有关限制性内切酶Hind Ⅲ和Xho I的识别序列及切割位点分别为A↓AGCTT和C↓TCGAG,相关叙述正确的是
A. 两种限制酶的识别序列在DNA分子中出现的概率不同
B. 两种限制酶切割形成的粘性末端都是-AGCT
C. 分别用这两种酶切割目的基因和质粒后能形成重组质粒
D. 实验中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果
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有关限制性内切酶Hind Ⅲ和Xho I的识别序列及切割位点分别为A↓AGCTT和C↓TCGAG,相关叙述正确的是( )
A.两种限制酶的识别序列在DNA分子中出现的概率不同
B.两种限制酶切割形成的粘性末端都是-AGCT
C.分别用这两种酶切割目的基因和质粒后能形成重组质粒
D.实验中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果
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有关限制性内切酶Hind Ⅲ和Xho I的识别序列及切割位点分别为A↓AGCTT和C↓TCGAG,相关叙述正确的是
A. 两种限制酶的识别序列在DNA分子中出现的概率不同
B. 两种限制酶切割形成的粘性末端都是-AGCT
C. 分别用这两种酶切割目的基因和质粒后能形成重组质粒
D. 实验中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果
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有关限制性内切酶Hind Ⅲ和Xho I的识别序列及切割位点分别为A↓AGCTT和C↓TCGAG,相关叙述正确的是
A.两种限制酶的识别序列在DNA分子中出现的概率不同
B.两种限制酶切割形成的粘性末端都是-AGCT
C.分别用这两种酶切割目的基因和质粒后能形成重组质粒
D.实验中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
限制酶 | BamH | Bcl | Sau3A | HindⅢ |
识别序列及切割位点 | G↓GATCC CCTAG↑G | T↓GATCA ACTAG↑T | ↓GATC CTAG↑ | A↓AGCTT TTCGA↑A |
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用________和______两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于________态的大肠杆菌。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加________,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中________。
(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为_______,对于该部位,这两种酶_______(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。
(4)若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得________种大小不同的DNA片段。
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(16分)下表中列出了几种限制酶识别序列及其割位点,图一、图二中箭头表示相关限制酶的位点。请回答下列问题:
限制酶 | BamH I | Hind Ⅲ | EcoR I | Sma I |
识别序列及切割位点 | ↓ GGATCC CCTAGG ↑ | ↓ AAGCTT TTCGAA ↑ | ↓ GAATTC CTTAAG ↑ | ↓ CCCGGG GGGCCC ↑ |
(1) 一个图一所示的质粒分子经Sma I切割前后,分别含有___________个游离的磷酸基团。
(2) 若对图一中质粒进行改造,插入Sma I 酶切位点越多,质粒的稳定性越_____________。
(3) 用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma I切割,原因是____________。
(4) 与只是用EcoR I 相比较,使用BamH I和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________。
(5) 为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入_______________。
(6) 重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_____________。
(7) 为了从cDNA 文库中分离获取蔗糖转基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖的能力的大肠杆菌突变体,然后在________________的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
(8)若将某一目的基因转入某一植物的核基因组中,确定该目的基因是否已整合到某一染色体上,方法之一是测定该染色体的___________________。
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图中甲、乙中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的不再重复标注。请回答下列问题。
限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
识别序 列及切割 位点 | G↓GATCC CCTAG↑G | T↓GATCA ACTAG↑T | ↓GATC CTAG↑ | A↓AGCTT TTCGA↑A |
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用限制酶为______,酶切后的载体和目的基因片段通过________酶作用后,获得重组质粒。
(2)若BclⅠ酶切的DNA末端与HindⅢ酶切的DNA末端可直接被DNA连接酶连接,原因是_______,这两种酶_____________(填“都能” “都不能”或“只有一种能”)切开连接的部位,原因是________________________。
(3)若用Sau3AⅠ切割图甲质粒最多可能获得______种大小不同的DNA片段。
(4)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加________平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图乙中的____________________________________。
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
识别序 列及切 割位点 |
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用________两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于________态的大肠杆菌。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加________,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中______________。
(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为_______,对于该部位,这两种酶________(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。
(4)若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得________种大小不同的DNA片段。
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
识别序 列及切 割位点 |
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用________两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于________态的大肠杆菌。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加________,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中______________。
(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为_______,对于该部位,这两种酶________(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。
(4)若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得________种大小不同的DNA片段。
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
识别序 列及切 割位点 |
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用________两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于________态的大肠杆菌。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加________,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中______________。
(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为_______,对于该部位,这两种酶________(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。
(4)若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得________种大小不同的DNA片段。
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
识别序 列及切 割位点 |
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用________两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于________态的大肠杆菌。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加________,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中______________。
(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为_______,对于该部位,这两种酶________(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。
(4)若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得________种大小不同的DNA片段。
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