[生物——选修1:生物技术实践]牛的瘤胃中含有多种厌氧细菌，下列过程是从瘤胃中分离产脲酶细...

[生物——选修1:生物技术实践]

牛的瘤胃中含有多种厌氧细菌，下列过程是从瘤胃中分离产脲酶细菌的流程图，回答有关问题。

（1）图中②选择培养的目的是_____________。为保证该细菌能正常生长繁殖,必须放在________环境条件下培养。

（2）④鉴别培养基还需添加___________作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后,其菌落周围的指示剂将变成__________色,简述其原因_____________________________。

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反刍动物，如牛和山羊，具有特殊的器官——瘤胃，在瘤胃中含有多种微生物，其中许多微生物能以尿素作唯一氮源。以下示意图是从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物流程。

（1）进行①过程的目的是　　　　　　 ；②过程所使用的接种方法是　　　　 。用该接种方法对微生物进行计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，原因是　　　　　　 。

（2）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于　　　　　 培养基，制备该培养基的步骤是：计算→　　 →灭菌→倒平板。由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡，因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外，还要提供　　　　　 的条件。

（3）酶对化学反应的催化效率称为酶活性，图示的酶活性的高低可用　　　　 中　　 的减少量来表示。

（4）萃取胡萝卜素的过程应避免明火加热，采用水浴加热的原因是____。

（5）如果要对具有优良性状的植物进行大规模种植可采用　　　　　　 方法，在对外植体进行接种前，需要进行制备MS固体培养基和　　　　 两项工作。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值　　 （填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。

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[生物——选修1:生物技术实践]请回答与“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的有关问题。

(1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、________、________和无机盐。

(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是_____和___________两种。在接种过程中,接种针或涂布器的灭菌方法是_______。

(3)可以通过____________来判断细菌是否分解尿素。土壤中的细菌之所以能够分解尿素,是因为它们能合成____。

(4)对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养,则土壤细菌的增长呈现___型曲线增长。

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[生物——选修1:生物技术与实践]

科研人员拟从牛瘤胃中分离出纤维素分解菌，选用的培养基如下表，请回答下列问题:

（1）用培养基A进行选择培养的目的主要是增加____________，以确保分离到所需的微生物。

（2）用培养基B对纤维素分解菌进行初步鉴别，一般需在培养基中加入____________，使培养基在常规培养条件下呈现固态，鉴别时，还需加入____________染液。若要选取其中纤维素分解能力最强的微生物进行纯化，通常可选择____________，并用____________法将聚集的菌落逐步稀释分散到培养基表面。

（3）实验中，一般需设置对照，同时要检测培养基是否合格，若对照培养基上____________，则说明培养基制备成功。

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牛等反刍动物，具有特殊的器官——瘤胃，在瘤胃中生活着多种厌氧微生物，其中许多微生物以纤维作为碳源。某同学成功地从瘤胃中分离出能够分解纤维素的细菌，其实验流程如下，取样稀释→取稀释液接种至固体培养基培养→初步筛选出目的菌菌落→进一步纯化。请回答下列问题：

（1）富集培养基的成分为5g纤维素粉、1gNaNO3、1.2gNa2HPO4·7H2O、0.9gKH2PO4、0.5gMgSO4·7H2O、0.5gKCL、0.5g酵母膏、0.5g水解酪素，用蒸馏水定容到1000mL，按用途划分应属于　　　　　 培养基。若要确定该培养基的作用，对照试验的培养基应　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（2）鉴定纤维素分解菌的方法是　　　　　　 ，原理为　　　　　　　　　　　　　　 ，接种的方法是　　　　　　 。

（3）为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产　　　　　　　 的实验，其测定的方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的　　　　　　　　 进行定量的测定，一般认为纤维素酶至少包括C1酶、C2酶　　　　　　 三种组分。

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【生物—生物技术实践】

尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请分析回答：

（1）右图是利用________法进行微生物接种，把聚焦的菌种逐步________分散到培养基的表面。

（2）如果要对培养的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行________。

（3）下表是一种培养基配方

①配制培养基的操作步骤（      ）

a.调节pH          b．计算     c.溶化     d.称量         e.灭菌

A．a→b→c→d→e               B.e→b→d→c→a

C.b→d→c→a→e                D.b→d→c→e→a

②该培养基属于培养基（多选）。

A．液体       B．固体        C．鉴定       D．选择     E.天然

③使用该培养基的目的是________。

④在培养基中加入________指示剂，可初步鉴定出该种细菌能分解尿素。

（4）在进行分离分解尿素细菌的实验中，A同学从培养基筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有________。（多选）

A．由于土样不同     B．由于培养基污染     C．由于操作失误      D．没有设置对照

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[选修1:生物技术实践]

硝基苯酚是工业污水中重要污染物，某同学欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌。请回答下列有关问题：

（1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配置培养基时应选择_______(硝基苯酚，硝基苯酚+牛肉膏，硝基苯酚十葡萄糖）作为碳源，不采用其他两组的原因是________。

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是__________________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的可能原因是________________（答一点即可）。

（3）进行梯度稀释时的一般操作是将1mL菌液移入盛有____mL的无菌水中；常用_______法进行活菌计数，其原理是_____________________，但统计的菌落数往往___________（填“多于”或“少于”)稀释液中的活菌数，原因是__________________________。

（4）实验数据显示，当培养基中加入碳源葡萄糖时，该细菌降解速率明显提高，原因可能是__________________________________________。

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[生物—选修1：生物技术实践]

如图是从土壤中筛选细菌的过程。请回答下列问题：

（1）土壤中存在能分解尿素的细菌，这些细菌之所以能将尿素分解，是因为能合成_________。因此，图中选择培养基应以_________为唯一氮源。鉴别培养基还需添加______________作指示剂。

（2）若要从土壤中分离大肠杆菌，培养基中应加入牛肉膏、蛋白胨、NaCl、水和琼脂，其中作为碳源的是_____________；鉴别培养基中也需添加某些特定物质，根据培养基菌落的颜色变化来判断是否分离得到大肠杆菌，请简述鉴别大肠杆菌的方法：_________________。

（3）土霉素是一种可以治疗人类感染性疾病的抗生素类药物，可从土壤中放线菌的发酵产物中提取，但土壤中放线菌数目较少，可在逐级稀释前使用________（从培养基的物理状态和功能分析）培养基进行选择培养，以增加目的菌的数目。分析可知，土霉素易溶于有机溶剂，且是___________（填“挥发性”或“非挥发性”）物质，故可使用萃取法从放线菌中提取。萃取得到的样品可用纸层析法进行鉴定，用显色剂显色后结果如下图所示，点样时，A、D点是__________。

　　　 图2

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A．[选修1——生物技术实践]

果酒是用水果的糖分被酵母菌发酵而成的低浓度饮料酒，含有多种对人体有益的物质。如图是用新鲜苹果榨取果汁并制作果酒的流程图，分析并回答问题。

（1）对榨汁机等玻璃器皿通常用70%的酒精擦拭，目的是进行____________（天“消毒”或“灭菌”）。

（2）培养酵母菌的培养基中含有的营养物质包括水、碳源、__________、__________等。

（3）若要统计样品中酵母菌的数目，则常采用__________来接种，统计到平板上的菌落数往往比活菌的实际数目____________________。

B．[选修3——现代生物科技专题]

鼠源单克隆抗体用于疾病的治疗时。易发生不良反应，科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接。实现了对鼠源单克隆抗体的改造，生产出对人体不良反应小、效果更好的单克隆抗体。请回答：

（1）鼠源单克隆抗体是将经过免疫的小鼠__________细胞与骨髓瘤细胞融合，然后筛选出___________的杂交瘤细胞，并通过体内或体外培养生产的抗体。

（2）动物细胞融合常用___________诱导，细胞融合体现了细胞膜的___________。在体外培养杂交瘤细胞时，培养液中通常加入___________等天然成分，将其置于95％空气加5％CO2的气体环境中，CO2的作用是_________________。

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[生物——选修1：生物技术实践专题]（15分）

下面是某同学制作果酒和果醋的实验流程图以及预分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方，请回答有关问题。

（1）图1中方框内应该填写的的实验步骤是　　　　　　 ，此步骤中起主要作用的微生物是　　　　 ，其发

酵时　　　 （需要／不需要）氧气，适宜的发酵温度范围是　　　 。　

（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？　　　　　　 (能/不能)，原因

是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）如果想进一步对初步筛选得到的菌株进行纯化并计数，可采用的接种方法是　　 。通常鉴定分

解尿素的细菌的方法是在培养基中加入　　　　 指示剂。

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