白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子,临床及研究中需要大量高纯度的IL-4,以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题。
(1)在免疫系统组成中,IL-4属于免疫活性物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA。将其反转录成________,其中________(填“有”或“无”)启动子和终止子。并构建特定表达载体,利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是________细胞,其与M细胞融合产生双核或多核细胞。再经________才能形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中,常用________诱导细胞融合,再用特定的方法对其中细胞进行筛选。c中培养的细胞应具有________特点。经d培养的细胞,其培养液中除了加基本的营养物以外,还需要加抗生素、动物血清等,其中加动物血清的目的是____________________。
(4)从d或小鼠体内抽取的抗IL-4抗体的特点是__________。
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白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子,临床及研究中需要大量高纯度的IL-4,以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题。
(1)在免疫系统组成中,IL-4属于______物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA,将其反转录成______,构建特定表达载体,利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是______细胞,其与M细胞融合产生双核或多核细胞,再经_____,进一步形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中,要用特定的选择性培养基进行细胞筛选,得到的_________细胞能在体外培养增殖生长。经b获得的细胞,还需要进行_________。
(4)c培养瓶中培养的细胞是____________的杂交瘤细胞。制备IL-4单克隆抗体的过程中,细胞培养瓶通常置于特定培养箱中进行细胞培养,要求培养瓶松盖,主要目的是______。
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白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子,临床及研究中需要大量高纯度的IL-4,以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题。
(1)在免疫系统组成中,IL-4属于免疫活性物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA。将其反转录成________,其中________(填“有”或“无”)启动子和终止子。并构建特定表达载体,利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是________细胞,其与M细胞融合产生双核或多核细胞。再经________才能形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中,常用________诱导细胞融合,再用特定的方法对其中细胞进行筛选。c中培养的细胞应具有________特点。经d培养的细胞,其培养液中除了加基本的营养物以外,还需要加抗生素、动物血清等,其中加动物血清的目的是____________________。
(4)从d或小鼠体内抽取的抗IL-4抗体的特点是__________。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子,临床及研究中需要大量高纯度的IL-4,以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题:
(1)在免疫系统组成中,IL-4属于 ___物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA,将其反转录成_______ ,构建特定表达载体,利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是______细胞,其与M细胞融合产生双核或多核细胞,再经________,进一步形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中,要用特定的选择性培养基进行细胞筛选,得到的____细胞能在体外培养增殖生长。经b获得的细胞,还需要进行____。
(4)c培养瓶中培养的细胞是____的杂交瘤细胞。制备IL-4单克隆抗体的过程中,细胞培养瓶通常置于特定培养箱中进行细胞培养,要求培养瓶松盖,主要目的是____。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子,临床及研究中需要大量高纯度的IL-4,以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题:
(1)在免疫系统组成中,IL-4属于 ___物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA,将其反转录成_______ ,构建特定表达载体,利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是______细胞,其与M细胞融合产生双核或多核细胞,再经________,进一步形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中,要用特定的选择性培养基进行细胞筛选,得到的____细胞能在体外培养增殖生长。经b获得的细胞,还需要进行____。
(4)c培养瓶中培养的细胞是____的杂交瘤细胞。制备IL-4单克隆抗体的过程中,细胞培养瓶通常置于特定培养箱中进行细胞培养,要求培养瓶松盖,主要目的是____。
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临床观察发现化疗药物会通过抑制T细胞中IFN-y(具有抗病毒及抗肿瘤作用)的表达量来抑制T细胞的免疫功能,导致患者免疫低下(如图1)。为探讨白细胞介素12(IL-12)能否缓解化疗药物对肿瘤患者的免疫抑制作用,科研工作者用肿瘤模型小鼠进行实验,结果如图2。据图分析以下说法不正确的是( )
A.患肿瘤可能与自身IFN-y表达量降低有关
B.顺铂可能是一种用于肿瘤治疗的化疗药物
C.IL-12可以缓解化疗药物对肿瘤患者的免疫抑制作用
D.IL-12对健康人的IFN-y表达量没有影响
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白介素-6(IL-6)是一种多肽,具有调节糖代谢等功能。运动后体内IL-6含量明显上升,有人认为原因是骨骼肌收缩促使肌细胞大量合成并分泌IL-6。研究人员用大鼠做了如图所示的实验进行验证。请回答:
⑴电刺激后,右后肢迅速出现缩腿反射,而左后肢无反应。该现象体现了神经调节具有_____________的特点。
⑵在实验中检测IL-6mRNA含量的理由是____________________________。本研究除了检测收缩的骨骼肌细胞内IL-6mRNA含量,还应检测_________的IL-6mRNA含量作为对照。若结果是_______________,则证明上述假说成立。
⑶其他研究还表明,IL-6调节糖代谢的机理是作用于肝脏细胞促进___________,使血糖浓度升高,同时能加速骨骼肌对葡萄糖的_____________,为其收缩提供更多的能量。
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白细胞介素-1(IL-1)是重要的炎性介质之一,也是一种热原质成分,具有致热和介导炎症的作用。它主要在细胞免疫激活中发挥调节作用。某项目小组利用基因工程技术大量合成IL-1,在pBV220载体(图A)多克隆位点的EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点之间插入目的基因IL1-His,构建表达载体pBV-IL1-His(图B)。转化感受态细胞(大肠杆菌),通过选择性培养基(Ampr)和菌体PCR法筛选重组子阳性克隆。在适宜条件下培养并诱导目的蛋白的表达,最后利用His抗体进行蛋白质印迹检测表达情况。
(1)在上述实验中,为了防止目的基因和pBV220载体在酶切后的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是______________________。目的基因的长度为______pb(重组质粒上目的基因的插入位点与酶切位点之间的碱基对忽略不计)。pBV-IL1-His表达载体除了氨苄青霉素抗性基因(Ampr)、目的基因外还必须具有______________________等基因。
(2)转化感受态大肠杆菌时需要用________处理细胞。利用PCR技术体外扩增DNA时,需将双链DNA加热到90℃以上,目的是___________________________。
(3)最后是通过________________技术来检验实验是否成功。假设未检测出目的蛋白,分析可能的原因有______________________________。(写出一种即可)
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白细胞介素-1(IL-1)是重要的炎性介质之一,也是一种热原质成分,具有致热和介导炎症的作用。它主要在细胞免疫激活中发挥调节作用。某项目小组利用基因工程技术大量合成IL-1,在pBV220载体(图A)多克隆位点的EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点之间插入目的基因IL1-His,构建表达载体pBV-IL1-His(图B)。转化感受态细胞(大肠杆菌),通过选择性培养基(Ampr)和菌体PCR法筛选重组子阳性克隆。在适宜条件下培养并诱导目的蛋白的表达,最后利用His抗体进行蛋白质印迹检测表达情况。
(1)在上述实验中,为了防止目的基因和pBV220载体在酶切后的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是______________________。目的基因的长度为______pb(重组质粒上目的基因的插入位点与酶切位点之间的碱基对忽略不计)。pBV-IL1-His表达载体除了氨苄青霉素抗性基因(Ampr)、目的基因外还必须具有______________________等基因。
(2)转化感受态大肠杆菌时需要用________处理细胞。利用PCR技术体外扩增DNA时,需将双链DNA加热到90℃以上,目的是___________________________。
(3)最后是通过________________技术来检验实验是否成功。假设未检测出目的蛋白,分析可能的原因有______________________________。(写出一种即可)
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人外周血单核细胞能合成白细胞介素-2(IL-2)。该蛋白为淋巴因子,可增强机体免疫功能,但在体内易被降解。研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因,在酵母菌中表达出具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2-HSA融合蛋白。技术流程如图。请回答:
(1)从健康人外周血分离得到的单核细胞,应置于________气体环境中,并在适宜温度和pH条件下培养48h。培养液中通常要加________等天然成分。提取细胞总RNA生成cDNA。图中PCR过程的模板是________,该过程使用的酶是________。
(2)表达载体1中的位点a应含有图中________酶的识别序列,才能成功构建表达载体2。
(3)表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与IL-2蛋白对应的碱基序列中不能含有________密码,才能成功表达出IL-2-HsA融合蛋白。
(4)将表达载体2导入酵母细胞,在培养液中培养一段时间后离心,取________(上清液/菌体)进行产物鉴定。鉴定方法是________。
(5)若希望白细胞介素-2(IL-2)在体内不易被降解,则需要通过________工程手段对合成白细胞介素-2的相关目的基因进行设计,该工程是一项难度很大的工程,目前成功的例 子不多,主要原因是________。
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人外周血单核细胞能合成白细胞介素2(IL﹣2).该蛋白可增强机体免疫功能,在体内易被降解.研究人员将IL﹣2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因,并在酵母菌中表达,获得具有IL﹣2生理功能、且不易降解的IL﹣2﹣HSA融合蛋白.其技术流程如图.请回答:
(1)图中②过程的原料是 ,③过程的模板是 .表达载体1中的位点 应为限制酶BglⅡ的识别位点,才能成功构建表达载体2.
(2)表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与IL﹣2蛋白对应的碱基序列不能含有 ,才能成功表达出IL﹣2﹣HSA融合蛋白.
(3)在上述基因工程的操作过程中可以遵循碱基互补配对原则的步骤有 (用序号表示).
(4)不同种生物之间的基因移植成功,从分子水平分析,进行基因工程的主要理论依据是(至少2点) , .
(5)培养人外周血单核细胞时,通常需要在合成培养基中加入 等,此外还需要通入 (气体),该气体的作用是 .
(6)应从重组酵母菌中提取 ,用相应的抗体进行 ,来检测酵母菌是否表达出IL﹣2﹣HSA融合蛋白.
(7)如果基因表达载体2导入的是优质奶牛的受精卵细胞,经胚胎培养后移入受体母牛子宫 .
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