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【生物——选修3：现代生物科技专题】
人外周血单核细胞能合成白介素2(IL～2)。该蛋白可增强机体免疫功能，但在体内易被降解。研究人员将IL－2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有IL－2生理功能、且不易降解的IL－2－HSA融合蛋白。其技术流程如图。请回答下列问题。
(1)培养人外周血单核细胞需要无菌、无毒的环境，为防止培养过程中的污染，通常要在细胞培养液中添加一定量的_____；为保证营养充足，通常要在细胞培养液中添加_____；除提供适宜培养温度和pH外，还需适宜气体环境，通常将培养皿置于含_____的混合气体培养箱中进行培养。
(2) 图中②表示________过程，图中③表示________过程。
(3) 表达载体1中的位点________，应为限制酶BglⅡ的识别位点，才能成功构建表达载体2。表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的mRNA中，与IL－2蛋白对应的碱基序列不能含有________(起始、终止)密码子，才能成功表达出IL－2－HSA融合蛋白。
(4)应用____________杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL－2－HSA融合蛋白。IL－2－HSA融合蛋白从酵母菌细胞中排出，需要酵母菌细胞中_________（细胞器）的加工。
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人外周血单核细胞能合成白细胞介素2（IL﹣2）．该蛋白可增强机体免疫功能，在体内易被降解．研究人员将IL﹣2基因与人血清白蛋白（HSA）基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有IL﹣2生理功能、且不易降解的IL﹣2﹣HSA融合蛋白．其技术流程如图．请回答：
（1）图中②过程的原料是 ，③过程的模板是 ．表达载体1中的位点 应为限制酶BglⅡ的识别位点，才能成功构建表达载体2．
（2）表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的mRNA中，与IL﹣2蛋白对应的碱基序列不能含有 ，才能成功表达出IL﹣2﹣HSA融合蛋白．
（3）在上述基因工程的操作过程中可以遵循碱基互补配对原则的步骤有 （用序号表示）．
（4）不同种生物之间的基因移植成功，从分子水平分析，进行基因工程的主要理论依据是（至少2点） ， ．
（5）培养人外周血单核细胞时，通常需要在合成培养基中加入 等，此外还需要通入 （气体），该气体的作用是 ．
（6）应从重组酵母菌中提取 ，用相应的抗体进行 ，来检测酵母菌是否表达出IL﹣2﹣HSA融合蛋白．
（7）如果基因表达载体2导入的是优质奶牛的受精卵细胞，经胚胎培养后移入受体母牛子宫 ．
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人外周血单核细胞能合成白细胞介素-2（IL-2）。该蛋白为淋巴因子，可增强机体免疫功能，但在体内易被降解。研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白（HSA）基因拼接成一个融合基因，在酵母菌中表达出具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2-HSA融合蛋白。技术流程如图。请回答：
（1）从健康人外周血分离得到的单核细胞，应置于________气体环境中，并在适宜温度和pH条件下培养48h。培养液中通常要加________等天然成分。提取细胞总RNA生成cDNA。图中PCR过程的模板是________，该过程使用的酶是________。
（2）表达载体1中的位点a应含有图中________酶的识别序列，才能成功构建表达载体2。
（3）表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的mRNA中，与IL-2蛋白对应的碱基序列中不能含有________密码，才能成功表达出IL-2-HsA融合蛋白。
（4）将表达载体2导入酵母细胞，在培养液中培养一段时间后离心，取________（上清液／菌体）进行产物鉴定。鉴定方法是________。
（5）若希望白细胞介素-2（IL-2）在体内不易被降解，则需要通过________工程手段对合成白细胞介素-2的相关目的基因进行设计，该工程是一项难度很大的工程，目前成功的例 子不多，主要原因是________。
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(14分)人外周血单核细胞能合成白细胞介素2（IL-2）。该蛋白可增强机体免疫功能，但在体内易被降解。研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白（HSA）基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2- HSA融合蛋白。其技术流程如图。请回答：
（1）图中③过程的模板是________。表达载体1中的位点____应为限制酶BglⅡ的识别位点，才能成功构建表达载体2。
（2）表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的mRNA中，与IL
-2蛋白对应的碱基序列不能含有____________，才能成功表达出IL-2-HSA融合蛋白。
（3）培养人外周血单核细胞时，需要将温度控制在______℃，此外还需要通入______（气体）。
（4）应用________技术可检测酵母菌是否表达出IL-2- HSA融合蛋白。
（5）如果基因表达载体2导入的是优质奶牛的受精卵细胞，经胚胎培养后移入受体母牛子宫内可以存活的生理学基础是________________________________________
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人外周血单核细胞能合成白细胞介素2（IL－2）。该蛋白可增强机体免疫功能，但在体内易 被降解。研究人员将1L－2基因与人血清白蛋白（HAS）基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有1L－2生理功能、且不易降解的1L－2－HSA融合蛋白，其技术流程如图。请回答：
（1）图中③过程的模板是_______。表达载体1中的位点________应为限制酶Bg1Ⅱ的识别位点，才能成功构建表达载体2。
（2）表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的mRNA中，与1L－2蛋白对应的碱基序列不能含有____________，才能成功表达出IL－2－HSA融合蛋白。 启动子是__________识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA。
（3）培养人外周血单核细胞时，需要将温度控制在___________℃，此外还需要通入__________（气体）。
（4）应用_____________技术可检测酵母菌是否表达出IL－2－HSA融合蛋白。
（5）如果基因表达载体2导入的是优质奶牛的受精卵细胞，经胚胎培养后移入受体母牛子宫内可以存活的生理学基础是 ________________。
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人外周血单核细胞能合成白细胞介素2（IL－2）。该蛋白可增强机体免疫功能，但在体内易 被降解。研究人员将1L－2基因与人血清白蛋白（HAS）基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有1L－2生理功能、且不易降解的1L－2－HSA融合蛋白，其技术流程如图。请回答：
（1）图中③过程的模板是_______。表达载体1中的位点________应为限制酶Bg1Ⅱ的识别位点，才能成功构建表达载体2。
（2）表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的mRNA中，与1L－2蛋白对应的碱基序列不能含有____________，才能成功表达出IL－2－HSA融合蛋白。 启动子是__________识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA。
（3）培养人外周血单核细胞时，需要将温度控制在___________℃，此外还需要通入__________（气体）。
（4）应用_____________技术可检测酵母菌是否表达出IL－2－HSA融合蛋白。
（5）如果基因表达载体2导入的是优质奶牛的受精卵细胞，经胚胎培养后移入受体母牛子宫内可以存活的生理学基础是 ________________。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】白细胞介素—2（IL—2），在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白，对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用。传统生产方法成本高、产量低，获得的IL—2在体外不易保存。用生物技术手段可以解决这些问题。请回答相关问题：
（1）利用基因工程生产IL—2，过程是：
①从健康人体外周静脉血分离能合成IL—2的免疫细胞，从中提取_______________，经逆转录获取目的基因，此过程需要的原料是_______________。
②用限制酶处理载体和目的基因后，用DNA链接酶处理，形成重组载体，该载体的化学本质是_____________。该步骤是基因操作的核心，称为_____________。
③若选择大肠杆菌作为受体细胞，常用的转化方法是用Ca2+处理，使其成为_____________，再在一定温度下完成转化。
④在培养液中培养一段时间后，经进一步处理获得产物，进行产物鉴定时可采用_____________技术。
（2）利用蛋白质工程对IL—2进行改造，基本途径是：
预期蛋白质功能→_____________→_____________→找到对应的脱氧核苷酸序列。
（3）利用细胞工程生产IL—2，思路是：
将相应免疫细胞和瘤细胞融合，筛选出______细胞，经细胞培养可获得大量IL—2。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子，临床及研究中需要大量高纯度的IL-4，以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题：
(1)在免疫系统组成中，IL-4属于 ___物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA，将其反转录成_______ ，构建特定表达载体，利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是______细胞，其与M细胞融合产生双核或多核细胞，再经________，进一步形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中，要用特定的选择性培养基进行细胞筛选，得到的____细胞能在体外培养增殖生长。经b获得的细胞，还需要进行____。
(4)c培养瓶中培养的细胞是____的杂交瘤细胞。制备IL-4单克隆抗体的过程中，细胞培养瓶通常置于特定培养箱中进行细胞培养，要求培养瓶松盖，主要目的是____。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子，临床及研究中需要大量高纯度的IL-4，以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题：
(1)在免疫系统组成中，IL-4属于 ___物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA，将其反转录成_______ ，构建特定表达载体，利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是______细胞，其与M细胞融合产生双核或多核细胞，再经________，进一步形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中，要用特定的选择性培养基进行细胞筛选，得到的____细胞能在体外培养增殖生长。经b获得的细胞，还需要进行____。
(4)c培养瓶中培养的细胞是____的杂交瘤细胞。制备IL-4单克隆抗体的过程中，细胞培养瓶通常置于特定培养箱中进行细胞培养，要求培养瓶松盖，主要目的是____。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]癌胚抗原（CEA）是一种位于肿瘤细胞膜表面的蛋白，白细胞介素（IL-2）是一种淋巴因子。研究人员利用质粒plRES、CEA基因、IL-2基因，分别构建了重组质粒plRES-CEA、plRES-IL-2和plRES-CEA- IL-2。将实验小鼠分成6组，每隔5天进行一次肌肉注射，共3次。最后一次注射完成7天后，检测小鼠体内CEA含量、NK细胞（即自然杀伤细胞，可杀伤肿瘤细胞，而不破坏自身组织细胞）活性等指标，结果如下表。
请回答问题：
（1）构建重组质粒需要用到的工具酶有 。要保证重组质粒能够在细菌中大量扩增，重组质粒必须具有 。
（2）注射plRES-CEA- IL-2后，小鼠体内产生的大量CEA是重组质粒中的目的基因经过 和 形成的。
（3）NK细胞的活性不依赖于抗原刺激，能自发地溶解多种肿瘤细胞和被病毒感染细胞，属于人体免疫的第 道防线。
（4）从实验结果看，第 组具有最好的特异性免疫效果。对比第3组和第 组结果可以说明IL-2有促进 的作用。
（5）第1，2，4组小鼠均可产生CEA抗体，各组之间无显著性差异，但与第3组、空载体及
空白对照组相比有显著性差异，说明 。
-2蛋白对应的碱基序列不能含有____________，才能成功表达出IL-2-HSA融合蛋白。
空白对照组相比有显著性差异，说明