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白细胞介素-1（IL-1）是重要的炎性介质之一，也是一种热原质成分，具有致热和介导炎症的作用。它主要在细胞免疫激活中发挥调节作用。某项目小组利用基因工程技术大量合成IL-1，在pBV220载体（图A）多克隆位点的EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点之间插入目的基因IL1-His，构建表达载体pBV-IL1-His（图B）。转化感受态细胞（大肠杆菌），通过选择性培养基（Ampr）和菌体PCR法筛选重组子阳性克隆。在适宜条件下培养并诱导目的蛋白的表达，最后利用His抗体进行蛋白质印迹检测表达情况。
（1）在上述实验中，为了防止目的基因和pBV220载体在酶切后的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是______________________。目的基因的长度为______pb（重组质粒上目的基因的插入位点与酶切位点之间的碱基对忽略不计）。pBV-IL1-His表达载体除了氨苄青霉素抗性基因（Ampr）、目的基因外还必须具有______________________等基因。
（2）转化感受态大肠杆菌时需要用________处理细胞。利用PCR技术体外扩增DNA时，需将双链DNA加热到90℃以上，目的是___________________________。
（3）最后是通过________________技术来检验实验是否成功。假设未检测出目的蛋白，分析可能的原因有______________________________。（写出一种即可）
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白细胞介素-1（IL-1）是重要的炎性介质之一，也是一种热原质成分，具有致热和介导炎症的作用。它主要在细胞免疫激活中发挥调节作用。某项目小组利用基因工程技术大量合成IL-1，在pBV220载体（图A）多克隆位点的EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点之间插入目的基因IL1-His，构建表达载体pBV-IL1-His（图B）。转化感受态细胞（大肠杆菌），通过选择性培养基（Ampr）和菌体PCR法筛选重组子阳性克隆。在适宜条件下培养并诱导目的蛋白的表达，最后利用His抗体进行蛋白质印迹检测表达情况。
（1）在上述实验中，为了防止目的基因和pBV220载体在酶切后的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是______________________。目的基因的长度为______pb（重组质粒上目的基因的插入位点与酶切位点之间的碱基对忽略不计）。pBV-IL1-His表达载体除了氨苄青霉素抗性基因（Ampr）、目的基因外还必须具有______________________等基因。
（2）转化感受态大肠杆菌时需要用________处理细胞。利用PCR技术体外扩增DNA时，需将双链DNA加热到90℃以上，目的是___________________________。
（3）最后是通过________________技术来检验实验是否成功。假设未检测出目的蛋白，分析可能的原因有______________________________。（写出一种即可）
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【生物——选修3：现代生物科技专题】白细胞介素—2（IL—2），在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白，对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用。传统生产方法成本高、产量低，获得的IL—2在体外不易保存。用生物技术手段可以解决这些问题。请回答相关问题：
（1）利用基因工程生产IL—2，过程是：
①从健康人体外周静脉血分离能合成IL—2的免疫细胞，从中提取_______________，经逆转录获取目的基因，此过程需要的原料是_______________。
②用限制酶处理载体和目的基因后，用DNA链接酶处理，形成重组载体，该载体的化学本质是_____________。该步骤是基因操作的核心，称为_____________。
③若选择大肠杆菌作为受体细胞，常用的转化方法是用Ca2+处理，使其成为_____________，再在一定温度下完成转化。
④在培养液中培养一段时间后，经进一步处理获得产物，进行产物鉴定时可采用_____________技术。
（2）利用蛋白质工程对IL—2进行改造，基本途径是：
预期蛋白质功能→_____________→_____________→找到对应的脱氧核苷酸序列。
（3）利用细胞工程生产IL—2，思路是：
将相应免疫细胞和瘤细胞融合，筛选出______细胞，经细胞培养可获得大量IL—2。
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临床观察发现化疗药物会通过抑制T细胞中IFN-y（具有抗病毒及抗肿瘤作用）的表达量来抑制T细胞的免疫功能，导致患者免疫低下（如图1）。为探讨白细胞介素12（IL-12）能否缓解化疗药物对肿瘤患者的免疫抑制作用，科研工作者用肿瘤模型小鼠进行实验，结果如图2。据图分析以下说法不正确的是（ ）
A.患肿瘤可能与自身IFN-y表达量降低有关
B.顺铂可能是一种用于肿瘤治疗的化疗药物
C.IL-12可以缓解化疗药物对肿瘤患者的免疫抑制作用
D.IL-12对健康人的IFN-y表达量没有影响
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(13分）某科研小组开展了人白细胞介素18(IL - 18)对核辐射诱导小鼠脾细胞凋亡的抑制作用的研究。
实验原理：机体的免疫系统对核辐射损伤很敏感，主要表现在核辐射会诱导免疫细胞凋亡。
实验步骤：
①选取若干实验小鼠，随机均分成甲、乙、丙三组；
②甲组无辐射损伤；乙组辐射损伤(60Co照射，下同）；丙组先辐射损伤，1天后注射1L - 18。
③14天后分别取各组小鼠脾细胞进行体外培养，在培养了 0h、12h、24h、48h后，检测并计算细胞凋亡相对值。
(1)脾属于机体免疫系统的 ________，1L - 18是一种淋巴因子，由_________细胞分泌；淋巴因子与 _________都属于免疫活性物质。
(2)细胞凋亡是由遗传决定的______________死亡，与细胞凋亡直接相关的细胞器是______。
(3)设置甲、乙两组的目的是探究有无核辐射对细胞凋亡的影响。设置乙、丙两组的目的是____________________________________。请设计实验结果记录表。
(4)科研小组还设置了丁组实验，方法是先注射IL-18，3天后进行辐射损伤，14天后的实验操作同前三组，与丙组相比，设置丁组的目的是________________________________。
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（9分）某科研小组开展了人白细胞介素18(IL- 18)对核辐射诱导小鼠脾细胞凋亡的抑制作用的研究。 实验原理：机体的免疫系统对核辐射损伤很敏感，主要表现在核辐射会诱导免疫细胞凋亡。 实验步骤：
①选取若干实验小鼠，随机均分成甲、乙、丙三组；
②甲组无辐射损伤；乙组辐射损伤(Co照射，下同）；丙组先辐射损伤，1天后注射1L - 18。
③14天后分别取各组小鼠脾细胞进行体外培养，在培养了 0h、12h、24h、48h后，检测并计算细胞凋亡相对值。
（1）脾属于机体免疫系统的 _________，1L - 18是一种淋巴因子，由_________细胞分泌；淋巴因子与_________都属于免疫活性物质。
（2）细胞凋亡是由遗传决定的__________死亡，与细胞凋亡直接相关的细胞器是_________。
（3）设置甲、乙两组的目的是探究有无核辐射对细胞凋亡的影响。设置乙、丙两组的目的是________________________________。
（4）科研小组还设置了丁组实验，方法是先注射IL-18，3天后进行辐射损伤，14天后的实验操作同前三组，与丙组相比，设置丁组的目的是________________________________。
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（9分）某科研小组开展了人白细胞介素18(IL- 18)对核辐射诱导小鼠脾细胞凋亡的抑制作用的研究。 实验原理：机体的免疫系统对核辐射损伤很敏感，主要表现在核辐射会诱导免疫细胞凋亡。 实验步骤：
①选取若干实验小鼠，随机均分成甲、乙、丙三组；
②甲组无辐射损伤；乙组辐射损伤(Co照射，下同）；丙组先辐射损伤，1天后注射1L - 18。
③14天后分别取各组小鼠脾细胞进行体外培养，在培养了 0h、12h、24h、48h后，检测并计算细胞凋亡相对值。
(1)脾属于机体免疫系统的 _________，1L - 18是一种淋巴因子，由_________细胞分泌；淋巴因子与_________都属于免疫活性物质。
(2)细胞凋亡是由遗传决定的__________死亡，与细胞凋亡直接相关的细胞器是_________。
(3)设置甲、乙两组的目的是探究有无核辐射对细胞凋亡的影响。设置乙、丙两组的目的是________________________________。请设计实验结果记录表。
(4)科研小组还设置了丁组实验，方法是先注射IL-18，3天后进行辐射损伤，14天后的实验操作同前三组，与丙组相比，设置丁组的目的是________________________________。
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白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子,临床及研究中需要大量高纯度的IL-4,以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题。
(1)在免疫系统组成中,IL-4属于______物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA,将其反转录成______,构建特定表达载体,利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是______细胞,其与M细胞融合产生双核或多核细胞,再经_____,进一步形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中,要用特定的选择性培养基进行细胞筛选,得到的_________细胞能在体外培养增殖生长。经b获得的细胞,还需要进行_________。
(4)c培养瓶中培养的细胞是____________的杂交瘤细胞。制备IL-4单克隆抗体的过程中,细胞培养瓶通常置于特定培养箱中进行细胞培养,要求培养瓶松盖,主要目的是______。
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白细胞介素4(IL－4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子，临床及研究中需要大量高纯度的IL－4，以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL－4特异性抗体的过程。回答相关问题。
(1)在免疫系统组成中，IL－4属于免疫活性物质。研究人员从外周血中提取到IL－4蛋白分子的mRNA。将其反转录成________，其中________(填“有”或“无”)启动子和终止子。并构建特定表达载体，利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL－4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是________细胞，其与M细胞融合产生双核或多核细胞。再经________才能形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中，常用________诱导细胞融合，再用特定的方法对其中细胞进行筛选。c中培养的细胞应具有________特点。经d培养的细胞，其培养液中除了加基本的营养物以外，还需要加抗生素、动物血清等，其中加动物血清的目的是____________________。
(4)从d或小鼠体内抽取的抗IL－4抗体的特点是__________。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子，临床及研究中需要大量高纯度的IL-4，以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题：
(1)在免疫系统组成中，IL-4属于 ___物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA，将其反转录成_______ ，构建特定表达载体，利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。
(2)图中所示的a培养瓶中培养的是______细胞，其与M细胞融合产生双核或多核细胞，再经________，进一步形成两个新的单核杂交细胞。
(3)b培养瓶所示过程中，要用特定的选择性培养基进行细胞筛选，得到的____细胞能在体外培养增殖生长。经b获得的细胞，还需要进行____。
(4)c培养瓶中培养的细胞是____的杂交瘤细胞。制备IL-4单克隆抗体的过程中，细胞培养瓶通常置于特定培养箱中进行细胞培养，要求培养瓶松盖，主要目的是____。