下图是利用生物工程技术生产人生长激素的示意图。质粒上的Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr...

下图是利用生物工程技术生产人生长激素的示意图。质粒上的Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因，限制酶PstI、EcoR I和Hind Ⅲ切割形成的末端均不相同。据图回答：

（1）将人生长激素基因导入小鼠体内来生产生长激素。图中对供体雌鼠甲用促性腺激素处理一段时间后与雄鼠乙交配，然后通过手术的方法从雌鼠甲的___________中取出受精卵。图中早期胚胎应保证发育到____________________阶段，才能进行后续过程的操作。

（2）①过程不能利用人的皮肤细胞，其原因是_____________________________。

（3）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，切割质粒时应选用的酶是　　　　　　　　　　　　 。

（4）大肠杆菌细胞内应不含　　　　　　　 基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。

（5）如果从限制酶Pst I、EcoR I和HindⅢ任选两种酶对质粒进行切割，均会将质粒切成两段，则形成的DNA片段有________种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占___________。

（6）按照图示的操作，将三角瓶中的大肠杆菌先接种到甲培养基上，然后分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置，一段时间后，菌落的生长状况如乙、丙图所示。据图分析丙培养基中含人生长激素基因的菌落有_____个。

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下图是利用生物工程技术生产人生长激素的示意图。质粒上的Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因，限制酶PstI、EcoR I和Hind Ⅲ切割形成的末端均不相同。据图回答：

（1）将人生长激素基因导入小鼠体内来生产生长激素。图中对供体雌鼠甲用促性腺激素处理一段时间后与雄鼠乙交配，然后通过手术的方法从雌鼠甲的______中取出受精卵。

（2）①过程不能利用人的皮肤细胞，其原因是______________________________________。②过程是在____________酶的催化下，以__________________为原料合成相应产物。

（3）从该生产过程看，为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，切割质粒时应选用的酶是____________。

（4）大肠杆菌细胞内应不含____________基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。

（5）如果从限制酶Pst I、EcoR I和HindⅢ任选两种酶对质粒进行切割，均会将质粒切成两段，则形成的DNA片段有______种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占______。

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我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛，下图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的示意图。图中质粒表示基因工程中经常选用的载体—pBR322质粒，Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。根据上图回答下列问题（限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同）：

（1）过程②必需的酶是　　 ，过程④必需的酶是　　　 。⑤过程中为提高成功率，常用　　　　　　　　 溶液处理大肠杆菌。

（2）如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒pBR322进行切割，用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时，则形成的DNA片段共　　　　 种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段的比例是　　　　 。

（3）如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322，完成过程④、⑤后，将三角瓶内的大肠杆菌（不含Ampr、Tetr抗性质粒）先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。接种到甲培养基上的目的是筛选　　　 的大肠杆菌，含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态分别是　　　　 ，　　　 。

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我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛，下图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的示意图。图中质粒表示基因工程中经常选用的载体—pBR322质粒，Amp^r表示青霉素抗性基因，Tet^r表示四环素抗性基因。根据下图回答下列问题（限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同）：

（1）过程②必需的酶是________，过程④必需的酶是________。⑤过程中为提高成功率，常用________溶液处理大肠杆菌。

（2）如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒pBR322进行切割，用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时，则形成的DNA片段共________种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段的比例是________。

（3）如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322，完成过程④、⑤后，将三角瓶内的大肠杆菌（不含Amp^r、Tet^r抗性质粒）先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。接种到甲培养基上的目的是筛选________的大肠杆菌，含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态分别是________，________。

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下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制“工程菌”的示意图。图a是基因工程中经常选用的载体-pBR322质粒，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因．目的基因如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性．为了检查载体是否导入原本没有Ampr和Tetr的大肠杆菌，将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素的培养基上，得到如图b的结果（黑点表示菌落）．再将灭菌绒布按到图b的培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布平移按到含四环素的培养基上培养，得到如图c的结果（空圈表示与b对照无菌落的位置）．据此分析并回答：

（1）pBR322质粒的基本组成单位是　　　　　　 。在基因工程中，质粒上的Amrr、Tetr称为　　　　 基因。

（2）与图c空圈相对应的图b中的菌落表现型是　　　　　　　　　　　　　　 ，由此说明　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素、四环素培养基上的过程，属于基因工程基本操作中的　　　　　　　　　 步骤，该基因工程中的受体细胞是　　　　　　 。

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[生物——选修3：现代生物科技专题]下图表示利用羊生产抗凝血酶的过程，图中ampR表示氨苄青霉素抗性基因，tetR表示四环素抗性基因，BamH I、Hind Ⅲ、Sma I为三种限制酶及酶切位点，据图回答问题：

（1）通常采用_______技术来扩增获得抗凝血酶基因，其原理是_________，需要_______酶。据图分析，可将目的基因插入________抗性基因中。

（2）质粒的化学本质是______，除质粒外，还有______（至少写出两种）也可以充当载体。

（3）过程①可采用______的方法将重组质粒导入羊受精卵中，可采用_____技术来检测抗凝血酶基因是否转录成功。

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【选修3：现代生物科技专题】

人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示，请回答以下问题：

（1）①过程常采用的方法是_____________________________。

（2）构建基因表达载体时，需要将人乳铁蛋白基因嵌入到启动子和__________________ 之间，这样人乳铁蛋白基因就能在乳腺细胞中表达。

（3）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是___________。

（4）据图分析，筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含________________ （填“四环素”或“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_____________。

（5）若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为__________________________，对于该部位，这两种酶_____________________（“都不能”或“只有一种能”）切开。

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人乳铁蛋白是一种药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示，请回答以下问题：

（1）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是___________，酶能起催化作用的原理是____________________________________________。

（2）据图分析筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含______________________（填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_________________________________。

（3）若 BamH I酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为___________，对于该部位，这两种酶___________（填“都不能”或“只有一种能”）切开。

（4）培养出早期胚胎后，科学家欲进行胚胎分割移植，则应该选择发育良好、形态正常的___________，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割。

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人乳铁蛋白是一种药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示，请回答以下问题：

（1）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是_________，酶能起催化作用的原理是_________________________________。

（2）据图分析筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含___________________（填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_________________________________。

（3）若 BamH I酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为___________，对于该部位，这两种酶___________（填“都不能”或“只有一种能”）切开。

（4）培养出早期胚胎后，科学家欲进行胚胎分割移植，则应该选择发育良好、形态正常的___________，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割。

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下面是质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，ampr为氨苄青霉素抗性基因，tetr为四环素抗性基因，箭头表示限制性核酸内切酶的酶切位点．若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组质粒的细胞，应选择合适的酶切位点是（　 ）

A．　　 B．　　

C．　　 D．

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