大砀杆菌有许多菌株，野生型菌株在普通培养基中就能成活，菌株A:me-bio-thr+leu...

大砀杆菌有许多菌株，野生型菌株在普通培养基中就能成活，菌株A:me-bio-thr+leu+thi+需要在基本培养基中补充甲硫氨酸、生物素，菌株B:met+bio+thr-leu-thi—需要在基本培养基中补充苏氨酸、亮氨酸和硫胺。科学家Lederberg和Tatum曾做了如下实验，回答下列问题；

（1）如上图所示，菌株A和B混合培养几小时后，把大肠杆菌洗涤后涂布在基本培养基的固体平板上，发现长出了若干野生型菌落，对此实验现象可作出如下假设：

①不同大肠杆菌间物质发生重组。

②　　　　　　　　　　　　 。

（2）为了探究上述假设①，有人设计了一种U型管（如右图），中间用过滤器隔开，大肠杆菌不能通过，但培养液和营养物质可通过，实验如下。请补充相关实验内容：

实验步骤：

①在U型管中加入　　　　　　　　　　 ；

②U型管两端各加入菌株A、菌株B,培养几小时；

③将U型管两端的大肠杆菌各自取出洗涤后涂布在　　　　　　　　 上，观察有无菌落。

实验结果：　　　　　　　　　 。

实验结论：菌株A与菌株B之间遗传物质发生重组。

（3）现有1升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释至103倍。各取0．1mL稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为31、34、37，则每升原水样中大肠杆菌数为　　　　　　 。该数据理论上比细菌实际数目　　　　　　　　 。

（4）该实验中需要灭菌的是　　　　　　　　 。（至少写3个）

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（8分）大肠杆菌有许多菌株，菌株A：met- bio- thr+ leu+ thi+（需要在基本培养基中补充甲硫氨酸、生物素），菌株B：met+ bio+ thr- leu- thi-（需要在基本培养基中补充苏氨酸、 亮氨酸和硫胺）。科学家Lederberg和Tatum曾做了如下实验，请分析回答：

（1）菌株 A 和 B混合培养几小时，把细菌细胞洗涤后涂布在基本培养基的固体平板上，发现长出了若干野生型菌落，对此实验现象可作出三种假设：

①营养上发生了互补，即菌株 A 所需的met- bio-从菌株 B 泄漏得到，菌株 B 所需的thr- leu- thi-从菌株 A 泄漏得到。

②　　 　　　　　　　　　　　　　　 　　 ；

③　 　　　　　　　　　　　　　　 　　 ；

（2）为了证明上述假设①，有人设计了一种 U 型管（如右图），中间有过滤器隔开，细菌不能通过，但培养液和营养物质可通过，实验如下。请你补充相关实验内容：

实验步骤：①在U型管中加入　　 　　　　　　　 　　 ；

②U型管两端各加入菌株 A、菌株 B，培养几小时；　　　　　　

③将U 型管两端的细菌各自取出　 　　　　 　　 后，　　 　　 　　 ，观察其数量和存活状态。

实验结果：　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　 。

实验结论: 菌株 A 与菌株 B 不可能通过营养互补产生菌落

( 3)发现大肠杆菌野生型菌株对青霉素有抗性。某兴趣小组为探究母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对菌株生长的影响，实验设计及结果如下表。请补充组别2的相关信息。

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营养缺陷型大肠杆菌需在基本培养基中添加某些物质才能生长。 A 菌株为甲硫氨酸（met-）和生物素（bio-）缺陷型突变体，B 菌株为苏氨酸（thr-）、亮氨酸（leu-）、硫胺素（thi-）缺陷型突变体。用A、B 两种菌株进行 4组实验，培养条件和结果如下图所示。

（1）培养基为细菌生长提供水、无机盐、________。乙组培养基出现菌落的频率为 10-7， 大肠杆菌单个基因发生突变的几率约为10-7，科学家判断乙组出现菌落不是基因突变 的结果，其理由是________。推测基本培养基出现菌落是由于基因的转移和重组，丁 组实验结果说明这种基因的转移需要两种菌株细胞________。

（2）科学家用某种药物处理A 或 B 菌株使其停止分裂（但不致死）， 混合并培养，过程及 结果如下。　　

Ⅰ：处理过的 B菌株+未处理的 A菌株→基本培养基上无菌落

Ⅱ：处理过的A 菌株+未处理的 B菌株→基本培养基上有菌落

结果说明两菌株 DNA 转移的方向是________。　　　　　　

a．A→B　　 b．A←B　 c．AB　　 d．不确定

（3）进一步研究发现某些菌株拟核上有一段DNA序列（F 因子），其上有复制原点（oriT）。 细菌混合后，F 因子的一条链由供体菌逐步转移至受体菌，在受体菌中复制后整合到拟核 DNA 上，发生基因重组。留在供体菌中的 F 因子单链通过自我复制恢复双链。若无 F 因子则不能发生 DNA 转移。

①由此推测上述（2）中实验 I 基本培养基无菌落的原因是________。

②上述 DNA 转移和复制过程可用下图________表示。

（4）A 菌株（met-、bio-）对链霉素敏感，B 菌株（thr-、leu-、thi-）具有链霉素抗性。将 A、 B 菌株混合，在不同时间点搅拌混合菌液，以中断DNA 转移。之后将各时间点中断转移的菌液接种在含如下物质的基本培养基上选择培养，分别记录出现菌落的短混合时间。

①培养基中均加入链霉素的目的是________。1号培养基出现菌落的原因是________。

②在选择培养基上出现菌落所需的短混合时间反映了相关基因与oriT 间的距离。在下图中 oriT右侧画出 A 菌株 thr+ 、leu+ 、thi+基因在拟核上的位置。

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营养缺陷型大肠杆菌需在基本培养基中添加某些物质才能生长。 A菌株为甲硫氨酸（met-）和生物素（bio-）缺陷型突变体，B菌株为苏氨酸（thr-）、亮氨酸（leu-）、硫胺素（thi-）缺陷型突变体。用A、B两种菌株进行4组实验，培养条件和结果如下图所示。

（1）培养基为细菌生长提供水、无机盐、________。乙组培养基出现菌落的频率为10-7，大肠杆菌单个基因发生突变的几率约为10-7，科学家判断乙组出现菌落不是基因突变的结果，其理由是________。推测基本培养基出现菌落是由于基因的转移和重组，丁组实验结果说明这种基因的转移需要两种菌株细胞________。

（2）科学家用某种药物处理A或B菌株使其停止分裂（但不致死），混合并培养，过程及结果如下。　

I:处理过的B菌株+未处理的A菌株→基本培养基上无菌落

II: 处理过的A菌株+未处理的B菌株→基本培养基上有菌落

结果说明两菌株DNA转移的方向是________。

a．AB　　　　 b．A B　　　　　 c．A B　　　　 d．不确定

（3）进一步研究发现某些菌株拟核上有一段DNA序列（F因子），其上有复制原点（oriT）。细菌混合后，F因子的一条链由供体菌逐步转移至受体菌，在受体菌中复制后整合到拟核DNA上，发生基因重组。留在供体菌中的F因子单链通过自我复制恢复双链。若无F因子则不能发生DNA转移。

①由此推测上述（2）中实验Ι基本培养基无菌落的原因是________。

②上述DNA转移和复制过程可用下图________表示。

（4）A菌株（met-、bio-）对链霉素敏感，B菌株（thr-、leu-、thi-）具有链霉素抗性。将A、B菌株混合，在不同时间点搅拌混合菌液，以中断DNA转移。之后将各时间点中断转移的菌液接种在含如下物质的基本培养基上选择培养，分别记录出现菌落的最短混合时间。

①培养基中均加入链霉素的目的是________。1号培养基出现菌落的原因是____。

②在选择培养基上出现菌落所需的最短混合时间反映了相关基因与oriT间的距离。在下图中oriT右侧画出A菌株thr+、leu+、thi+基因在拟核上的位置____。

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野生型大肠杆菌可以在基本培养基上生长，发生基因突变产生的氨基酸依赖型菌株需要在基本培养基上补充相应氨基酸才能生长。将甲硫氨酸依赖型菌株M和苏氨酸依赖型菌株N单独接种在基本培养基上时，均不会产生菌落。某同学实验过程中发现，将M、N菌株混合培养一段时间，充分稀释后再涂布到基本培养基上，培养后出现许多由单个细菌形成的菌落，将这些菌落分别接种到基本培养基上，培养后均有菌落出现。该同学对这些菌落出现原因的分析，不合理的是（　　 ）

A.操作过程中出现杂菌污染

B.M、N菌株互为对方提供所缺失的氨基酸

C.混合培养过程中，菌株获得了对方的遗传物质

D.混合培养过程中，菌株中已突变的基因再次发生突变

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野生型大肠杆菌能够在基本培养基中生长，突变菌株A和突变菌株B由于不能自己合成某些营养素，而不能在基本培养基上生长。科学工作中利用菌株A和菌株B进行了如下两个实验。实验一：将菌株A和菌株B混合后，涂布于基本培养基上，结果如图1；实验二：将菌株A和菌株B分别置于U型管的两端，中间由过滤器隔开。加压力或吸力后，培养液可以自由流通，但细菌细胞不能通过。经几小时培养后，将菌液A、B分别涂布于基本培养基上，结果如图2。下列推测正确的是(　　)

A. 菌株之间可能发生类似有性杂交的现象　　 B. 不同菌株间接触后才可能交换遗传物质

C. 菌株A和菌株B含有相同的突变基因　　 D. 混合培养的菌株都能在基本培养基上生长

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野生型大肠杆菌能够在基本培养基中生长，突变菌株A和突变菌株B由于不能自己合成某些营养素，而不能在基本培养基上生长。科学工作者利用菌株A和菌株B进行了如下两个实验。实验一：将菌株A和菌株B混合后，涂布于基本培养基上，结果如图1；实验二：将菌株A和菌株B分别置于U型管的两端，中间由过滤器隔开。加压力或吸力后，培养液可以自由流通，但细菌细胞不能通过。经几小时培养后，将菌液A、B分别涂布于基本培养基上，结果如图2。下列推测正确的是(　　)

A.菌株之间可能发生类似有性杂交的现象 B.不同菌株间接触后才可能交换遗传物质

C.菌株A和菌株B含有相同的突变基因 D.混合培养的菌株都能在基本培养基上生长

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“水平基因转移”是指在生物个体之间所进行的遗传物质交流的现象，主要发生在微生物中。野生型大肠杆菌能够在基本培养基中生长，突变菌株A和突变菌株B由于不能自己合成某些营养素，而不能在基本培养基上生长。科学工作者利用菌株A和菌株B进行了如下两个实验。实验一：将菌株A和菌株B混合后，涂布于基本培养基上，结果如图1；实验二：将菌株A和菌株B分别置于U型管的两端，中间由过滤器隔开。加压力或吸力后，培养液可以自由流通，但细菌细胞不能通过。经几小时培养后，将菌液A、B分别涂布于基本培养基上，结果如图2。

下列推测正确的是

A.可以用“水平基因转移”来解释上述现象

B.不同菌株间接触后才可能交换遗传物质

C.混合培养的菌株都能在基本培养基上生长

D.菌株A和菌株B互为对方提供所缺营养素

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微生物诱变后的筛选环节极为繁杂，定向筛选常用来筛选营养缺陷型突变株。无氮MM培养基(基本培养基)仅能满足野生型菌株生长需要，该培养基中营养缺陷型菌株能存活但不能繁殖。CM培养基（完全培养基）可满足营养缺陷型菌株营养需要。已知青霉素能抑制细菌细胞壁的合成，并在细菌的繁殖期起杀菌作用。据图回答下列相关问题：

（1）据培养结果推测：1培养皿中是__________培养基，2培养皿中是_____________培养基。

（2）MM培养基浓缩缺陷型后需洗涤和稀释，才能涂平板进行母皿CM培养，假设只进行101，102和103三级梯度稀释，简述从102倍稀释获得103倍稀释的操作步骤：___________________________。

（3）MM培养基加靑霉素后培养能浓缩缺陷型的原因是______________________________。

（4）无氮MM培养基培养2小时的目的是__________________________________________。

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微生物诱变后的筛选环节极为繁杂，定向筛选常用来筛选营养缺陷型突变株。无氮MM培养基(基本培养基)仅能满足野生型菌株生长需要，该培养基中营养缺陷型菌株能存活但不能繁殖。CM培养基（完全培养基）可满足营养缺陷型菌株营养需要。已知青霉素能抑制细菌细胞壁的合成，并在细菌的繁殖期起杀菌作用。据图回答下列相关问题：

（1）据培养结果推测：1培养皿中是__________培养基，2培养皿中是_____________培养基。

（2）MM培养基浓缩缺陷型后需洗涤和稀释，才能涂平板进行母皿CM培养，假设只进行101，102和103三级梯度稀释，简述从102倍稀释获得103倍稀释的操作步骤：___________________________。

（3）MM培养基加靑霉素后培养能浓缩缺陷型的原因是______________________________。

（4）无氮MM培养基培养2小时的目的是__________________________________________。

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