基因的DNA片段，对目的基因进行扩增的常用方法是PCR，该技术所依据的原理是____________________，PCR扩增某目的基因时需要引物___________种，若要将某目的基因扩增4代，则需要消耗每种引物 _____________ 个。
（2）在噬菌体抗体库的构建过程中，是否需要利用CaCl2处理大肠杆菌，制备感受态细胞________________ ，原因是___________________________________________ 。
（3）要检测噬菌体的表面是否含有某种抗体，可采用的技术是_____________，噬菌体表面的抗体尚不具备完整的功能，其原因是____________________________________。
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噬菌体抗体库技术是指将人的全部抗体基因插入到噬菌体的基因组中，然后让该噬菌体感染大肠杆菌,最终使抗体以融合蛋白的形式表达于噬菌体的表面，形成含有全套抗体谱的噬菌体抗体库。请回答下列问题：
(1)获取人的全套抗体基因时，可以提取人淋巴细胞的全部RNA，然后通过_______过程获得含有抗体基因的DNA片段。对目的基因进行扩增的常用方法是PCR技术，该技术所依据的原理是____。若要将某目的基因拷贝15次，则需要消耗引物______个。
(2)在噬菌体抗体库的构建过程中，是否需要利用CaCl2处理大肠杆菌，制备感受态细胞？______________，原因是______________。
(3)要检验噬菌体的表面是否含有某种抗体，可采用的技术是______________。菌体表面的抗体尚不具备完整的功能，其原因是______________。
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噬菌体抗体库技术是指将人的全部抗体基因插入噬菌体的基因组中，然后让该噬菌体感染大肠杆菌，最终使抗体以复合蛋白质的形式表达于噬菌体的表面，形成含有全套抗体谱的噬菌体抗体库，请回答下列问题：
（1）人体内的抗体在合成后，以____________的方式分泌到内环境中。
（2）若要获取人的抗体基因，可以从细胞中提取相应的RNA，通过逆转录过程获取_______片段，再合成目的基因，采用PCR技术扩增目的基因的过程中，需要的物质除模板链、四种脱氧核苷酸外，还需要______。
（3）构建重组DNA分子的目的是_________。在噬菌体抗体库的构建过程中，_________(需要/不需要）利用CaCl2处理大肠杆菌以制备感受态细胞，理由是_________________。
（4）检测大肠杆菌是否转录出相应RNA时应先从原核细胞中提取其RNA，再以__________为探针，与RNA杂交，该技术的原理是______________。
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用噬菌体抗体库技术获得人的单克隆抗体，方法是将人抗体基因插入噬菌体载体，然后让该噬菌体感染大肠杆菌，抗体可能和病毒蛋白以融合蛋白的形式，附着在噬菌体表面，也可能通过大肠杆菌分泌出去。回答下列问题：
（1）获取人抗体基因时，可从人的___________（填“B”或“T”或“体”）细胞中获取总RNA，逆转录成cDNA，再通过PCR技术扩增出抗体基因。在PCR反应体系中，加入dNTP（dCTP、dATP、dGTP和dTTP）的作用是______________________。
（2）在噬菌体抗体库的构建过程中，理论上可以不利用Ca2+处理大肠杆菌，依据是_________________。
（3）从噬菌体抗体库中筛选特异性抗体的方法是___________，原理是______________________。
（4）在抗体基因与噬菌体基因之间设计了一个终止密码子（UAG）的对应序列在终止密码子突变型的菌株表达时，抗体基因的表达产物是___________（填“融合蛋白”或“分泌型抗体”）。
（5）与利用杂交瘤技术生产的单克降抗体相比，用该技术省去了___________（步骤），使制备更简单易行。
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用噬菌体抗体库技术获得人的单克隆抗体，方法是将人抗体基因插入噬菌体载体，然后让该噬菌体感染大肠杆菌，抗体可能和病毒蛋白以融合蛋白的形式，附着在噬菌体表面，也可能通过大肠杆菌分泌出去。回答下列问题：
（1）获取人抗体基因时，可从人的___________（填“B”或“T”或“体”）细胞中获取总RNA，逆转录成cDNA，再通过PCR技术扩增出抗体基因。在PCR反应体系中，加入dNTP（dCTP、dATP、dGTP和dTTP）的作用是______________________。
（2）在噬菌体抗体库的构建过程中，理论上可以不利用Ca2+处理大肠杆菌，依据是_________________。
（3）从噬菌体抗体库中筛选特异性抗体的方法是___________，原理是______________________。
（4）在抗体基因与噬菌体基因之间设计了一个终止密码子（UAG）的对应序列在终止密码子突变型的菌株表达时，抗体基因的表达产物是___________（填“融合蛋白”或“分泌型抗体”）。
（5）与利用杂交瘤技术生产的单克降抗体相比，用该技术省去了___________（步骤），使制备更简单易行。
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科学家将体外扩増的人抗体基因片段插入噬菌体DNA,用该噬菌体侵染大肠杆菌，人抗体基因与噬菌体基因一起表达，形成融合蛋白，出现在子代噬菌体表面，再通过筛选可得到噬菌体抗体，该抗体可用于肿瘤的诊断与治疗。回答下列问题：
（1）获得人抗体基因的途径之一是从____________细胞中提取mRNA，通过____________获取cDNA。
（2）cDNA可通过____技术扩增，在反应体系中除了加入模板DNA、酶和引物外，还应加入____________作为合成DNA的原料。这一过程____________（填“需要”或“不需要”）加入解旋酶。
（3）在制备噬菌体抗体的过程中，应选用具有多个____________切割位点的噬菌体为材料，便于抗体基因片段的插入。所用大肠杆菌不需要用Ca2+处理的原因是________________________。
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科学家Burton等将人的抗体编码基因体外克隆后，插入噬菌体中并转染大肠杆菌得到工程菌。目的基因在工程菌中进行表达，获得了具有高度免疫活性的人抗体，该项技术被称为噬菌体抗体库技术。回答下列相关问题：
（1）提取人的抗体编码基因时，若限制酶切出的DNA片段是平末端，则需要用____酶进行连接。若要在短时间内获得较多的抗体编码基因，可以利用PCR技术扩增DNA，扩增目的基因时需要加入两种引物，其原因是____。
（2）运用逆转录法获得的抗体编码基因，只是该基因的____序列，需要插入载体的____之间才能进行转录。
（3）大肠杆菌常常被用作基因工程的受体菌，其主要优点是____（答出两点即可）。
（4）将重组DNA分子导入受体细胞时，一般不需要用CaCl2处理大肠杆菌以制备感受态细胞，其原因是____。
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为临床检测肿瘤坏死因子（TNF-α )，利用“噬菌体展示技术”获得TNF-α抗体，需要获得TNF-α抗体的基因片段，插入到噬菌体基因组中，经过筛选得到能正确表达TNF-α抗体的噬菌体，进行大量扩增。下列相关叙述不正确的是 （ ）
A. 将TNF-α抗体的基因片段与噬菌体DNA重组需用限制酶和DNA连接酶
B. 在细菌体内，噬菌体以自身氨基酸为原料合成TNF-α抗体
C. TNF-α抗体随子代噬菌体的重新组装而展示在噬菌体表面
D. 噬菌体通过侵染细菌繁殖，增殖速度快，更容易快速获得抗体
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噬菌体展示技术是将外源蛋白基因插入噬菌体外壳蛋白结构基因，使外源蛋白基因随外壳蛋白结构基因的表达而表达，同时，外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术，过程如下图所示。请回答相关问题：
（1）将外源蛋白基因进行PCR扩增时，第一次加热的作用是___________，加热的作用类似于细胞内___________（填物质名称）的功能。
（2）过程①表示___________，其实质为______________________________。
（3）若用32P标记重组噬菌体的DNA，用上述过程证明DNA是遗传物质，该设计是否严谨？___________，原因是______________________________。
（4）科学工作者将人体某种抗体基因插入噬菌体外壳蛋白结构基因进行上述展示，结果没有得到抗体或得到的抗体不具有活性，原因可能是______________________________。
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