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【生物——选修3：现代生物科技专题】
下面是以小组为对象进行的各项研究工作，请分析回答问题：
（1）在小鼠细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的__________。此时，瓶壁形成细胞层数是一层。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入培养瓶中可以____________________，从而增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。用有关的酶使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，重新配置细胞悬液后进行分瓶培养，这样的培养过程称为_________________。
（2）细胞培养过程中为创造____________环境，常在细胞培养液中添加一定的抗生素，防止培养过程中杂菌的污染，此外还要定期___________，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
若用培养的细胞进行DNA粗提取实验，所得的丝状物可用___________试剂检验，沸水浴后溶液颜色为蓝色。
（3）小鼠的受精卵经培养得到早期胚胎，可进行胚胎移植。因为受体子宫对外来胚胎基本__________，且外来胚胎可与受体子宫建立____________，使胚胎在受体子宫内存活并发育。
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【生物选修3：现代生物科技专题】（15分）阅读如下材料，回答问题：
材料1：某研究小组对小鼠的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行培养。
材料2：基因敲除是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。
(1)材料1属于_______________工程范畴。制备肝细胞悬浮液时剪碎肝组织，再用______________处理，肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的C02中，其主要作用是_______________。为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_________________。
(2)材料2属于基因工程的范畴。将某基因插入到基因表达载体的目的基因中，使目的基因____________，通过________技术导入ES细胞中。观察基因敲除前后生物体性状的变化，可以研究目的基因（敲除基因）的__________；敲除抗原决定基因，还可获得适合人体移植的其他动物器官，减弱或消除___________。
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【选修3——现代生物科技专题】
下图为某科研小组采用“基因靶向”技术先将小鼠的棕褐毛基因导入黑色纯种小鼠的胚胎干细胞（ES细胞）中，再将改造后的胚胎干细胞移植回囊胚继续发育成小鼠的过程。据图分析回答：
（1）天然质粒往往需要经过改造才能作为基因工程中的运载体，经改造后的质粒同时具备的条件有___________（填序号）。
①标记基因 ②多个限制酶切割位点 ③对受体细胞无害 ④启动子 ⑤起始密码子
（2）该过程使用了工具酶___________和DNA连接酶，完成目的基因的获取和___________。
（3）过程III常用的方法是___________，第III步操作后，还需经过筛选出含___________的重组DNA分子胚胎干细胞的过程，才能将该胚胎干细胞注射到囊胚中。
（4）改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能继续发育成小鼠，其根本原因是______________________。
（5）胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性，形成组织、器官必须要进行______________________。
（6）若经过图示过程培育成的小鼠仍为黑色，则能否说明未成功导入棕褐毛基因？_________。你的理由是____________________________________________________________。
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【生物：选修三现代生物科技专题】某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量__________。
（2）在动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是___________。
（3）在两种细胞生长过程中，当甲细胞铺满瓶壁时，会出现____________现象，若甲细胞传代培养10-50代左右，发现增殖逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的________可能会发生变化。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞相比，可以传代的次数更多的是_______细胞。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___________消化处理。
（4）理论上，甲细胞可与某种B淋巴细胞合成_____________细胞，从而来制备__________，使患者获得特异性免疫。
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生物•选修3:现代生物科技专题
某研究组开展了将白细胞介素-2基因转入某动物细胞，并对该动物细胞进行大规模培养，提取白细胞介素-2用于制药的研究。请回答下列问题：
（1）为使干扰素基因在某动物细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的________和________之间。将白细胞介素-2基因导入动物细胞中常用____________法，转基因成功的标志是细胞中有____________生成。
（2）获得转基因动物细胞后，将转基因动物细胞放入____________培养箱中培养，为了防止培养过程中杂菌污染，可向培养基中加入____________。培养时细胞会有贴壁生长和____________现象，若细胞数目过多会因细胞密度过大和代谢消耗引起营养枯竭而不能生长，此时需进行传代培养，传代培养时需用____________处理后再转移到新的培养液中。
（3）若白细胞介素-2不能分泌到细胞外，需对钿胞进 行____________处理，再提取获得白细胞介素-2。
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生物•选修3:现代生物科技专题
某研究组开展了将白细胞介素-2基因转入某动物细胞，并对该动物细胞进行大规模培养，提取白细胞介素-2用于制药的研究。请回答下列问题：
（1）为使干扰素基因在某动物细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的________和________之间。将白细胞介素-2基因导入动物细胞中常用____________法，转基因成功的标志是细胞中有____________生成。
（2）获得转基因动物细胞后，将转基因动物细胞放入____________培养箱中培养，为了防止培养过程中杂菌污染，可向培养基中加入____________。培养时细胞会有贴壁生长和____________现象，若细胞数目过多会因细胞密度过大和代谢消耗引起营养枯竭而不能生长，此时需进行传代培养，传代培养时需用____________处理后再转移到新的培养液中。
（3）若白细胞介素-2不能分泌到细胞外，需对钿胞进 行____________处理，再提取获得白细胞介素-2。
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（15分）下面是以小鼠为对象进行的各项研究工作，请分析回答问题。
（1）在小鼠细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面______时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的______。此时，瓶壁上形成细胞层数是______。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需耍用酶处理，可用的酶是______。
（2）如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是____。
（3）为使外源基因在后代中长期保持，可将转基因小鼠体细胞的______转入______细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体，该技术称为______。
（4）在细胞培养过程中，通常在______条件下保存细胞，因为在这种条件下，细胞中______的活性降低，细胞的代谢速率降低。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】(1 5分)
下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，据图及所学知识回答下列问题：
(1)图中实验小鼠注射的甲是 ，从小鼠的 (免疫器官)中获得了相应的B淋巴细胞。
(2)诱导细胞融合使用的物理方法有 (至少答出两种)，不同于诱导植物原生质体融合的技术手段是利用 诱导细胞融合。
(3)用 对乙筛选，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞均不能生长，只有融合的 才能生长，这种细胞的特点是 。
(4)将获得的符合要求的细胞注射到小鼠腹腔内增殖，从小鼠 中可以提取单克隆抗体。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】 下图为制备多克隆抗体和单克隆抗体的示意图，回答下列问题：
（1）将抗原注射到小鼠体内时，小鼠体内发生了________免疫过程。图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，与植物体细胞杂交相比，其特有的融合方法是____________。
（2）图中两次筛选的目的不同，其中筛选②过程还需要进行____________和___________，目的是筛选出______________________________。
（3）将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养时，需将其置入含有_____________的混合气体的培养箱中进行培养。
（4）与多克隆抗体相比，单克隆抗体最主要的优点在于它的_______________，并能大量制备。从目前临床试验来看，单克隆抗体主要用于治疗癌症，例如可以将抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、药物等结合，制成“生物导弹”，借助单克隆抗体的________作用，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。
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[生物一一选修3：现代生物技术专题]
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：
(1)在培养上皮细胞时应将其置于含______________的混合气体的培养箱中进行培养。
(2)步骤②中应将上皮细胞与___________细胞通过核移植技术构建出重组细胞。
(3)图中的ES细胞来源于______________。
(4)该治疗需要利用PCR技术扩增出大量的Rag2基因，假设Rag2基因的两条链的引物分别称为引物A和引物B，那么1个Rag2基因通过PCR技术扩增四轮之后，产物中含有引物A的DNA片段所占的比例理论上为_____。某同学设计的一组引物的部分碱基序列为：引物A为...CAGGCT...，引物B为...AGCCTG...，请问这组引物的不合理之处是____________。
(5)步骤④的培养基中应加入____________以诱导ES细胞的分化。
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