已知图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，且限制酶的切点是唯一的，外源DNA插入会导致相应的基因失活。请回答有关基因工程操作的问题：
(1)图1表示的是一个经过____的作为载体的质粒。作为基因表达载体除图1所示结构外，还需具有____。
(2)根据图中所给信息，构建基因表达载体时，应选用的限制酶是____。若将基因表达载体导人大肠杆菌，一般先用钙离子处理，使其成为感受态细胞，以利于____，然后调控温度完成转化过程。
(3)为了筛选出含目的基因的大肠杆菌，应在培养基中添加____；培养一段时间后，平板上长出菌落。用PCR技术鉴定时，所用的引物是图2中____。PCR技术扩增目的基因，每一循环包括变性、____、____三步。
高二生物综合题困难题
已知图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，且限制酶的切点是唯一的，外源DNA插入会导致相应的基因失活。请回答有关基因工程操作的问题：
(1)图1表示的是一个经过____的作为载体的质粒。作为基因表达载体除图1所示结构外，还需具有____。
(2)根据图中所给信息，构建基因表达载体时，应选用的限制酶是____。若将基因表达载体导人大肠杆菌，一般先用钙离子处理，使其成为感受态细胞，以利于____，然后调控温度完成转化过程。
(3)为了筛选出含目的基因的大肠杆菌，应在培养基中添加____；培养一段时间后，平板上长出菌落。用PCR技术鉴定时，所用的引物是图2中____。PCR技术扩增目的基因，每一循环包括变性、____、____三步。
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下列有关基因工程的叙述，错误的是
A. 基因载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外源 DNA 插入
B. 在同一 DNA 分子中，限制酶的识别序列越长，酶切点出现的概率越大
C. 以大肠杆菌为受体细胞时，先要用 Ca2+处理细胞以使其处于感受态
D. 基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离，实现生物的定向变异
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下列有关基因工程的相关叙述，错误的是（ ）
A.获取目的基因是基因工程的核心
B.基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离
C.基因载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外源DNA插入
D.以大肠杆菌为受体细胞时，先要用Ca2＋处理细胞以使其处于感受态
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请回答下列有关基因工程的问题。下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点。图是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。
（1）从转基因香蕉培育图中反映了质粒作为运载体的特点是_______________答出其中两点即可），基因工程中还可以用_____________作为运载体。
（2）图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是_____________。
（3）下图是用___________ (限制）酶进行切割得到的目的基因。可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化。
（4）人体细胞内含有抑制癌症发生的某基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。该基因含有800对碱基对(bp)，用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp,．用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，50bp,200bp．而患者体内获取的这段基因，用BamHⅠ切割得到的区段变为400bp，400bp ，用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，250bp．在正常人体内BamHⅠ和EcoRⅠ识别序列分别有 _______个和_______个，患者体内发生了 ________________。
高二生物非选择题困难题查看答案及解析
下列有关基因工程的叙述，错误的是（ ）
A.基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离
B.限制性核酸内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列
C.基因载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外源DNA插入
D.由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后不可直接应用
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如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图，据图回答下列问题：
（1）a所在的区域叫做__________。质粒 DNA分子上有__________ 个限制酶切割位点，供外源 DNA 片段（基因）插入其中。
（2）携带外源 DNA 片段的质粒进入细胞后，停留在细胞中进行__________或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行________。
（3）质粒DNA分子上有特殊的标记基因，其作用是__________。
（4）在基因工程中使用的载体除质粒外，还有__________。（写出2个即可）
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以下有关DNA重组技术的基本工具的说法中，正确的是（ ）
A. 一种限制酶只能识别某种特定的核苷酸序列
B. 质粒是基因工程中唯一的载体
C. 载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接
D. DNA连接酶使黏性末端的碱基之间形成氢键
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以下有关DNA重组技术基本工具的说法中，正确的是（ ）
A．一种限制酶只能识别某种特定的核苷酸序列
B．质粒是基因工程中唯一的载体
C．载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接
D．DNA连接酶使黏性末端的碱基之间形成氢键
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以下有关DNA重组技术的基本工具的说法中，正确的是（ ）
A．一种限制酶只能识别某种特定的核苷酸序列
B．质粒是基因工程中唯一的载体
C．载体必须具备的条件之
一是具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接
D．DNA连接酶使黏性末端的碱基之间形成氢键
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甲、注意，此题仅3、4、5、6、7、8班做
大肠杆菌pUC18质粒是基因工程中常用的运载体。某限制酶在此质粒上的唯一酶切位点位于LacZ基因中，如果没有插入外源基因，LacZ基因便可表达出β半乳糖苷酶。当培养基中含有IPTG和Xgal时，Xgal便会被β半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。下图表示利用此质粒实施基因工程的主要流程。请分析并回答问题。
(1)对已获得的目的基因可利用________技术进行扩增。
(2)目的基因插入质粒构建重组质粒的过程中，需要DNA连接酶恢复________键。
(3)将试管Ⅰ中的物质和大肠杆菌共同置于试管Ⅱ的目的是________；大肠杆菌需事先用Ca2＋进行处理，目的是________________。
(4)将试管Ⅱ中的菌液接种于选择培养基上，培养基中加入氨苄青霉素的作用是筛选出________。
(5)若观察到培养基上出现________色菌落，则说明大肠杆菌中已成功导入了重组质粒。如果作为受体细胞的大肠杆菌也含有LacZ基因，则不利于重组质粒的筛选，原因是________________
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