获得抗除草剂转基因玉米自交系A,技术路线如下图。为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的原则是
①Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点
②G基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点
③酶切后,G基因形成的两个黏性末端序列不相同
④酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
A. ①③ B. ①④
C. ②③ D. ②④
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获得抗除草剂转基因玉米自交系A,技术路线如下图。为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的原则是
①Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点
②G基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点
③酶切后,G基因形成的两个黏性末端序列不相同
④酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
A.①③ B.①④
C.②③ D.②④
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获得抗除草剂转基因玉米自交系A,技术路线如下图。为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的原则是
①Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点
②G基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点
③酶切后,G基因形成的两个黏性末端序列不相同
④酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
A. ①③ B. ①④
C. ②③ D. ②④
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下图为获得抗除草剂转基因玉米的技术路线,请回答:
(1)构建表达载体选择限制性核酸内切酶时,要求Ti质粒内每种限制性核酸内切酶只有一个切割位点,同时要求酶切后,G基因形成的两个粘性末端序列不相同,这个过程需用______种限制酶,目的是___________。除草剂抗性基因G和Ti质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是________________________
(2)农杆菌转化愈伤组织时,T-DNA携带_______________插入受体细胞的核DNA。若核DNA中仅插入一个G基因,自交后代含G基因的植株中,纯合子占________________。
(3)获得抗除草剂转基因玉米涉及到多次筛选,其中筛选含重组质粒的农杆菌应使用含_______________的选择培养基,使用含_______________的选择培养基筛选出转化的愈伤组织,再诱导愈伤组织再生出抗除草剂转基因玉米。
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在基因工程的操作中,为了防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的原则是
①质粒内,每种限制酶只有一个切割位点
②目的基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点
③酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列不相同
④酶切后,质粒形成的两个黏性末端序列相同
A. ①③ B. ①④ C. ②③ D. ②④
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玉米自交系(遗传稳定的育种材料)B具有高产、抗病等优良性质,但难以直接培育成转基因植株,为使其获得抗除草剂性状,需依次进行步骤I、II试验。
Ⅰ.获得抗除草剂转基因玉米自交系A,技术路线如下图。
(1)为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的原则是____(单选)。
①Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点
②G基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点
③酶切后,G基因形成的两个黏性末端序列不相同
④酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
A.①③ B.①④ C.②③ D.②④
(2)下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知,细胞脱分化时使用的激素是____________,自交系__________的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。
(3)农杆菌转化愈伤组织时,T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织,需使用含_____________________的选择培养基。
(4)转化过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达,其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织,出现蓝色的是_______________(多选)。
A.无农杆菌附着的未转化愈伤组织
B.无农杆菌附着的转化愈伤组织
C.农杆菌附着的未转化愈伤组织
D.农杆菌附着的转化愈伤组织
(5)组织培养获得的转基因植株(核DNA中仅插入一个G基因)进行自交,在子代含G基因的植株中,纯合子占_____________。继续筛选,最终选育出抗除草剂纯合自交系A。
(6)下表是鉴定含G基因植株的4种方法。请预测同一后代群体中,4种方法检出的含G基因植株的比例,从小到大依次是_____________________________________。
方法 检测对象 检测目标 检出的含G基因植株的比例 |
PCR扩增 基因组DNA G基因 x1 分子杂交 总mRNA G基因转录产物 x2 抗原-抗体杂交 总蛋白质 G基因编码的蛋白质 x3 喷洒除草剂 幼苗 抗除草剂幼苗 x4 |
II.通过回交使自交系B获得抗除草剂性状
(7)抗除草剂自交系A(GG)与自交系B杂交产生F1,然后进行多轮回交(下图)。自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代______________。
对Hn继续筛选,最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系。
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科学家采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,以通过乳腺生物反应器生产人—抗胰蛋白酶,其技术路线如图:
回答下列问题:
(1)基因表达载体应当包括______,构建基因表达载体常用的酶是______,常用载体有________。
(2)核移植的受体应选用______期卵母细胞,之后通过______(写出一种具体方法)激活受体细胞使其完成细胞分裂和发育进程。
(3)进行胚胎移植时,胚胎应发育到______阶段,移植的方法有______。为一次性获得多个体,可使用胚胎分割技术,在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意________。
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转基因抗虫棉是人们应用较早的基因工程推广项目,目前转基因技术有了新的改进,如图所示,请根据所学知识回答:
(1)构建相关的目的基因表达载体时,应该选择的限制酶是 ;如图,切割目的基因两侧序列和载体时用两种限制酶,相较使用同种限制酶而言,其优点是,在目的基因两侧和载体切口处可能形成不同的 ,不但可以防止切割下的基因和切开的载体分别发生 ,还可以避免前者在插入载体切口处时产生与表达载体转录方向 (填“相同”或“相反”)的连接。
(2)若目的基因最终整合到染色休上,则从棉株1、2、3中各随机取出一个叶肉细胞,其细胞核中含有的目的基因个数分别为 个。
(3)④过程通常采用 处理使染色体数恢复。取棉株2的两个体细胞融合也能得到符合生产要求的棉株3,其原理为 和 。
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下面是获得抗虫棉的技术流程示意图。有关叙述错误的是( )
A.基因表达载体构建过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶
B.图中愈伤组织分化产生的再生植株基因型一般都相同
C.卡那霉素抗性基因中含有相关限制性核酸内切酶的识别位点
D.转基因抗虫棉有性生殖的后代不能稳定保持抗虫性状
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下图是培育抗除草剂玉米的技术路线图,含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达,其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌,会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列相关叙述不正确的是( )
A. 过程①用两种限制酶就可防止酶切产物自身环化
B. 过程②用Na+处理可提高转化成功率
C. 过程③应在培养基中加入除草剂和物质K
D. 筛选得到的A是无农杆菌附着的转化愈伤组织
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下面是获得抗虫棉的技术流程示意图。有关叙述错误的是
A.基因表达载体构建过程中蒲要限制酶和DNA连接酶
B.图中愈伤组织分化产生的再生植株的基因型一般都相同
C.卡那霉素抗性基因中含有相关限制酶的识别和切割位点
D.转基因抗虫棉有性生殖产生的部分后代不能稳定保持抗虫性状
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