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【生物——选修丨生物技术实践】（15分）
请回答下列生物技术方面的问题：
(I )筛选产耐高温淀粉酶的微生物应选择以 为唯一碳源的培养基，并在 条件下培养；筛选纤维素分解菌的方法是 ，产生纤维素酶的菌落周闱会出现透明圈。
(2)玫瑰油是香料工业中的“液体黄金”，其化学性质稳定，易溶于 ,能随水蒸气一同蒸馏，一般采用水蒸气蒸馏法提取；橘皮精油的提取则常采用压榨法，提取之前需用 浸泡，以提高出油率；提取胡萝卜素常用萃取法，萃取之前笛对胡萝卜进行粉碎和干燥，干燥时要注意控制 ，否则会导致胡萝素分解。
(3 )利用月季的花药离体培养产生单倍体时，选材非常重要，一般来说，在 期花药培养的成功率较高。为了选择该期的花药，通常选择 的花
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请回答下列生物技术方面的问题:
（1）筛选产耐高温淀粉酶的微生物应选择以____为唯一碳源的培养基,并在________条件下培养;筛选纤维素分解菌的方法是____________,产生纤维素酶的菌落周围会出现透明圈。
（2）玫瑰精油是香料工业中的“液体黄金”,其化学性质稳定,易溶于________,能随水蒸气一同蒸馏,一般采用水蒸气蒸馏法提取;橘皮精油的提取则常采用压榨法,提取之前需用______浸泡,以提高出油率;提取胡萝卜素常用萃取法,萃取之前要对胡萝卜进行粉碎和干燥,干燥时要注意控制________,否则会导致胡萝卜素分解。
（3）利用月季的花药离体培养产生单倍体时,选材非常重要,一般来说,在________期花药培养的成功率较高。为了选择该期的花药,通常选择______的花。
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请回答下列生物技术方面的问题.
(1)筛选产耐高温淀粉酶的微生物应选择以淀粉为唯一________的培养基，并在_________条件下培养.筛选纤维素分解菌的方法是________________，产生纤维素酶的菌落周围会出现____________.
(2)玫瑰油是香料工业中的“液体黄金”，其化学性质稳定，难溶于_____，易溶于____________，能随水蒸气一同蒸馏，一般采用水蒸气蒸馏法提取；橘皮精油的提取则常采用压榨法，提取之前需用____________浸泡，以提高出油率；提取胡萝卜素常用萃取法，萃取之前需对胡萝卜进行粉碎和干燥，干燥时要注意控制________，否则会导致胡萝素分解.
(3)利用月季的花药离体培养产生单倍体时，选材非常重要，一般来说，在___________期花药培养的成功率最高.为了选择该期的花药，通常选择________________的花蕾.
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淀粉酶是用途最广、产量最大的酶制剂之一，广泛用于印染、酿造和医药行业。请回答：
(1)配制筛选能分泌淀粉酶的微生物的培养基时，应以___________ 为唯一碳源。获得的菌种长期保存的方法是____________。
(2)从面粉加工厂附近的土壤中，取5g土壤倒入装有45mL蒸馏水并带有玻璃珠的锥形瓶中振荡，制成土壤悬液。将土壤悬液稀释104倍后，用____________法分别将0.1mL的菌液接种到3个平板上，培养一段时间，3个平板中的菌落数分别为53个、60个、73个，则土壤悬液中分泌淀粉酶的微生物有______个／mL。将接种后的平板置于恒温培养箱中__________（填“正置”或“倒置”）培养。
(3)在培养基中加入碘化钾后，出现透明圈的菌落能分泌淀粉酶，原理是___________。一般情况下，透明圈直径(D)和菌落直径(d)的比值(D/d)反映了淀粉酶的活性，它们的关系是______________________________。
(4)筛选获得的微生物，经鉴定是芽孢杆菌，芽孢杆菌除产生活性较强的淀粉酶外，还产生活性较强的蛋白酶和脂肪酶，因此，在动物饲料中添加芽孢杆菌或其代谢产物可提高动物______的效率。
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回答有关微生物的培养与应用问题：
（l）微生物的培养需要使用培养基，不同培养基的配方不同，但一般都含有____、碳源、氮源；在配制从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基时，需加入____作为唯一的碳源，该培养基属于____培养基；若将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是____，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生____来筛选纤维素分解菌。
（2）若要统计土壤样品中纤维素分解菌的数目，宜采用_______法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的______就能大约推测出样品中的活菌数。
（3）一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23．4，则每毫升样品中的活菌数是（所用稀释液的体积为0．2mL）________。
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餐饮行业会产生大量的废弃油脂，去除废弃油脂能有效的降低环境污染。实验小组通过培养基筛选出能够分解废弃油脂的微生物。请回答下列问题：
（1）实验室用于筛选废弃油脂分解菌的培养基应当以＿＿＿＿作为唯一碳源；培养基中除添加必需的营养物质外，还需要加入琼脂，因此该培养基从物理性质上划分属于＿＿＿＿＿培养基。在微生物的培养过程中常常要采取无菌技术，其中接种室、接种箱和超净工作台在使用前应当用＿＿＿＿＿＿进行消毒。
（2）脂肪的鉴定一般选用＿＿＿＿＿＿试剂，其原理是该试剂能够使脂肪显＿＿＿＿＿＿＿。
（3）实验室发生不同温度下油脂分解菌对废弃油脂的分解率不同，该小组在不同温度下测定油脂的去除率，得到下表所示的数据：
①据图可知，酶的活性受温度的影响，若要进一步探究油脂分解酶的最适温度，需要在＿＿＿＿＿＿＿的温度范围内，设置一系列等温度梯度的实验组继续进行实验。
②油脂分解酶对废弃油脂的分解具有高效性。与无机催化剂相比，酶具有高效性的原因是＿＿＿＿＿＿＿。
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乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，在工业生产中具有重要价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如图。回答下列问题：
（1）筛选产乳糖酶的微生物L时，培养基中的唯一碳源应该是_______，在实验室培养微生物L时，一方面需要为微生物L提供合适的营养和环境条件，另一方面需要_______，以获得纯净的培养物。
（2）为了得到产乳糖酶微生物L的单菌落，可用_______法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。对于需要长期保存的菌种，可以采用_______的方法。
（3）将微生物L研磨破碎得到提取液后，可采用凝胶色谱法分离纯化其中的乳糖酶，分离过程中，比乳糖酶相对分子质量小的蛋白质，在凝胶中的移动速度比乳糖酶慢，原因是_______。
（4）工业生产中若要将乳糖酶固定化，部分操作如下：将乳糖酶固定在_______填“溶于水”或“不溶于水”）的载体上，将其装入反应柱内后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的乳糖酶。一般来说，酶不适合采用_______法固定化。
（5）酒精发酵过程应采用固定化细胞（固定化酵母）技术而不是固定化酶技术，原因是________。
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某生物兴趣小组按下图所示过程从土壤中筛选能降解纤维素的细菌。回答下列问题:
（1）步骤②是___________。为了筛选目的菌，步骤③的培养基中加入的唯一碳源为___________，这种培养基属于___________（填“鉴别”或“选择”）培养基。
（2）上述接种等操作都应在酒精灯火焰附近进行的原因是___________。一般在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，原因是______________________。
（3）将接种后的培养基和作为对照的______________同时放入恒温培养箱中培养，为了对初步筛选出来的菌种作进一步的鉴定，可在培养基中加入_________________。选取鉴定出的具有较大透明圈的菌种可接种到___________培养基上临时保藏。
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乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖在工业生产中具有重要价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下图。回答下列问题：
(1)筛选产乳糖酶的微生物L时,培养基中的唯一碳源应该是_____，在实验室培养微生物L时,一方面需要为L提供合适的营养和环境条件,另一方面需要_______,以获得纯净的培养物。
(2)将微生物L研磨破碎得到提取液后,可采用凝胶色谱法分离纯化其中的乳糖酶分离过程中,比乳糖酶相对分子质量小的蛋白质,在凝胶中的移动速度比乳糖酶_____(填“快”或“慢”),原因是______________。
(3)工业生产中,若要将乳糖酶固定化,一般____(填“适宜”或“不适宜”)采用包埋法原因是________,与使用游离酶相比,工业生产中使用固定化酶的优点是________。
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乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖在工业生产中具有重要价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如图。回答下列问题：
（1）筛选产乳糖酶的微生物L时，培养基中的唯一碳源应该是______，在实验室培养微生物L时，一方面需要为L提供合适的营养和环境条件，另一方面需要______，以获得纯净的培养物。
（2）将微生物L研磨破碎得到提取液后，可采用凝胶色谱法分离纯化其中的乳糖酶分离过程中，比乳糖酶相对分子质量小的蛋白质，在凝胶中的移动速度比乳糖酶______（填“快”或“慢”），原因是______。
（3）工业生产中，若要将乳糖酶固定化，一般______（填“适宜”或“不适宜”）采用包埋法原因是______，与使用游离酶相比，工业生产中使用固定化酶的优点是______。
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