下图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程，请据图回答下列问题。
(1)A过程需要用限制酶切割水母细胞的DNA，不同的限制酶切割后产生的DNA片段末端通常有两种形式：________和________．
(2)C过程需要利用动物细胞培养技术以获得大量的成纤维细胞，其培养过程可经过原代培养和传代培养，但是目前冷冻保存的正常细胞通常在10代以内，这是为了______________。
(3)过程F的技术名称是________。
(4)E过程可从屠宰场已屠宰母畜的卵巢采集________，并在体外培养到________期。
高二生物综合题简单题
下图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程，请据图回答下列问题。
(1)A过程需要用限制酶切割水母细胞的DNA，不同的限制酶切割后产生的DNA片段末端通常有两种形式：________和________．
(2)C过程需要利用动物细胞培养技术以获得大量的成纤维细胞，其培养过程可经过原代培养和传代培养，但是目前冷冻保存的正常细胞通常在10代以内，这是为了______________。
(3)过程F的技术名称是________。
(4)E过程可从屠宰场已屠宰母畜的卵巢采集________，并在体外培养到________期。
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下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
（1）图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
① 画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？ 理由是 。
（2）以上图示中基因工程的核心是 （用序号表示）,除了目的基因和标记基因外,其上还应包括_____________和_____________。
（3）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是 。目的基因能否在受体母猪体内稳定遗传的关键是 。这需要检测才能确定，检测采用的方法是_____________。
（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是： （用数字表示）。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）
④表达出蓝色荧光蛋白
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下图是某转基因抗虫水稻培育流程简图。下列有关分析错误的是
A．该过程涉及基因工程技术和植物克隆技术
B．毒蛋白基因在转基因抗虫水稻中的表达需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶
C．可用带荧光标记的毒蛋白抗体检测毒蛋白基因是否在水稻细胞中表达
D．转基因抗虫水稻的种植可能导致昆虫群体抗毒蛋白基因频率增加
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如图表示绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程。请回答下列问题：
（1）上述过程涉及的现代生物工程技术中属于分子水平的技术是_____________________。
（2）图中B过程常用__________________法将绿色荧光蛋白基因导入成纤维细胞中。
（3）C过程要获得单个的成纤维细胞进行培养，需用____________处理猪胚胎的部分组织；E过程中若要获得大量的卵母细胞需用___________处理成年母猪；在进行H过程之前，需要对代孕母猪进行_______处理。
（4）H过程前，若要进行胚胎分割，用分割针或分割刀片将胚胎切开，吸出其中的半个胚胎，注入预先准备好的____________中，或直接将__________移入受体。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的__________________。
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（11分）2006年12月，我国科学家成功培育出国内首例“荧光猪”。“荧光猪”即为绿色荧光蛋白转基因克隆猪，具有很高的基础研究价值，它的培育过程操作如下：
①从一种水母中提取绿色荧光蛋白基因，经处理后导入到体外培养的猪胎儿成纤维细胞的基因组中。
②从成纤维细胞中取出细胞核，移植到成熟的去核的猪卵母细胞中，构建重组细胞。
③体外培养重组细胞成转基因胚胎（由4~6个细胞组成的胚）。
④把转基因胚胎移植入受体母猪的子宫中。
⑤母猪怀孕114天，产下绿色荧光蛋白转基因克隆猪。
请回答下列问题：
（1）请按培育过程完成下面的“荧光猪”培育技术流程图。
（2）步骤①、④涉及的生物工程技术分别称为________和________技术。
（3）目前科学家还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体，用动物体细胞克隆的动物，实际是通过________技术来实现的。
（4）步骤③里，由1个重组细胞培育成4~6个细胞的胚，主要通过________来实现的。重组细胞最终能发育成动物个体的内在原因是________。
（5）如果希望大量培育“荧光猪”，可在第④阶段，先通过________技术获得多个胚胎后，再进行移植。
（6）首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪（母猪）与普通公猪交配怀孕后，成功产下了11头猪崽，但只有部分猪崽具有绿色荧光遗传特征。试用孟德尔遗传定律加以解释。
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科学家利用基因工程和细胞核移植技术培育了绿色荧光蛋白转基因克隆猪。基本流程是：从荧光水母中获取目的基因，与有关载体重组，将其导入猪胎儿的成纤维细胞，经培养后再将成纤维细胞核植入去核的卵母细胞中，最后培养出转基因克隆猪。
（1）成纤维细胞贴壁生长分裂到表面相互接触时，就会停止分裂，这种现象叫做细胞的___________________。若将成纤维细胞进行传代培养，操作时首先用______________________________处理成细胞悬液。
（2）作为核移植受体细胞的去核卵母细胞一般处在____________期。供体细胞注入去核的卵母细胞中，常通过__________（物理方法）激活重组细胞，使其完成细胞分裂和发育进程。
（3）培养重组细胞时，将细胞所需的营养物质按其种类．数量严格配制而成的培养基称为___________培养基，但通常在培养基中还需要加入适量的_________________________等天然成分。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是____________________。为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的____________。
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如图表示转基因抗冻番茄的培育过程，含抗冻基因的DNA片段和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。回答下列问题：
(1)图中构建重组质粒时，不能使用AluⅠ切割，原因是__________;为了避免目的基因和载体经酶切后产生的末端发生任意连接，应该选用____对含鱼抗冻蛋白质基因的DNA片段和质粒进行切割。
(2)M抗生素抗性基因在Ⅰ中又称为___基因。①过程所用的DNA连接酶作用的化学键是___。
(3)常采用农杆菌转化法将抗冻蛋白基因导入番茄细胞。将含有抗冻蛋白基因的重组质粒转入农杆菌时，常用Ca2+处理农杆菌，其目的是______。用农杆菌感染番茄叶肉细胞时，应优先选用番茄受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共同培养，选用受伤叶片的理由是__________。
(4)图中得到的胚状体经过人工薄膜包装可以制造出人工种子。与天然种子相比，人工种子具有的优点有______________(答出两点)。若从个体水平检测获得的转基因番茄植株有无抗严寒能力，可以采用的方法是____。
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下图是制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程。请回答下列问题：
(1)过程①中选用EcoRⅠ和XhoⅠ两种限制酶切割的优点是_____________________。
(2)过程②中首先需要处理大肠杆菌，使其处于感受态，VP40基因进人大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为____________________________________。
(3)与植物原生质体融合相比，过程④特有的方法是用_____________处理。通常在选择培养基中需加入抗生素，目的是____________________________。制备单克隆抗体时，先用特定的选择性培养基进行筛选，获得____________________________，该细胞的特点是__________________________________________。选择培养基上存活的杂交瘤细胞产生的抗体___________(填“是”或“不是”)单克隆抗体。然后对上述细胞进行抗体检测，选取____________________________的细胞克隆化培养。
(4)图示过程应用的生物技术有_____________________________。(至少答出两种)
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(7分)我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：
(1)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿等才能构成一个完整的基因表达载体。
(2)将所采集到的卵母细胞在体外培养到＿＿＿＿＿＿＿＿期即可通过显微操作将其细胞核去除并形成重组细胞，然后再通过＿＿＿＿＿＿＿＿技术培养成早期胚胎。
(3)早期胚胎的培养液成分较复杂，人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，通常加入＿＿＿＿等一些天然成分。
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我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：
（1）一个完整的基因表达载体除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有复制原点、启动子、终止子和________________。启动子是一段有特殊结构的DNA片段，它是___________酶识别和结合的部位；而起始密码子的化学本质则是________（DNA或RNA）。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞后，要通过DNA分子杂交技术，来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的__________________上。
（3）从猪中取胎儿成纤维细胞，用__________________处理，然后进行分散培养。培养时，将培养瓶置于含一定量CO2的培养箱中进行培养，CO2的作用是_____________。
（4）过程④表示通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核，微型吸管除了将细胞核吸除外，往往还要将__________________一并吸出。
（5）本实验所用到的现代生物科学技术有____________________________（填序号）。
A.动物细胞培养 B.胚胎移植
C.胚胎细胞核移植 D.DNA重组技术
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