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【生物—选修3 现代生物科技专题】我国一科研团队将小麦液泡膜Na＋/K＋逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：
（1）为保证目的基因在水稻细胞中能够表达，运载体上应含有特定的_______。
A. 复制原点 B. 启动子 C. 标记基因
（2）水稻的转化过程为：将水稻幼胚接种到诱导培养基上，经过______过程，培养出愈伤组织，然后用_______法，将目的基因和相关功能片段整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，最后诱导愈伤组织形成水稻植株。
（3）为验证外源基因整合到水稻基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取所有mRNA并反转录成________，再以反转录产物为模板，利用TaNHX2基因特异引物，通过______方法进行基因扩增。若以根细胞为材料扩增结果为阳性（有产物生成），以叶细胞为材料扩增结果为阴性（无产物生成），则说明______。
（4）将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的 NaCl溶液中培养，进行耐盐试验，用非转基因幼苗作为对照。培养30天后观察现象，若_______则说明转基因植株获得了耐盐特性。
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我国一科研团队将小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：
（1）获取目的基因的方法很多。若TaNHX2基因序列未知，怎样从已构建好的基因文库（大肠杆菌作为受体细菌）中获取含TaNHX2基因的菌株？______________________________。若已知TaNHX2基因序列，可以用PCR扩增该基因。首先根据序列设计、合成__________并投入PCR反应体系，同时，还需要放入dNTP、目的基因、Taq酶等。还可以人工合成TaNHX2基因，如图1表示人工合成了两条若干个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种__________酶。
（2）图2是3种限制酶的识别与酶切位点示意图，构建基因表达载体的时候，经BamHⅠ酶切割得到的目的基因可以与图3所示质粒被__________酶切后的产物连接，理由是____________________。连接后的重组质粒__________（填“能”、“不能”或“不一定能”）被BamHⅠ切割。
（3）基因表达载体通过农杆菌转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其__________，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
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我国一科研团队将小麦液泡膜Na＋/K＋逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：
（1）获取目的基因的方法很多。若已知TaNHX2基因序列，可以用________扩增该基因。首先根据序列设计、合成________并投入反应体系，同时，还需要放入dNTP、目的基因、Taq酶等。还可以人工合成TaNHX2基因，如图1表示人工合成的两条若干个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种________酶。
（2）图2是3种限制酶的识别与酶切位点示意图，构建基因表达载体的时候，经BamH Ⅰ酶切割得到的目的基因可以与图3所示质粒被________酶切后的产物连接，理由是____________________________。连接后的重组质粒________（填“能”“不能”或“不一定能”）被BamH Ⅰ切割。
（3）基因表达载体通过农杆菌转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其____________________，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
（4）小麦与水稻差异很大，但却通过基因重组后，水稻能够合成小麦的蛋白质，这是因为_______________________________________________________。
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我国一科研团队将小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：
（1） TaNHX2基因通过控制____________直接控制生物的耐盐性状。
（2）为检测目的基因在水稻细胞中是否成功导入，运载体上应含有特定的______________。
A.复制原点 B.启动子 C.标记基因
（3）将导入目的基因的水稻幼胚接种到诱导培养基上进行___________，培养出愈伤组织，然后愈伤组织形成水稻植株。
（4）为验证外源基因整合到水稻基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取__________（填“总mRNA”或“TaNHX2基因mRNA”）并反转录成cDNA，再以反转录产物为模板，利用放射性标记的TaNHX2基因单链作为引物，通过___________技术进行基因扩增。若以根细胞为材料扩增结果为阳性（有产物生成），以叶细胞为材料矿增结果为阴性（无产物生成），则说明_____________________________________。
（5）将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中培养，进行耐盐实验，用________________作为对照。
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我国一科研团队将小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：
（1）若目的基因在水稻细胞中能够表达，理论上构建的基因表达载体应包含下列_____________等结构（多选）。
A. 启动子 B. 终止密码子 C. 标记基因 D. 目的基因
（2）水稻的转化过程为：将水稻幼胚接种到诱导培养基上，经过_____________过程，培养出愈伤组织，然后用_____________法，将目的基因和相关功能片段整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，最后诱导愈伤组织形成水稻植株。
（3）为验证外源基因整合到水稻基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取_____________并反转录成cDNA，再以反转录产物为模板，利用TaNHX2基因特异引物，通过PCR方法进行基因扩增。
①若小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因含m个碱基对，则其表达产物的氨基酸数目至多为________个。
②利用PCR技术每循环一次，目的基因的量可以增加________倍。
（4）将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中培养，进行耐盐试验，用非转基因幼苗作为对照。培养30天后观察现象，若_________________________则说明转基因植株获得了耐盐特性。
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我国一科研团队将小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：
（1）为保证目的基因在水稻细胞中能够表达，运载体上应含有特定的__________（复制原点、启动子、标记基因）
（2）水稻的转化过程为：将水稻幼胚接种到诱导培养基上，经过_______过程，培养出愈伤组织，然后用________________法，将目的基因和相关功能片段整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，最后诱导愈伤组织形成水稻植株。
（3）为验证外源基因整合到水稻基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取所有mRNA并反转录成_________，再以反转录产物为模板，利用TaNHX2基因特异引物，通过____________方法进行基因扩增。若以根细胞为材料扩增结果为阳性（有产物生成），以叶细胞为材料扩增结果为阴性（无产物生成），则说明___________________________________
（4）将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的 NaCl溶液中培养，进行耐盐试验，用非转基因幼苗作为对照。培养30天后观察现象，若__________________________________则说明转基因植株获得了耐盐特性。
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[生物—选修3：现代生物科技专题]我国一科研团队将荒漠植物TaNHX2基因转移到普那菊莴苣细胞内，获得了转基因耐盐普那菊莴苣新品种。回答下列有关问题：
（1）为保证目的基因在普那菊莴苣细胞中能够表达，运载体上应含有特定的_________（复制原点、启动子、标记基因）
（2）将普那菊莴苣幼胚接种到诱导培养基上，经过_________过程，培养出愈伤组织，然后用___法，将目的基因和相关功能片段整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上。
（3）为验证外源基因整合到普那菊莴苣基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取所有mRNA并反转录成_____________，再以反转录产物为模板，利用TaNHX2基因特异性引物，通过_______方法进行基因扩增。若以根细胞为材料扩增结果为阳性（有产物生成），以叶细胞为材料扩增结果为阴性（无产物生成），则说明____________________________。
（4）将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中培养，进行耐盐试验，用非转基因幼苗作为对照。培养30天后观察现象，若_____________________则说明转基因植株获得了耐盐特性。
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某种小麦具有极强的耐盐性，其耐盐性与小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因（耐盐基因）有关。科学家将该基因转移到水稻细胞中，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：
（1）理论上基因组文库含有生物的________基因；而cDNA文库含有生物________的基因。
（2）若要从该种小麦中获得Na+/K+逆向转运蛋白基因，可首先建立该种植物的基因组文库，再从中________出所需基因。
（3）将Na+/K+逆向转运蛋白基因导入水稻细胞中的常用方法是________。
（4）为保证Na+/K+逆向转运蛋白基因（耐盐基因）在水稻细胞中能够表达，运载体上应含有特定的________（填“复制原点”或“启动子”或“标记基因”）
（5）筛选出含有目的基因的水稻细胞，经过________过程，培养出愈伤组织，再诱导愈伤组织形成水稻幼苗。将转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中进行耐盐试验，用非转基因幼苗做对照，培养一个月后观察现象，若________则说明转基因植株获得了耐盐特性。
（6）假如用得到的二倍体转基因耐盐植株自交，子代中耐盐与不耐盐植株的数量比为3∶1时，则可推测该耐盐基因整合到了________（填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”）。
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径柳匙叶草种泌盐植物，科研工作者将径柳匙叶草液泡膜 Na+/K+逆向转运蛋白基因(TaNHX2 基因)转移到棉花细胞内，获得了转基因耐盐棉花新品种，图 1 是获取的含有目的基因的 DNA 片段，Sau3A I、 EcoR I、BamH I 为三种限制酶，图中箭头所指为三种酶的切点；图 2 是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图 3 是土壤农杆菌中用于携带目的基因的 Ti 质粒结构示意图，请分析回答问题：
（1）若图 1 所示 DNA 片段是利用径柳匙叶草的 DNA 直接获得的，则该获取目的基因的方法为___________
（2）不能在径柳匙叶草根尖分生区细胞中获得 TaNHX2 基因的 mRNA，其原因是______________
（3）若用 BamH I 切割图 1 所示的 DNA 片段，获得目的基因，则需选用____切割图 3所示质粒，以便构建基因表达载体，该方案的缺陷是________。故切割图 1 所示 DNA 片段的最佳方案是选用____酶。
（4）用上述最佳方案构建基因表达载体，所得重组质粒________ (选填“能” “ 不能”或“不一能”) 被BamH I切割。
（5）图 3 中，质粒上的抗生素抗性基因的作用是 ___________________
（6）为了检测技术成果，科研工作者将转基因棉花种植在盐碱地、观察其生长状况，这属于_______水平的检测
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径柳匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将径柳匙叶草液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到棉花细胞内，获得了转基因耐盐棉花新品种。图1是获取的含有目的基因的DNA片段，Sau3AI、EcoRI、BamHI为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点；图2是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图3是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图，请分析回答问题：
（1）将含有径柳匙叶草不同基因的DNA片段导入受体菌的群体中储存，再根据TaNHX2基因的特定核苷酸序列从中提取图1的片段，此法为从__________获取目的基因。
（2）不能在径柳匙叶草根尖分生区细胞中获得TaNHX2基因的mRNA，其原因是______________________________。
（3）若用BamHI切割图1所示的DNA片段，获得目的基因，则需选用_______切割图3所示质粒，以便构建基因表达载体，该方案的缺陷是_________。故切割图1所示DNA片段的最佳方案是选用____________酶。
（4）用上述最佳方案构建基因表达载体，所得重组质粒____________（选填“能”“不能”或“不一定能”）被BamHI切割。
（5）图3中，质粒上的抗生素抗性基因的作用是_________________________________。
（6）为了检测技术成果，科研工作者将转基因棉花种植在盐碱地，观察其生长状况，这属于___________________________水平的检测。
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