[生物——选修模块1：生物技术实践]（15分）
白僵菌具有高效的杀虫效果，现已应用于多种害虫的防治。白僵菌能溶解昆虫的表皮，并在虫体内生长繁殖，消耗虫体养分，产生各种毒素，导致害虫死亡。请回答下面的问题：
（1）从多种微生物中分离白僵菌菌种的培养基属于________培养基，其成分包括________、________、水和无机盐，此外，培养基还应满足白僵菌生长对________、________以及氧气的要求。
（2）纯化白僵菌时，常用的接种方法是稀释涂布平板法和________。稀释涂布平板法还可用于白僵菌的计数，为了保证结果准确，一般选择菌落数在________的平板进行计数，但统计的菌落数往往比活菌的实际数目。对于需要长期保存的菌种，可以采用________的方法。
（3）方离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行灭菌处理，其中接种环应采用________灭菌的方法。
高三生物选择题中等难度题
[生物——选修模块1：生物技术实践]（15分）
白僵菌具有高效的杀虫效果，现已应用于多种害虫的防治。白僵菌能溶解昆虫的表皮，并在虫体内生长繁殖，消耗虫体养分，产生各种毒素，导致害虫死亡。请回答下面的问题：
（1）从多种微生物中分离白僵菌菌种的培养基属于________培养基，其成分包括________、________、水和无机盐，此外，培养基还应满足白僵菌生长对________、________以及氧气的要求。
（2）纯化白僵菌时，常用的接种方法是稀释涂布平板法和________。稀释涂布平板法还可用于白僵菌的计数，为了保证结果准确，一般选择菌落数在________的平板进行计数，但统计的菌落数往往比活菌的实际数目。对于需要长期保存的菌种，可以采用________的方法。
（3）方离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行灭菌处理，其中接种环应采用________灭菌的方法。
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白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。请回答下面的问题：
(1) 从自然菌样中筛选较理想生产用菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→
________→性能测定。白僵菌的菌样应从________采集。
(2) 分离白僵菌菌种的培养基属于________培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于________营养物质。
(3) 白僵菌纯培养常用的接种方法是和________。
(4) 分离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行________处理，利用高温可以使微生物的________等物质发生变性。
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白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。请回答下面的问题：
（1）从自然菌样中筛选较理想生产用菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→________
________→性能测定。白僵菌的菌样应从________采集。
（2）分离白僵菌菌种的培养基属于________培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于________营养物质。
（3）白僵菌纯培养常用的接种方法是________和________。
（4）分离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行 处理，利用高温可以使微生物的________等物质发生变性。
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白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵茵分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。请回答下面的问题：
(1)从自然菌样中筛选较理想生产用菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→ ___________→性能测定。为分离鉴定白僵茵产生的各种酶，最为快捷灵敏的方法是___________。
(2)分离白僵菌菌种的培养基属于__________培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗 糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，硫酸铵、硝酸钾属于________营养物质。
(3)白僵菌纯培养常用的接种方法是__________和___________。
(4)分离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行________处理，利用高温可以使微生物的______等物质变性。
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Ⅰ.白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内的养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。
请根据上述材料回答下面的问题。
(1)从自然菌样中筛选较理想的生产用菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→______→性能测定。白僵菌的菌样应从______中采集。
(2)分离白僵菌菌种的培养基属于______培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于______(营养物质)。
Ⅱ.自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤如下：
(1)制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。
(2)用“稀释涂布平板法”接种样品。
(3)适宜温度下培养。
①为测定大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是（ ）
A．一个平板，统计的菌落数是23
B．两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24
C．三个平板，统计的菌落数分别为21、5和52，取平均值26
D．四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25
②一同学在对应稀释倍数为106的培养基中，测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL)______。
③用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量______。
④某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？______。
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白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子附着在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管，同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。请回答下面的问题：
(1)分离白僵菌菌种的培养基属于________培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于________营养物质。
(2)白僵菌纯培养常用的接种方法是______________和______________。
(3)分离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行________处理，利用高温可以使微生物的_________________等物质发生变性。
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白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子附着在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管，同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。请回答下面的问题：
（1）分离白僵菌菌种的培养基属于________培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于________营养物质。
（2）白僵菌纯培养常用的接种方法是______________和______________。
（3）分离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行________处理，利用高温可以使微生物的_________________等物质发生变性。
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白僵菌和绿僵菌是两种寄生在昆虫体内的真菌，现广泛应用于农林害虫的防治。科研人员利用基因工程术将绿僵菌的毒力蛋白相关基因M导入白僵菌细胞内，发现白僵菌杀虫能力大幅提高。请回答下列问题：
（1）利用PCR技术扩增M基因前，首先需获得绿僵菌的___________再根据___________序列设计2种特异性引物。科研人员还在2种引物上加入了不同的限制酶切位点，主要目的是便于目的基因与运载体连接及___________。在PCR反应体系中除了加入模板DNA，还需要添加__________（答出2点）。
（2）若要使M基因在受体细胞中稳定表达，需要___________，而不能将目的基因直接导入受体细胞。
（3）为检验M基因是否在白僵菌细胞内稳定存在，可提取连续培养3代的白僵菌基因组DNA，与__________进行分子杂交。若要检测M基因是否成功表达，需要提取白僵菌中的__________进行抗原抗体杂交。
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目前利用病毒杀虫制剂进行生物防治害虫尚有很大困难，主要原因是（ ）
A．施用病毒杀虫制剂易使施用者患病毒病
B．昆虫病毒不能大规模培养因而制剂昂贵
C．病毒杀虫制剂杀虫效果不如化学制剂
D．病毒杀虫制剂具生物活性易失效
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【生物——选修3：现代生物科技专题】
Bt毒蛋白基因是从苏云金芽孢杆菌中分离出来的抗虫基因，因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的基因。请回答下列有关转基因抗虫植物的问题:
（1）要从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因，可根据Bt毒蛋白基因的部分已知序列，设计特异性①_________，再利用②_________技术扩增出Bt毒蛋白基因。
（2）构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有③_________，它能把目的基因整合到受体细胞（植株细胞）的 ④_________上。这种将基因表达载体导入受体细胞的方法是⑤ _________法。
（3）要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做⑥_________ 实验；若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白，在分子水平上可利用⑦_________ 方法进行检测。
（4）目前，转基因植物的安全性问题是社会争论的热点。如有些人认为转基因植物的种植会威胁环境安全；但也有人认为转基因植物的种植减少了⑧_________ 的使用，有利于减轻污染。
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