β-珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分,采用具有四环素抗性基因的质粒作为运载体,能使大肠杆菌生产出人的β一珠蛋白。下列叙述正确的是( )
A.可从人的成熟的红细胞中提取DNA,直接分离目的基因
B.用限制性内切酶和DNA聚合酶处理获得重组质粒
C.用CaCl2处理大肠杆菌,有利于重组质粒导人大肠杆菌
D.可根据受体细胞是否具有四环素抗性来检测目的基因是否表达
高三生物选择题简单题
β-珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分,采用具有四环素抗性基因的质粒作为运载体,能使大肠杆菌生产出人的β一珠蛋白。下列叙述正确的是( )
A.可从人的成熟的红细胞中提取DNA,直接分离目的基因
B.用限制性内切酶和DNA聚合酶处理获得重组质粒
C.用CaCl2处理大肠杆菌,有利于重组质粒导人大肠杆菌
D.可根据受体细胞是否具有四环素抗性来检测目的基因是否表达
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大肠杆菌是生活在人和动物大肠、小肠内一般对机体无害的原核生物,某些大肠杆菌中的质粒因含有四环素抗性基因,而被广泛用于基因工程。某研究小组为获得含有四环素抗性基因的质粒,以动物粪便为材料来筛选、纯化相应大肠杆菌。请回答下列有关问题:
(1)培养大肠杆菌可采用牛肉膏蛋白胨培养基(培养基组分:牛肉膏、蛋白陈、NaCl、水),该培养基中可为大肠杆菌提供氮源的物质是____________;此外,培养基灭菌前还需将pH调至____________。
(2)已知不同微生物形成的菌落各具特点,要获得目的菌种,需先将大肠杆菌从动物粪便的众多微生物中筛选出来,为此需要在上述培养基中加入琼脂和____________成分,筛选的依据是____________。
(3)将初步筛选获得的大肠杆菌菌落继续接种到含____________的固体培养基上进一步筛选,理论上能够存活的菌落即为目的菌种;为获得大量目的菌种,可将其接种到含该种成分的___________(填“固体”或“液体”)培养基中。
(4)该研究小组用稀释涂布平板法测定了大肠杆菌的数量,在不同稀释倍数下每隔24h分别统计,结果如下表:
稀释度(倍) 培养时间(h) | 24 | 48 | 72 | 96 |
104 | 156 | 268 | 332 | 332 |
105 | 18 | 26 | 39 | 39 |
分析表格数据可知,计数的适宜时间和稀释度分别是___________,原因是___________。
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利用含抗四环素基因的质粒将大肠杆菌改造成工程菌,生产鼠的β-珠蛋白,相关操作不合理的是( )
A.利用反转录技术获得β-珠蛋白基因
B.用含抗四环素基因的质粒构建基因表达载体
C.用CaCl2处理有四环素抗性的大肠杆菌使细胞壁通透性增大
D.用含有四环素的培养基筛选出导入重组质粒的工程菌
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图一是利用基因工程生产人胰岛素的主要流程图,图二是生产过程中所制备的带有目的基因的供体DNA分子及运载体(质粒)的示意图。箭头所指为相应限制酶的识别位点,Tetr表示四环素抗性基因,Tetr上游有基因C,基因C的表达产物会阻断Tetr基因的表达。请回答下列问题:
(1)图一中的供体细胞是______________。
(2)第②步中需要的酶是_______,第④步常用_____________来处理细菌。(3)若图一所示过程中以 Tetr为标记基因,则第③步中应选用限制酶____________________对供体DNA和质粒进行切割;为检测转化结果,将经第④步处理后的大肠杆菌培养液接种在含有_____________的培养基上,长出的菌落就是导入重组质粒的菌落。
(4)检测目的基因能否在大肠杆菌细胞中表达,常用的方法为______________________。
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下列一般不作为基因工程中的标记基因的是( )
A.四环素抗性基因
B.绿色荧光蛋白基因
C.产物具有颜色反应的基因
D.贮藏蛋白的基因
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下列一般不作为基因工程中的标记基因的是( )
A.四环素抗性基因
B.绿色荧光蛋白基因
C.产物具有颜色反应的基因
D.贮藏蛋白的基因
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下列一般不作为基因工程中的标记基因的是( )
A.四环素抗性基因
B.绿色荧光蛋白基因
C.产物具有颜色反应的基因
D.贮藏蛋白的基因
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下列一般不作为基因工程中的标记基因的是( )
A.四环素抗性基因
B.绿色荧光蛋白基因
C.产物具有颜色反应的基因
D.贮藏蛋白的基因
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下列一般不作为基因工程中的标记基因的是
A.四环素抗性基因
B.绿色荧光蛋白基因
C.产物具有颜色反应的基因
D.贮藏蛋白的基因
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【选修3:现代生物科技专题】
人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程,图中Tetr表示四环素抗性基因,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示,请回答以下问题:
限制酶 | BamHⅠ | Hae Ⅲ | BclⅠ | Sau3AⅠ | NotⅠ |
识别序列 及切割位点 |
(1)①过程常采用的方法是_____________________________。
(2)构建基因表达载体时,需要将人乳铁蛋白基因嵌入到启动子和__________________ 之间,这样人乳铁蛋白基因就能在乳腺细胞中表达。
(3)要将人乳铁蛋白基因插入质粒,若只允许使用一种限制酶,应选择的限制酶是___________。
(4)据图分析,筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含________________ (填“四环素”或“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”)的培养基上进行,原因是_____________。
(5)若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接起来,连接部位的6个碱基对序列为__________________________,对于该部位,这两种酶_____________________(“都不能”或“只有一种能”)切开。
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