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生物•选修3:现代生物科技专题
某研究组开展了将白细胞介素-2基因转入某动物细胞，并对该动物细胞进行大规模培养，提取白细胞介素-2用于制药的研究。请回答下列问题：
（1）为使干扰素基因在某动物细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的________和________之间。将白细胞介素-2基因导入动物细胞中常用____________法，转基因成功的标志是细胞中有____________生成。
（2）获得转基因动物细胞后，将转基因动物细胞放入____________培养箱中培养，为了防止培养过程中杂菌污染，可向培养基中加入____________。培养时细胞会有贴壁生长和____________现象，若细胞数目过多会因细胞密度过大和代谢消耗引起营养枯竭而不能生长，此时需进行传代培养，传代培养时需用____________处理后再转移到新的培养液中。
（3）若白细胞介素-2不能分泌到细胞外，需对钿胞进 行____________处理，再提取获得白细胞介素-2。
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生物•选修3:现代生物科技专题
某研究组开展了将白细胞介素-2基因转入某动物细胞，并对该动物细胞进行大规模培养，提取白细胞介素-2用于制药的研究。请回答下列问题：
（1）为使干扰素基因在某动物细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的________和________之间。将白细胞介素-2基因导入动物细胞中常用____________法，转基因成功的标志是细胞中有____________生成。
（2）获得转基因动物细胞后，将转基因动物细胞放入____________培养箱中培养，为了防止培养过程中杂菌污染，可向培养基中加入____________。培养时细胞会有贴壁生长和____________现象，若细胞数目过多会因细胞密度过大和代谢消耗引起营养枯竭而不能生长，此时需进行传代培养，传代培养时需用____________处理后再转移到新的培养液中。
（3）若白细胞介素-2不能分泌到细胞外，需对钿胞进 行____________处理，再提取获得白细胞介素-2。
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[生物—选修3；现代生物科技专题]
转基因克隆猪已经在我国培育成功．研究组首先从猪胎儿皮肤细胞中分离出纤维细胞，进行体外培养．通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞，经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆．接着，将重组胚胎移入代孕母猪体内，最终获得转基因克隆猪．请回答：
（1）在对纤维细胞进行培养时，需要在细胞培养液中添加一定量的 ，以防止培养过程的污染．此外，应定期更换 ，防止 对细胞自身造成危害。
（2）基因工程中常用的运载体有 ，在基因工程中需要用到的工具酶是 ，筛选转基因细胞时，需要用到基因表达载体中的标记基因，标记基因的作用是 。
（3）在进行体细胞克隆前，先要从屠宰场收集猪卵巢，采集 ，并在体外培养成熟．然后将转基因纤维细胞注入到 中，再经过一系列过程获得含有目的基因重组胚胎。检测目的基因是否整合到纤维细胞DNA分子上可采用 。
（4）为了提高 ，可以对处于 阶段的胚胎进行均等分割．将重
组胚胎移入到受体子宫后，由于受体子宫不会对外来胚胎发生免疫排斥反应，并能与之建立正常的 上的联系，因此，重组胚胎能在受体子宫中继续发育成转基因克隆猪。（5）生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构或功能失衡．这最主要体现了生态工程的 原理（只填一项）。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]癌胚抗原（CEA）是一种位于肿瘤细胞膜表面的蛋白，白细胞介素（IL-2）是一种淋巴因子。研究人员利用质粒plRES、CEA基因、IL-2基因，分别构建了重组质粒plRES-CEA、plRES-IL-2和plRES-CEA- IL-2。将实验小鼠分成6组，每隔5天进行一次肌肉注射，共3次。最后一次注射完成7天后，检测小鼠体内CEA含量、NK细胞（即自然杀伤细胞，可杀伤肿瘤细胞，而不破坏自身组织细胞）活性等指标，结果如下表。
请回答问题：
（1）构建重组质粒需要用到的工具酶有 。要保证重组质粒能够在细菌中大量扩增，重组质粒必须具有 。
（2）注射plRES-CEA- IL-2后，小鼠体内产生的大量CEA是重组质粒中的目的基因经过 和 形成的。
（3）NK细胞的活性不依赖于抗原刺激，能自发地溶解多种肿瘤细胞和被病毒感染细胞，属于人体免疫的第 道防线。
（4）从实验结果看，第 组具有最好的特异性免疫效果。对比第3组和第 组结果可以说明IL-2有促进 的作用。
（5）第1，2，4组小鼠均可产生CEA抗体，各组之间无显著性差异，但与第3组、空载体及
空白对照组相比有显著性差异，说明 。高三生物综合题困难题查看答案及解析
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【生物：选修三现代生物科技专题】某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量__________。
（2）在动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是___________。
（3）在两种细胞生长过程中，当甲细胞铺满瓶壁时，会出现____________现象，若甲细胞传代培养10-50代左右，发现增殖逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的________可能会发生变化。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞相比，可以传代的次数更多的是_______细胞。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___________消化处理。
（4）理论上，甲细胞可与某种B淋巴细胞合成_____________细胞，从而来制备__________，使患者获得特异性免疫。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】
人外周血单核细胞能合成白介素2(IL～2)。该蛋白可增强机体免疫功能，但在体内易被降解。研究人员将IL－2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有IL－2生理功能、且不易降解的IL－2－HSA融合蛋白。其技术流程如图。请回答下列问题。
(1)培养人外周血单核细胞需要无菌、无毒的环境，为防止培养过程中的污染，通常要在细胞培养液中添加一定量的_____；为保证营养充足，通常要在细胞培养液中添加_____；除提供适宜培养温度和pH外，还需适宜气体环境，通常将培养皿置于含_____的混合气体培养箱中进行培养。
(2) 图中②表示________过程，图中③表示________过程。
(3) 表达载体1中的位点________，应为限制酶BglⅡ的识别位点，才能成功构建表达载体2。表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的mRNA中，与IL－2蛋白对应的碱基序列不能含有________(起始、终止)密码子，才能成功表达出IL－2－HSA融合蛋白。
(4)应用____________杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL－2－HSA融合蛋白。IL－2－HSA融合蛋白从酵母菌细胞中排出，需要酵母菌细胞中_________（细胞器）的加工。
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[生物——选修3：现代生物科学技术]（15分）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。
（1）进行转基因操作前，需用________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。
（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_______和________之间；若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，可以采用的方法有 、 。
（3）通过PCR技术可大量获取目的基因。PCR反应体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和______________。
（4）培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。
（5）“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的_____________原理。同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的__________原理。
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【生物选修3：现代生物科技专题】（15分）阅读如下材料，回答问题：
材料1：某研究小组对小鼠的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行培养。
材料2：基因敲除是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。
(1)材料1属于_______________工程范畴。制备肝细胞悬浮液时剪碎肝组织，再用______________处理，肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的C02中，其主要作用是_______________。为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_________________。
(2)材料2属于基因工程的范畴。将某基因插入到基因表达载体的目的基因中，使目的基因____________，通过________技术导入ES细胞中。观察基因敲除前后生物体性状的变化，可以研究目的基因（敲除基因）的__________；敲除抗原决定基因，还可获得适合人体移植的其他动物器官，减弱或消除___________。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】在药品生产中，有些药品如干扰素，白细胞介素，凝血因子等，以前主要是从生物体的组织、细胞或血液中提取的，由于受原料来源限制，价格十分昂贵，而且产量低，临床供应明显不足。自70年代基因工程发展起来以后，人们逐步地在人体内发现了相应的目的基因，使之与质粒形成重组DNA，并以重组DNA引入大肠杆菌，最后利用这些工程菌，可以高效率地生产出上述各种高质量低成本的药品，请分析回答下列问题：
（1）在基因工程中，质粒是一种最常用的基因的运载体，它广泛地存在于细菌细胞中，是一种拟核外能自主复制的很小的环状 分子。
（2）在用目的基因与质粒形成重组DNA过程中，一般要用到的工具酶是 和 。
（3）在将重组质粒导入细菌时，一般首先要用 处理细菌，使细菌细胞处于一种 的生理状态；然后将重组质粒与这种感受态细胞混合，在一定的温度下促进该种感受态细胞完成 过程。
（4）将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后，能在细菌细胞内直接合成“某激素”，则该激素在细菌体内的合成先后包括 和 两个阶段。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]（15分）
几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，原因是__________________________。提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是__________________________。
（2）以mRNA为材料可以获得cDNA，其原理是__________________________。
（3）若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是__________________________（答出两点即可）。
（4）当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是__________________________。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是__________________________。
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组胚胎移入到受体子宫后，由于受体子宫不会对外来胚胎发生免疫排斥反应，并能与之建立正常的
空白对照组相比有显著性差异，说明