[生物——选修3:现代生物科技专题]白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子,临床及研究中需要大量高纯度的IL-4,以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题:
(1)在免疫系统组成中,IL-4属于 ___物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA,将其反转录成_______ ,构建特定表达载体,利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是______细胞,其与M细胞融合产生双核或多核细胞,再经________,进一步形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中,要用特定的选择性培养基进行细胞筛选,得到的____细胞能在体外培养增殖生长。经b获得的细胞,还需要进行____。
(4)c培养瓶中培养的细胞是____的杂交瘤细胞。制备IL-4单克隆抗体的过程中,细胞培养瓶通常置于特定培养箱中进行细胞培养,要求培养瓶松盖,主要目的是____。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子,临床及研究中需要大量高纯度的IL-4,以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题:
(1)在免疫系统组成中,IL-4属于 ___物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA,将其反转录成_______ ,构建特定表达载体,利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是______细胞,其与M细胞融合产生双核或多核细胞,再经________,进一步形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中,要用特定的选择性培养基进行细胞筛选,得到的____细胞能在体外培养增殖生长。经b获得的细胞,还需要进行____。
(4)c培养瓶中培养的细胞是____的杂交瘤细胞。制备IL-4单克隆抗体的过程中,细胞培养瓶通常置于特定培养箱中进行细胞培养,要求培养瓶松盖,主要目的是____。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子,临床及研究中需要大量高纯度的IL-4,以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题:
(1)在免疫系统组成中,IL-4属于 ___物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA,将其反转录成_______ ,构建特定表达载体,利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是______细胞,其与M细胞融合产生双核或多核细胞,再经________,进一步形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中,要用特定的选择性培养基进行细胞筛选,得到的____细胞能在体外培养增殖生长。经b获得的细胞,还需要进行____。
(4)c培养瓶中培养的细胞是____的杂交瘤细胞。制备IL-4单克隆抗体的过程中,细胞培养瓶通常置于特定培养箱中进行细胞培养,要求培养瓶松盖,主要目的是____。
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白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子,临床及研究中需要大量高纯度的IL-4,以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题。
(1)在免疫系统组成中,IL-4属于______物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA,将其反转录成______,构建特定表达载体,利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是______细胞,其与M细胞融合产生双核或多核细胞,再经_____,进一步形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中,要用特定的选择性培养基进行细胞筛选,得到的_________细胞能在体外培养增殖生长。经b获得的细胞,还需要进行_________。
(4)c培养瓶中培养的细胞是____________的杂交瘤细胞。制备IL-4单克隆抗体的过程中,细胞培养瓶通常置于特定培养箱中进行细胞培养,要求培养瓶松盖,主要目的是______。
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白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子,临床及研究中需要大量高纯度的IL-4,以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题。
(1)在免疫系统组成中,IL-4属于免疫活性物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA。将其反转录成________,其中________(填“有”或“无”)启动子和终止子。并构建特定表达载体,利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是________细胞,其与M细胞融合产生双核或多核细胞。再经________才能形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中,常用________诱导细胞融合,再用特定的方法对其中细胞进行筛选。c中培养的细胞应具有________特点。经d培养的细胞,其培养液中除了加基本的营养物以外,还需要加抗生素、动物血清等,其中加动物血清的目的是____________________。
(4)从d或小鼠体内抽取的抗IL-4抗体的特点是__________。
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【生物——选修3:现代生物科技专题】
人外周血单核细胞能合成白介素2(IL~2)。该蛋白可增强机体免疫功能,但在体内易被降解。研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因,并在酵母菌中表达,获得具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2-HSA融合蛋白。其技术流程如图。请回答下列问题。
(1)培养人外周血单核细胞需要无菌、无毒的环境,为防止培养过程中的污染,通常要在细胞培养液中添加一定量的_____;为保证营养充足,通常要在细胞培养液中添加_____;除提供适宜培养温度和pH外,还需适宜气体环境,通常将培养皿置于含_____的混合气体培养箱中进行培养。
(2) 图中②表示________过程,图中③表示________过程。
(3) 表达载体1中的位点________,应为限制酶BglⅡ的识别位点,才能成功构建表达载体2。表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与IL-2蛋白对应的碱基序列不能含有________(起始、终止)密码子,才能成功表达出IL-2-HSA融合蛋白。
(4)应用____________杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL-2-HSA融合蛋白。IL-2-HSA融合蛋白从酵母菌细胞中排出,需要酵母菌细胞中_________(细胞器)的加工。
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【生物——选修3:现代生物科技专题】白细胞介素—2(IL—2),在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白,对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用。传统生产方法成本高、产量低,获得的IL—2在体外不易保存。用生物技术手段可以解决这些问题。请回答相关问题:
(1)利用基因工程生产IL—2,过程是:
①从健康人体外周静脉血分离能合成IL—2的免疫细胞,从中提取_______________,经逆转录获取目的基因,此过程需要的原料是_______________。
②用限制酶处理载体和目的基因后,用DNA链接酶处理,形成重组载体,该载体的化学本质是_____________。该步骤是基因操作的核心,称为_____________。
③若选择大肠杆菌作为受体细胞,常用的转化方法是用Ca2+处理,使其成为_____________,再在一定温度下完成转化。
④在培养液中培养一段时间后,经进一步处理获得产物,进行产物鉴定时可采用_____________技术。
(2)利用蛋白质工程对IL—2进行改造,基本途径是:
预期蛋白质功能→_____________→_____________→找到对应的脱氧核苷酸序列。
(3)利用细胞工程生产IL—2,思路是:
将相应免疫细胞和瘤细胞融合,筛选出______细胞,经细胞培养可获得大量IL—2。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]癌胚抗原(CEA)是一种位于肿瘤细胞膜表面的蛋白,白细胞介素(IL-2)是一种淋巴因子。研究人员利用质粒plRES、CEA基因、IL-2基因,分别构建了重组质粒plRES-CEA、plRES-IL-2和plRES-CEA- IL-2。将实验小鼠分成6组,每隔5天进行一次肌肉注射,共3次。最后一次注射完成7天后,检测小鼠体内CEA含量、NK细胞(即自然杀伤细胞,可杀伤肿瘤细胞,而不破坏自身组织细胞)活性等指标,结果如下表。
请回答问题:
(1)构建重组质粒需要用到的工具酶有 。要保证重组质粒能够在细菌中大量扩增,重组质粒必须具有 。
(2)注射plRES-CEA- IL-2后,小鼠体内产生的大量CEA是重组质粒中的目的基因经过 和 形成的。
(3)NK细胞的活性不依赖于抗原刺激,能自发地溶解多种肿瘤细胞和被病毒感染细胞,属于人体免疫的第 道防线。
(4)从实验结果看,第 组具有最好的特异性免疫效果。对比第3组和第 组结果可以说明IL-2有促进 的作用。
(5)第1,2,4组小鼠均可产生CEA抗体,各组之间无显著性差异,但与第3组、空载体及空白对照组相比有显著性差异,说明 。
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【生物——选修3:现代生物科技专题】在药品生产中,有些药品如干扰素,白细胞介素,凝血因子等,以前主要是从生物体的组织、细胞或血液中提取的,由于受原料来源限制,价格十分昂贵,而且产量低,临床供应明显不足。自70年代基因工程发展起来以后,人们逐步地在人体内发现了相应的目的基因,使之与质粒形成重组DNA,并以重组DNA引入大肠杆菌,最后利用这些工程菌,可以高效率地生产出上述各种高质量低成本的药品,请分析回答下列问题:
(1)在基因工程中,质粒是一种最常用的基因的运载体,它广泛地存在于细菌细胞中,是一种拟核外能自主复制的很小的环状 分子。
(2)在用目的基因与质粒形成重组DNA过程中,一般要用到的工具酶是 和 。
(3)在将重组质粒导入细菌时,一般首先要用 处理细菌,使细菌细胞处于一种 的生理状态;然后将重组质粒与这种感受态细胞混合,在一定的温度下促进该种感受态细胞完成 过程。
(4)将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后,能在细菌细胞内直接合成“某激素”,则该激素在细菌体内的合成先后包括 和 两个阶段。
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临床观察发现化疗药物会通过抑制T细胞中IFN-y(具有抗病毒及抗肿瘤作用)的表达量来抑制T细胞的免疫功能,导致患者免疫低下(如图1)。为探讨白细胞介素12(IL-12)能否缓解化疗药物对肿瘤患者的免疫抑制作用,科研工作者用肿瘤模型小鼠进行实验,结果如图2。据图分析以下说法不正确的是( )
A.患肿瘤可能与自身IFN-y表达量降低有关
B.顺铂可能是一种用于肿瘤治疗的化疗药物
C.IL-12可以缓解化疗药物对肿瘤患者的免疫抑制作用
D.IL-12对健康人的IFN-y表达量没有影响
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生物•选修3:现代生物科技专题
某研究组开展了将白细胞介素-2基因转入某动物细胞,并对该动物细胞进行大规模培养,提取白细胞介素-2用于制药的研究。请回答下列问题:
(1)为使干扰素基因在某动物细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的________和________之间。将白细胞介素-2基因导入动物细胞中常用____________法,转基因成功的标志是细胞中有____________生成。
(2)获得转基因动物细胞后,将转基因动物细胞放入____________培养箱中培养,为了防止培养过程中杂菌污染,可向培养基中加入____________。培养时细胞会有贴壁生长和____________现象,若细胞数目过多会因细胞密度过大和代谢消耗引起营养枯竭而不能生长,此时需进行传代培养,传代培养时需用____________处理后再转移到新的培养液中。
(3)若白细胞介素-2不能分泌到细胞外,需对钿胞进 行____________处理,再提取获得白细胞介素-2。
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