下图是培育抗除草剂玉米的技术路线图，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能...

下图是培育抗除草剂玉米的技术路线图，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列相关叙述不正确的是（ ）

A. 过程①用两种限制酶就可防止酶切产物自身环化

B. 过程②用Na+处理可提高转化成功率

C. 过程③应在培养基中加入除草剂和物质K

D. 筛选得到的A是无农杆菌附着的转化愈伤组织

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培育具有抗除草剂性状的植物A的实验流程如下图所示。报告基因可以使细胞在特定情况下表达产物，易于检测、且不影响实验材料产生新的性状，质粒上的报告基因的产物能催化无色物质B呈现蓝色。请回答下列问题：

（1）常用___________处理农杆菌，促进重组表达载体转化到农杆菌细胞内。在筛选过程1中，用含有____________的培养基筛选成功导入重组表达载体的农杆菌。

（2）通过农杆菌转化法，______________基因会随T-DNA转移到植物A的染色体DNA上。

（3）为选出细胞内含转化后的农杆菌的愈伤组织，在筛选过程2中，还需要用______________________处理愈伤组织，挑选___________的愈伤组织继续培养成植株。

（4）对转基因植物A进行个体生物学水平鉴定的方法是__________________________________。

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人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值，只能从人血浆中制备。图一是以基因工程技术获取重组HSA的两条途径，其中报告基因表达的产物能催化无色物质K呈现蓝色。图二为相关限制酶的识别序列和切割位点，以及HAS基因两侧的核苷酸序列。据图回答下列问题：

（1）依据图一和图二分析，在构建基因表达载体时下列叙述错误的是___________。

A．应该使用酶B和酶C获取HSA基因

B．应该使用酶A和酶B切割Ti质粒

C．成功建构的重组质粒含1个酶A的识别位点

D．成功建构的重组质粒用酶C处理将得到2个DNA片段

（2）PCR技术应用的原理是____________，在利用该技术获取目的基因的过程中，以从生物材料中提取的DNA作为模板，利用____________寻找HSA基因的位置并进行扩增。

（3）图一过程①中需将植物细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让___________整合到植物细胞染色体DNA上；除尽农杆菌后，还须转接到含____________的培养基上筛选出转化的植物细胞。

（4）图一③过程中将目的基因导入绵羊受体细胞，采用最多，也是最为有效的方法_________。

（5）为检测HSA基因的表达情况，可提取受体细胞的_________________，用抗血清白蛋白的抗体进行杂交实验。

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人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值，在临床上需求量很大，下图是通过基因工程技术获取 HSA 的两条途径，图中报告基因表达的产物能催化无色物质 K 呈现蓝色。据图回答下列问题：

（1）若要体外获得大量的 HSA 基因，可采用 PCR 技术。该技术的原料是__________， 扩增的前提是要根据____________设计引物，而后经过变性、复性和延伸循环对目的基因进行扩增。若该目的基因循环扩增 5 次，理论上需要消耗_________个引物。

（2）过程①需将植物细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让_________进入植物细胞；去除掉所有农杆菌后，过程②还须转接到含_____的培养基上筛选出转化的植物细胞。

（3）要想通过转基因绵羊分泌的乳汁来生产 HSA，需将 HSA 基因与____________等调控组件重组到一起，过程③再通过___________方法将其导入绵羊受体细胞。

（4）检测转基因绵羊的乳汁中出现 HSA 的方法是_________，若_________表明转基因绵羊体内出现了 HSA。

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许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ′基因（内含EcoRI的酶切位点），其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal 和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如图所示。请据图回答：

（1）限制酶EcoRⅠ的识别序列和酶切位点是-G↓AATTC-，SmaⅠ的识别序列和酶切位点是-CCC↓GGG-。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是_____________。

（2）转化过程中，大肠杆菌应先用_____________处理，使其成为　　　　　 细胞。

（3）菌落①②③中颜色为白色的是__________，原因是________________________________。

（4）菌落③中的目的基因是否表达，可采用的检测办法是_____________。

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许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ′基因（内含EcoRⅠ的酶切位点），其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal 和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如图所示。请据图回答：

（1）限制酶EcoRⅠ的识别序列和酶切位点是-G↓AATTC-，SmaⅠ的识别序列和酶切位点是-CCC↓GGG-。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是___________________。

（2）在构建基因表达载体的过程中，除了目的基因外，还必须有_____________、复制原点和标记基因等。

（3）菌落①②③中颜色为白色的是_____________，原因是___________________________________。

（4）菌落中的目的基因是否表达，可采用___________________技术进行检测。

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许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ′基因（内含EcoRⅠ的酶切位点），其编码的产物β—半乳糖苷酶在X—gal和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如下图所示。请据图回答：

（1）获取目的基因时，可以从____________中直接提取。

（2）限制酶EcoRⅠ的识别序列和酶切位点是-G↓AATTC-，SmaⅠ的识别序列和酶切位点是-CCC↓GGG-。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相成的末端，连接的末端序列是______。

（3）在构建基因表达载体的过程中，除了目的基因外，还必须有_________和_________、复制原点和标记基因等。

（4）转化过程中，大肠杆菌应先用____________处理，使其成为____________细胞。

（5）菌落①②③中颜色为白色的是____________（填序号），原因是_______________。

（6）菌落③中的目的基因是否表达，可采用的分子检测办法是____________。

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（题文）下图表示真核细胞内基因表达过程中的相关物质间的关系。下列叙述错误的是(　　 )

A. 物质a上含有决定氨基酸的密码子

B. 组成物质a、b、c、d的基本单位共有8种

C. 过程①的产物中有些具有生物催化作用

D. 过程②的场所是核糖体，该过程中有水生成

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获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如下图。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是

①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点

②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同

④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

A.①③ B.①④

C.②③ D.②④

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获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如下图。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是

①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点

②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同

④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

A. ①③　　 B. ①④

C. ②③　　 D. ②④

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