（2015秋•广东月考）在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以发荧光．荧光素酶及其合成基因在生物研究巾有着广泛的应用．请回答下列问题：
（1）荧光素酶基因可以人工合成，也可以从 中获取．利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用 的原理．
（2）限制酶是切割DNA的工具酶，主要从 中分离纯化出来．下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点．若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是
（3）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，其作用是将 筛选出来．荧光素酶基因也可以作为目的基因转入某些动植物细胞中表达产生荧光素酶．将目的基因导入动物细胞的技术中，应用最多的是 ．
（4）将目的基因导入植物细胞，目前常用的目的基因载体是Ti质粒，目的基因需插入到该基因载体的 上．将导人荧光素酶基因的植物细胞，可经过 技术获得转基因植株．
高三生物综合题中等难度题
（2015秋•广东月考）在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以发荧光．荧光素酶及其合成基因在生物研究巾有着广泛的应用．请回答下列问题：
（1）荧光素酶基因可以人工合成，也可以从 中获取．利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用 的原理．
（2）限制酶是切割DNA的工具酶，主要从 中分离纯化出来．下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点．若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是
（3）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，其作用是将 筛选出来．荧光素酶基因也可以作为目的基因转入某些动植物细胞中表达产生荧光素酶．将目的基因导入动物细胞的技术中，应用最多的是 ．
（4）将目的基因导入植物细胞，目前常用的目的基因载体是Ti质粒，目的基因需插入到该基因载体的 上．将导人荧光素酶基因的植物细胞，可经过 技术获得转基因植株．
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在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以发荧光。荧光素酶及其合成基因在生物研究巾有着广泛的应用。请回答下列问题：
（1）荧光素酶基因可以人工合成，也可以从 中获取。利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用___ _的原理。
（2）限制酶是切割DNA的工具酶，主要从 中分离纯化出来。下表为4种限制酶的识别序列和酶切
位点，下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是
（3）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，其作用是将 筛选出来。荧光素酶基因也可以作为目的基因转入某些动植物细胞中表达产生荧光素酶。将目的基因导入动物细胞的技术中，应用最多的是____。
（4）将目的基因导入植物细胞，目前常用的目的基因载体是Ti质粒，目的基因需插入到该基因载体的 上。将导人荧光素酶基因的植物细胞，可经过 技术获得转基因植株。
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在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以发荧光。荧光素酶及其合成基因在生物研究巾有着广泛的应用。请回答下列问题：
（1）荧光素酶基因可以人工合成，也可以从 中获取。利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用＿＿＿的原理。
（2）限制酶是切割DNA的工具酶，主要从＿＿＿＿中分离纯化出来。下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是＿＿＿＿＿ 。
（3）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，其作用是将 筛选出来。荧光素酶基因也可以作为目的基因转入某些动植物细胞中表达产生荧光素酶。将目的基因导入动物细胞的技术中，应用最多的是＿＿＿＿＿＿。
（4）将导入荧光素酶基因的植物细胞经过 技术获得转基因植株。
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在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以放出荧光。荧光素酶及其合成基因在生物研究中有着广泛的应用。请回答下列问题：
（1）荧光素酶基因可以从基因文库中获取，也可以通过________方法得到，再利用 PCR 技术扩增即可，扩增荧光素酶基因利用的原理是__________________。
（2）在基因工程操作过程中，需要用________酶和________酶构建基因表达载体，基因表达载体要有________，以便筛选出含有目的基因的受体细胞。
（3）荧光素酶基因也可以作为目的基因转入某些动植物细胞中表达产生荧光素酶。将目的基因导入植物细胞，目前常用的目的基因载体是农杆菌的 Ti 质粒，目的基因需插入到该基因载体的________上，然后再转移至受体细胞中。将目的基因导入动物细胞的技术中，应用最多的是_______。
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（15分）自然界中能够产生生物荧光的酶的统称为荧光素酶。荧光素酶及其合成基因在生物研究中有着广泛的利用。
（1）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，其作用是将 筛选出来。
（2）下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，右下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是 。
| 限制酶 | Msp I | BamH I | Mbo I | Sma I |
| 酶切位点 |
|
|
|
|
（3）利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用 的原理，使荧光素酶基因数量呈 方式增加。
（4）迄今为止，可将上述具有荧光素酶基因的运载体导入动物细胞的技术，应用最多的、最有效的是 。经一系列步骤，将所获得的胚胎早期培养一段时间后，再移植到雌性动物的 或子宫内，使其发育成为具有新性状的动物。
（5）囊胚阶段的胚胎进行胚胎分割，可以提高胚胎的利用率，但在进行分割时应注意 。
（6）荧光素酶在ATP的参与下，可使荧光素发出荧光。生物学研究中常利用“荧光素－荧光素酶发光法”来测定样品中ATP的含量。某研究小组对“测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”进行了探究。
【实验材料】1×10－8mol/LATP标准液、缓冲溶液、70mg/L荧光素溶液（过量）、浓度分别为10、20、30、40、50、60、70mg/L的荧光素酶溶液。
【实验结果】见下图。
【实验分析与结论】
①实验过程：为使结果更加科学准确，应增设一组 作为对照。除题目已涉及的之外，还需要严格控制的无关变量有 （至少写出一个）。
②实验结果：由图C可知， 点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度。
（7）食品卫生检验中，可利用上述方法测定样品中细菌的ATP总含量，进而测算出细菌的数量，判断食品污染程度。测算的前提是每个细菌细胞中ATP的含量 。
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自然界中能够产生生物荧光的酶的统称为荧光素酶。荧光素酶及其合成基因在生物研究中有着广泛的利用。
（1） 荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，其作用是将______________筛选出来。
（2）下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是_______________。
（3）利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用___________的原理，使荧光素酶基因数量呈___________方式增加。
（4）迄今为止，可将上述具有荧光素酶基因的运载体导入动物细胞的技术，应用最多的、最有效的是___________。经一系列步骤，将所获得的胚胎早期培养一段时间后，再移植到雌性动物的_________或子宫内，使其发育成为具有新性状的动物。
（5）囊胚阶段的胚胎进行胚胎分割，可以提高胚胎的利用率，但在进行分割时应注意___________。
（6）荧光素酶在ATP的参与下，可使荧光素发出荧光。生物学研究中常利用“荧光素-荧光素酶发光法”来测定样品中ATP的含量。某研究小组对“测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”进行了探究。
（实验材料）1×10-8mol/L的ATP标准液、缓冲溶液、70mg/L荧光素溶液（过量）、浓度分别为10、20、30、40、50、60、70mg/L的荧光素酶溶液。
（实验结果）见下图。
（实验分析与结论）
①实验过程：为使结果更加科学准确，应增设一组___________作为对照。除题目己涉及的之外，还需要严格控制的无关变量有___________（至少写出一个）。
②实验结果：由图可知，_______点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度。
（7）食品卫生检验中，可利用上述方法测定样品中细菌的ATP总含量，进而测算出细菌的数量，判断食品污染程度。测算的前提是每个细菌细胞中ATP的含量_________________。
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（15分）自然界中能够产生生物荧光的酶的统称为荧光素酶。荧光素酶及其合成基因在生物研究中有着广泛的利用。
（1）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，其作用是将__________________筛选出来。
（2）下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，右下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是____________。
（3）利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用________________的原理，使荧光素酶基因数量呈______________方式增加。
（4）迄今为止，可将上述具有荧光素酶基因的运载体导入动物细胞的技术，应用最多的、最有效的是________________。经一系列步骤，将所获得的胚胎早期培养一段时间后，再移植到雌性动物的____________或子宫内，使其发育成为具有新性状的动物。
（5）囊胚阶段的胚胎进行胚胎分割，可以提高胚胎的利用率，但在进行分割时应注意____________________________。
（6）荧光素酶在ATP的参与下，可使荧光素发出荧光。生物学研究中常利用“荧光素一荧光素酶发光法”来测定样品中ATP的含量。某研究小组对“测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”进行了探究。
[实验材料]1×10－8mol／L ATP标准液、缓冲溶液、70 mg／L荧光素溶液（过量）、浓度分别为10、20、30、40、50、60、70 mg／L的荧光素酶溶液。
[实验结果]见下图。
[实验分析与结论]
①实验过程：为使结果更加科学准确，应增设一组___________________________作为对照。除题目已涉及的之外，还需要严格控制的无关变量有__________（至少写出一个）。
②实验结果：由图C可知，____________点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度。
（7）食品卫生检验中，可利用上述方法测定样品中细菌的ATP总含量，进而测算出细菌的数量，判断食品污染程度。测算的前提是每个细菌细胞中ATP的含量____________。
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(7分)美籍华人钱永健等科学家因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP会发出绿色荧光，该蛋白质在生物工程中有着广阔的应用前景。据图回答相关问题。
1.绿色荧光蛋白基因在该实验中是作为________基因。
2.上述过程中涉及到的细胞水平现代生物技术主要有________。（2分）
3.在②过程进行转基因体细胞的筛选时，比较简易的筛选方法是________。
4.在④过程培养重组细胞时，需要适宜的温度和pH外，还需要________。
5.图中从③到④的过程中一般利用去核后的卵细胞作为受体，而不用去核的体细胞，主要原因是。（2分）
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以下实验技术和应用对应不正确的
| A | 差速离心法 | DNA分子复制方式的探究 |
| B | 荧光标记技术 | 生物膜的结构特点研究 |
| C | 同位素示踪技术 | 分泌蛋白合成和运输过程研究 |
| D | 电子显微镜 | 细胞膜三层结构观察 |
A. A B. B C. C D. D
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钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方面的杰出成就而获2008年诺贝尔奖。在某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。下列说法正确的是：
A.该蛋白能发出绿色荧光所以运载绿色荧光蛋白基因的运载体不需要标记基因。
B.水母是无脊椎动物，它的荧光蛋白基因的编码区是连续的、不间断的。
C.组成绿色荧光蛋白基因的核苷酸有5种。
D.在获取水母绿色荧光蛋白基因时一般用人工合成法。
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