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【生物选修3：现代生物科技专题】（15分）阅读如下材料，回答问题：
材料1：某研究小组对小鼠的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行培养。
材料2：基因敲除是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。
(1)材料1属于_______________工程范畴。制备肝细胞悬浮液时剪碎肝组织，再用______________处理，肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的C02中，其主要作用是_______________。为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_________________。
(2)材料2属于基因工程的范畴。将某基因插入到基因表达载体的目的基因中，使目的基因____________，通过________技术导入ES细胞中。观察基因敲除前后生物体性状的变化，可以研究目的基因（敲除基因）的__________；敲除抗原决定基因，还可获得适合人体移植的其他动物器官，减弱或消除___________。
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【生物：选修三现代生物科技专题】某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量__________。
（2）在动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是___________。
（3）在两种细胞生长过程中，当甲细胞铺满瓶壁时，会出现____________现象，若甲细胞传代培养10-50代左右，发现增殖逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的________可能会发生变化。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞相比，可以传代的次数更多的是_______细胞。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___________消化处理。
（4）理论上，甲细胞可与某种B淋巴细胞合成_____________细胞，从而来制备__________，使患者获得特异性免疫。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】
下面是以小组为对象进行的各项研究工作，请分析回答问题：
（1）在小鼠细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的__________。此时，瓶壁形成细胞层数是一层。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入培养瓶中可以____________________，从而增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。用有关的酶使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，重新配置细胞悬液后进行分瓶培养，这样的培养过程称为_________________。
（2）细胞培养过程中为创造____________环境，常在细胞培养液中添加一定的抗生素，防止培养过程中杂菌的污染，此外还要定期___________，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
若用培养的细胞进行DNA粗提取实验，所得的丝状物可用___________试剂检验，沸水浴后溶液颜色为蓝色。
（3）小鼠的受精卵经培养得到早期胚胎，可进行胚胎移植。因为受体子宫对外来胚胎基本__________，且外来胚胎可与受体子宫建立____________，使胚胎在受体子宫内存活并发育。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]
P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因，研究表明P53基因突变可导致肝脏细胞癌变。科学家研究发现P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用，请回答下列问题：
（1）切下新鲜的肝癌组织，在37℃下用____________处理30〜40min，用培养液制成细胞悬液在培养箱中培养，培养液是模拟人体___________的成分配制的，在培养基中加入一定量的抗生素的目的是__________。
（2）获取P53基因的方法通常包括____________和______________。
（3）将P53基因经过一系列的处理并与脂质体混合，将混合物滴加至肝癌细胞上，轻轻混匀，最后筛选出含有P53基因的肝癌细胞。脂质体在这个操作中的作用是________________________。
（4）为证明P53基因有抑癌作用，需将两种细胞接入多孔板中，并从次日开始检测每孔的细胞总数，绘制成下图所示的生长曲线。分析两条曲线可知，曲线1是_____________细胞，曲线2是____________细胞。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]
P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因，研究表明P53基因突变可导致肝脏细胞癌变。科学家研究发现P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用，请回答下列问题：
（1）切下新鲜的肝癌组织，在37℃下用____________处理30〜40min，用培养液制成细胞悬液在培养箱中培养，培养液是模拟人体___________的成分配制的，在培养基中加入一定量的抗生素的目的是__________。
（2）获取P53基因的方法通常包括____________和______________。
（3）将P53基因经过一系列的处理并与脂质体混合，将混合物滴加至肝癌细胞上，轻轻混匀，最后筛选出含有P53基因的肝癌细胞。脂质体在这个操作中的作用是________________________。
（4）为证明P53基因有抑癌作用，需将两种细胞接入多孔板中，并从次日开始检测每孔的细胞总数，绘制成下图所示的生长曲线。分析两条曲线可知，曲线1是_____________细胞，曲线2是____________细胞。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]
P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因，研究表明P53基因突变可导致肝脏细胞癌变。科学家研究发现P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用，请回答下列问题：
（1）切下新鲜的肝癌组织，在37℃下用____________处理30〜40min，用培养液制成细胞悬液在培养箱中培养，培养液是模拟人体___________的成分配制的，在培养基中加入一定量的抗生素的目的是__________。
（2）获取P53基因的方法通常包括____________和______________。
（3）将P53基因经过一系列的处理并与脂质体混合，将混合物滴加至肝癌细胞上，轻轻混匀，最后筛选出含有P53基因的肝癌细胞。脂质体在这个操作中的作用是________________________。
（4）为证明P53基因有抑癌作用，需将两种细胞接入多孔板中，并从次日开始检测每孔的细胞总数，绘制成下图所示的生长曲线。分析两条曲线可知，曲线1是_____________细胞，曲线2是____________细胞。
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【选修3——现代生物科技专题】
下图为某科研小组采用“基因靶向”技术先将小鼠的棕褐毛基因导入黑色纯种小鼠的胚胎干细胞（ES细胞）中，再将改造后的胚胎干细胞移植回囊胚继续发育成小鼠的过程。据图分析回答：
（1）天然质粒往往需要经过改造才能作为基因工程中的运载体，经改造后的质粒同时具备的条件有___________（填序号）。
①标记基因 ②多个限制酶切割位点 ③对受体细胞无害 ④启动子 ⑤起始密码子
（2）该过程使用了工具酶___________和DNA连接酶，完成目的基因的获取和___________。
（3）过程III常用的方法是___________，第III步操作后，还需经过筛选出含___________的重组DNA分子胚胎干细胞的过程，才能将该胚胎干细胞注射到囊胚中。
（4）改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能继续发育成小鼠，其根本原因是______________________。
（5）胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性，形成组织、器官必须要进行______________________。
（6）若经过图示过程培育成的小鼠仍为黑色，则能否说明未成功导入棕褐毛基因？_________。你的理由是____________________________________________________________。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】(1 5分)
下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，据图及所学知识回答下列问题：
(1)图中实验小鼠注射的甲是 ，从小鼠的 (免疫器官)中获得了相应的B淋巴细胞。
(2)诱导细胞融合使用的物理方法有 (至少答出两种)，不同于诱导植物原生质体融合的技术手段是利用 诱导细胞融合。
(3)用 对乙筛选，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞均不能生长，只有融合的 才能生长，这种细胞的特点是 。
(4)将获得的符合要求的细胞注射到小鼠腹腔内增殖，从小鼠 中可以提取单克隆抗体。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】 下图为制备多克隆抗体和单克隆抗体的示意图，回答下列问题：
（1）将抗原注射到小鼠体内时，小鼠体内发生了________免疫过程。图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，与植物体细胞杂交相比，其特有的融合方法是____________。
（2）图中两次筛选的目的不同，其中筛选②过程还需要进行____________和___________，目的是筛选出______________________________。
（3）将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养时，需将其置入含有_____________的混合气体的培养箱中进行培养。
（4）与多克隆抗体相比，单克隆抗体最主要的优点在于它的_______________，并能大量制备。从目前临床试验来看，单克隆抗体主要用于治疗癌症，例如可以将抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、药物等结合，制成“生物导弹”，借助单克隆抗体的________作用，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。
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【选修3—现代生物科技专题】
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。下图为科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗的技术流程图，据图回答有关问题：
（1）步骤①中，在核移植之前应该采集卵母细胞，采用的主要方法是用__________处理，使其排出更多的卵子，然后从__________中冲取。
（2）步骤②中，重组细胞培养到囊胚期，可从其__________中分离出ES细胞，该细胞在形态上表现为体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上具有发育的__________。
（3）步骤③中，将含有Rag2基因的表达载体导入ES细胞，常采用__________法。为检测Rag2基因
是否表达出相应的蛋白质，通常采用__________的方法。
（4）转基因和细胞核移植（克隆）等生物技术存在安全性和伦理问题，如科学家赋予转基因生物某些特殊性状，它们有可能成为“入侵的外来物种”，威胁生态系统中其他生物的生存，这属于转基因生物的__________(“食品安全”、“生物安全”或“环境安全”）问题；我国政府对待克隆人的态度是__________,不反对治疗性克隆。
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