如图表示绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程。请回答下列问题:
(1)上述过程涉及的现代生物工程技术中属于分子水平的技术是_____________________。
(2)图中B过程常用__________________法将绿色荧光蛋白基因导入成纤维细胞中。
(3)C过程要获得单个的成纤维细胞进行培养,需用____________处理猪胚胎的部分组织;E过程中若要获得大量的卵母细胞需用___________处理成年母猪;在进行H过程之前,需要对代孕母猪进行_______处理。
(4)H过程前,若要进行胚胎分割,用分割针或分割刀片将胚胎切开,吸出其中的半个胚胎,注入预先准备好的____________中,或直接将__________移入受体。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的__________________。
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如图表示绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程。请回答下列问题:
(1)上述过程涉及的现代生物工程技术中属于分子水平的技术是_____________________。
(2)图中B过程常用__________________法将绿色荧光蛋白基因导入成纤维细胞中。
(3)C过程要获得单个的成纤维细胞进行培养,需用____________处理猪胚胎的部分组织;E过程中若要获得大量的卵母细胞需用___________处理成年母猪;在进行H过程之前,需要对代孕母猪进行_______处理。
(4)H过程前,若要进行胚胎分割,用分割针或分割刀片将胚胎切开,吸出其中的半个胚胎,注入预先准备好的____________中,或直接将__________移入受体。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的__________________。
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(7分)我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出,这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图回答:
(1)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是____________。重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外,还必须含有____、____、____等才能构成一个完整的基因表达载体。
(2)将所采集到的卵母细胞在体外培养到________期即可通过显微操作将其细胞核去除并形成重组细胞,然后再通过________技术培养成早期胚胎。
(3)早期胚胎的培养液成分较复杂,人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚,通常加入____等一些天然成分。
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我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出,这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图回答:
(1)一个完整的基因表达载体除了带有绿色荧光蛋白基因以外,还必须含有复制原点、启动子、终止子和________________。启动子是一段有特殊结构的DNA片段,它是___________酶识别和结合的部位;而起始密码子的化学本质则是________(DNA或RNA)。
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞后,要通过DNA分子杂交技术,来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的__________________上。
(3)从猪中取胎儿成纤维细胞,用__________________处理,然后进行分散培养。培养时,将培养瓶置于含一定量CO2的培养箱中进行培养,CO2的作用是_____________。
(4)过程④表示通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核,微型吸管除了将细胞核吸除外,往往还要将__________________一并吸出。
(5)本实验所用到的现代生物科学技术有____________________________(填序号)。
A.动物细胞培养 B.胚胎移植
C.胚胎细胞核移植 D.DNA重组技术
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科学家应用现代生物技术培育出了荧光转基因克隆兔,培育原理如下,据图回答有关问题:
(1)上述过程中运用的生物技术有__________(至少写出三个)。
(2)②过程的培养环境要求是__________,培养的空气中通常需含5%CO2,目的是________。培养基除了加入一些基本的营养成分以外,通常还需要加入__________等一些天然成分,此时还应该对所需细胞进行筛选,方法是__________________________________。
(3)胚胎移植前必须对代孕母兔和供体母兔用激素进行__________处理。如果想获得核基因型相同的多个胚胎,常采取的方法是__________,处理的时期是__________。
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GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠,下图表示大量培育绿色荧光小鼠流程图以及其的拓展图和应用。请据图回答问题。17分
(1)图中所涉及的现代生物技术有___ 、__ 、____ (填三项)。
(2)下列有关胚胎移植的叙述正确的有( )
A.冲卵指的是从子宫中冲出胚胎,而非冲出卵子
B.只有供、受体生理环境高度一致,移入受体的胚胎才能被接受,并继续发育
C.供体和受体要进行免疫检查,防止发生免疫排斥反应
D.不同动物其胚胎移植的时间不同,人的胚胎移植最好在四细胞阶段进行
(3)为了提高①的成功率,可以通过_______技术获得GFP基因的大量拷贝,该技术中使用_______DNA聚合酶。
(4)用于培育绿色荧光小鼠的基因表达载体的组成有复制原点、__ ___、__ ____、启动子和__ ____。过程②常用的方法是__ _____。过程④的早期胚胎最好选择 ___________期。
(5)图中③过程中,必须用_____________处理内细胞团,使之分散成单个细胞;培养基中通常要加入 ________________________ 等天然成分,除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中,还需要保证细胞生活所需的____________和___________ ;干细胞形成组织、器官必须要进行细胞__________和 ____________。
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下图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程,请据图回答下列问题。
(1)A过程需要用限制酶切割水母细胞的DNA,不同的限制酶切割后产生的DNA片段末端通常有两种形式:________和________.
(2)C过程需要利用动物细胞培养技术以获得大量的成纤维细胞,其培养过程可经过原代培养和传代培养,但是目前冷冻保存的正常细胞通常在10代以内,这是为了______________。
(3)过程F的技术名称是________。
(4)E过程可从屠宰场已屠宰母畜的卵巢采集________,并在体外培养到________期。
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(每空1分,共10分)我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出,这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图回答:
(1)一个完整的基因表达载体除了带有绿色荧光蛋白基因以外,还必须含有复制原点、启动子、终止子和________
__________。启动子是一段有特殊结构的DNA片段,它是___________酶识别和结合的部位;而起始密码子的化学本质则是________(DNA/RNA)。(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞后,要通过DNA分子杂交技术,来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的__________________上。
(3)从猪中取胎儿成纤维细胞,用__________________处理,然后进行分散培养。培养时,将培养瓶置于含________________________________的混合气体培养箱中进行培养。
(4)过程④表示通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核,微型吸管除了将细胞核吸除外,往往还要将__________________一并吸出。
(5)去核的卵母细胞与成纤维细胞通过电刺激后融合,形成重组细胞。利用物理或化学方法刺激重组细胞,使之完成细胞______________________________,在体外培养成重组早期胚胎。
(6)在进行过程⑦操作前,应用激素对受体母猪进行__________________处理。
(7)本实验所用到的现代生物科学技术有____________________________(填序号)。
A.动物细胞培养 B.胚胎移植
C.胚胎细胞核移植 D.DNA重组技术
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下图为吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转人赖氨酸基因的克隆 牛“织女”的大致过程,请据图回答问题。
(1)克隆牛“织女”的诞生过程中涉及到的细胞水平的现代生物技术主要有:_________ (至少答出两项)
(2)实施基因工程包括四个基本操作步骤,其核心步骤是_______,实现②过程的常用方法是_______
(3)现有-长度为1000碱基对(by)的DNA分子,用限酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000 by,说明此DNA分子为_______ (填“线性”或“环状”),用Kpn I单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子,用EcoR I、Kpn I同时酶切后得到 200by和600 by两种长度的DNA分子。请绘出该DNA分子的酶切图谱的示意图:_______ (请在图中标明限制酶的类型、酶切位点和碱基长度)。
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下图是某转基因抗虫水稻培育流程简图。下列有关分析错误的是
A.该过程涉及基因工程技术和植物克隆技术
B.毒蛋白基因在转基因抗虫水稻中的表达需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶
C.可用带荧光标记的毒蛋白抗体检测毒蛋白基因是否在水稻细胞中表达
D.转基因抗虫水稻的种植可能导致昆虫群体抗毒蛋白基因频率增加
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(8分)日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献,获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图.据图回答:
(1)绿色荧光蛋白基因在该实验中是作为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒,需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶I的识别序列和切点是—G’GATCC—,请画出质粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的过程:________________________ _________。
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是_______________ ___。
(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上,GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因,其作用是_______________________。
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白,黄色荧光蛋白等,采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是(用数字表示):_______ ________。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)④表达出蓝色荧光蛋白。
(5)在培养重组细胞时,培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和___等。
(6)以上培育过程中应用到的生物技术有_________________________________等(至少答出2项)。
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