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图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（1）若图2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，科学家要将该基因通过___________（方法）注入羊的_______________中，发育完全的母羊有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。
（2）图2中的目的基因D需要同时使用MestI和PstI才能获得，而图1所示的质粒无限制酶MestI的酶切位点。所以在用该质粒和目的基因构建重组质粒时，需要对质粒进行改造，构建新的限制酶切位点。试帮助完成构建需要的限制酶切位点的过程（提供构建需要的所有条件）：首先用______酶处理质粒；然后用______处理质粒，使被切开的质量末端链接上相应的脱氧核苷酸；再用______ 处理质粒形成限制酶切位点，它可被______识别。（供选答案如下：①EcoRI ②MestI ③PstI ④DNA连接酶 ⑤DNA聚合酶）
（3）假设图1质粒上还有一个PstI的识别序列，现用EcoRI、PstI单独或联合切割同一质粒，得到的DNA长度片段如下表。请在下图中画出质粒上EcoRI和PstI的切割位点。（标出酶切位点之间的长度）
______
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图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（1）若图2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，科学家要将该基因通过___________（方法）注入羊的_______________中，发育完全的母羊有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。
（2）图2中的目的基因D需要同时使用MestI和PstI才能获得，而图1所示的质粒无限制酶MestI的酶切位点。所以在用该质粒和目的基因构建重组质粒时，需要对质粒进行改造，构建新的限制酶切位点。试帮助完成构建需要的限制酶切位点的过程（提供构建需要的所有条件）：首先用______酶处理质粒；然后用______处理质粒，使被切开的质量末端链接上相应的脱氧核苷酸；再用______ 处理质粒形成限制酶切位点，它可被______识别。（供选答案如下：①EcoRI ②MestI ③PstI ④DNA连接酶 ⑤DNA聚合酶）
（3）假设图1质粒上还有一个PstI的识别序列，现用EcoRI、PstI单独或联合切割同一质粒，得到的DNA长度片段如下表。请在下图中画出质粒上EcoRI和PstI的切割位点。（标出酶切位点之间的长度）
______
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。
1、若图2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，研究者需将该基因通过 （方法）注入到羊的 中，则发育成的羊有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。这一过程涉及到以下哪些过程 。
A．DNA自我复制 B．DNA以其一条链为模板合成RNA
C．RNA自我复制 D．按照RNA上密码子的排列顺序合成蛋白质
2、限制酶SmaⅠ和XmaⅠ作用的不同点是 。
3、图2中的目的基因D需要同时使用MetⅠ和PstⅠ才能获得，而图1所示的质粒无相应的限制酶酶切位点。所以在该质粒和目的基因构建重组质粒时，需要对质粒改造，构建新的限制酶酶切位点。试帮助完成构建需要的限制酶酶切位点的过程（提供构建需要的所有条件）：首先用 a 处理质粒；然后用 b 处理质粒，使被切开的质粒末端连接上相应的脱氧核苷酸；再用 c 处理质粒，形成了的限制酶酶切割位点，它可被 d 识别。则a~d处依次是 。
①EcoRⅠ ②MetⅠ ③PstⅠ ④DNA连接酶 ⑤DNA聚合酶
A．③④⑤② B．③⑤④① C．①⑤④② D．②④⑤③
4、假设图1质粒上还有一个PstⅠ的识别序列，现用EcoRⅠ、PstⅠ单独或联合切割同一质粒，得到如下表的DNA长度片段。请在图20中画出质粒上EcoRⅠ和PstⅠ的切割位点。（标出酶切位点之间长度）
| 酶 | DNA片段长度（kb碱基对） |
| EcoRⅠ | 14kb |
| PstⅠ | 2．5kb、11．5kb |
| EcoRⅠ+ PstⅠ | 2．5kb、5．5kb/6．0kb |
5、检测筛选是一个重要步骤。下图表示在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种方法与培养方法，以检测基因表达载体是否导入大肠杆菌。培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有 。从筛选结果分析，含目的基因的是 （填编号）菌落中的细菌。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时，选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割，可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①〜⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________，因此，可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程，培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功？____________________________。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时，选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割，可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①〜⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________，因此，可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程，培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功？____________________________。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时，选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割，可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①?⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________，因此，可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程，培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功？____________________________。
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(10分)请回答下列有关基因工程的问题。
下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点。图是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。
（1）从转基因香蕉培育图中反映了质粒作为运载体的特点是__________________，基因工程中还可以用_______________作为运载体。
（2）图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是_______________
（3）下图是用______________(限制）酶进行切割得到的目的基因。可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化。
（4）人体细胞内含有抑制癌症发生的某基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。该基因含有800对碱基对(bp)，用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp,．用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，50bp,200bp．而患者体内获取的这段基因，用BamHⅠ切割得到的区段变为400bp，400bp ，用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，250bp．在正常人体内BamHⅠ和EcoRⅠ识别序列分别有________个和_____个，患者体内发生了_________。
（5）下列有关基因工程的叙述错误的是（ ）（多选）
A．质粒上的目的基因必须整合到受体细胞的DNA上才能不被分解
B．以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同
C．没有与目的基因重组的质粒也可以进入受体细胞
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(10分)请回答下列有关基因工程的问题。
下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点。图是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。
⑴从转基因香蕉培育图中反映了质粒作为运载体的特点是____ _______，基因工程中还可以用____________作为运载体。
⑵图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是_________________
⑶下图是用_________________(限制）酶进行切割得到的目的基因。可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化。
⑷人体细胞内含有抑制癌症发生的某基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。该基因含有800对碱基对(bp)，用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp,.用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，50bp,200bp.而患者体内获取的这段基因，用BamHⅠ切割得到的区段变为400bp，400bp ，用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，250bp.在正常人体内BamHⅠ和EcoRⅠ识别序列分别有________个和_____个，患者体内发生了_________。
⑸下列有关基因工程的叙述错误的是（ ）（多选）
A.质粒上的目的基因必须整合到受体细胞的DNA上才能不被分解
B.以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同
C.没有与目的基因重组的质粒也可以进入受体细胞
D.质粒上的抗生素抗性基因有利于质粒与外源基因连接
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(9分)回答下列有关生物工程的问题。
下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点；图2是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。
1．图1是用限制酶_________________进行切割得到的目的基因，可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后____。
2．从图2中反映质粒作为运载体的特点是___________________。基因工程中还可以用___________________作为运载体。
3．图2中构建重组质粒不能使用SmaI酶切割的原因是 ________________。
4．图2中④表示组织培养过程中的________，它对植物激素调节的要求是______________。
5．图2中的农杆菌是基因工程中的________________。判断该转基因工程是否成功的依据是_________。
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（三）生物技术及生命科学的应用。
下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点。
1. 若图2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，研究者需将该基因与质粒重组后，通过显微注射法（方法）注入到羊的中，则发育成的羊（转基因羊）有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。该转基因羊的培育涉及的过程有____（多选）。
A. DNA 自我复制
B. DNA 以其一条链为模板合成RNA
C. RNA 自我复制
D. 按照RNA 上密码子的排列顺序合成蛋白质
2. 转基因技术中通常用图1 中质粒作为载体，质粒的本质是_____。与转基因羊相比，克隆多利羊的诞生所运用的生物技术是____，该技术的理论基础是____。
3. 用图1中质粒和图2目的基因构建重组质粒，应选用____两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过____酶作用后获得重组质粒。
4. 若BamH I酶切的DNA 末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为______。
5. 蛋白酶具有广泛的应用前景，所以常产业化生产，如果蛋白酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的活性，则应选择图3中的____（A/B/C）固定化工艺。
