土壤中的细菌数量多、分布广，人类能根据需要从土壤中分离提纯各种细菌，因此可以从土壤的枯枝败...

土壤中的细菌数量多、分布广，人类能根据需要从土壤中分离提纯各种细菌，因此可以从土壤的枯枝败叶层分离出纤维素分解菌。回答下列问题：

（1）培养细菌的培养基除了含有碳源外，还必须含有的基本成分是_____________。

（2）为避免培养皿污染，需将倒平板后的培养皿呈________状态放置。为了排除培养基被污染，需设置接种等量_________的培养基作为空白对照。

（3）若要鉴别所分离的细菌是否为纤维素分解菌，则应该在培养基中加入________，观察培养基中是否出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可以鉴定是否筛选出纤维素分解菌。

（4）为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行_________处理。为了测定培养液中的菌体数量，一般采用__________法将一定量的菌液接种到固体培养基上，统计菌落的数量来代表菌体数，这种检测方法测得的结果一般偏小，原因是________________。

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土壤中的细菌数量多、分布广，人类能根据需要从土壤中分离提纯各种细菌，因此可以从土壤的枯枝败叶层分离出纤维素分解菌。回答下列问题：

（1）培养细菌的培养基除了含有碳源外，还必须含有的基本成分是_____________。

（2）为避免培养皿污染，需将倒平板后的培养皿呈________状态放置。为了排除培养基被污染，需设置接种等量_________的培养基作为空白对照。

（3）若要鉴别所分离的细菌是否为纤维素分解菌，则应该在培养基中加入________，观察培养基中是否出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可以鉴定是否筛选出纤维素分解菌。

（4）为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行_________处理。为了测定培养液中的菌体数量，一般采用__________法将一定量的菌液接种到固体培养基上，统计菌落的数量来代表菌体数，这种检测方法测得的结果一般偏小，原因是________________。

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某生物活动小组为测定当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了随机取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作如下：

请分析并回答下列问题：

（1）为了筛选和分离尿素分解菌，培养基中需要添加____________作为唯一氮源，除了必需的营养物质外，培养基中还需要添加____________。尿素分解菌能产生脲酶，把尿素分解成____________。

（2）在上述系列梯度稀释时，吸取前一试管（或锥形瓶）中lmL菌液到后一试管的工具是____________，该工具在使用前需要进行____________灭菌。

（3）实验结果：3号试管涂布的三个平板的菌落数为560、601、24，4号试管涂布的三个平板的菌落数为57、59、61，5号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28。该10克土壤样品中含有尿素分解菌的估算数目是____________。通过该方法计算出来的数值往往比实际值低，原因是____________。在进行实验时，除了涂布的三个平板外，还需要至少准备一个空白培养培养基做对照，目的是____________。

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自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。

（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用_______________________的培养基进行分离，这种培养基属于______培养基（按功能分类）。可在培养基中加入_________指示剂对该类微生物鉴别。

（2）若取土样6g，应加入_______mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101～107不同浓度的土壤溶液。将103～107倍的稀释液分别吸取0.2mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为_______________。将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计菌落数，结果如下表，其中_______倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为__________ 。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目_______（低/高）。

（3）若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_______________________。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格（体积为0.1mm3）有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为102 ，那么原菌液的菌群密度为________个/mL。

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自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。

（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用_______________________的培养基进行分离，这种培养基属于______培养基（按功能分类）。可在培养基中加入_________指示剂对该类微生物鉴别。

（2）若取土样6g，应加入_______mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101～107不同浓度的土壤溶液。将103～107倍的稀释液分别吸取0.2mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为_______________。将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计菌落数，结果如下表，其中_______倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为__________ 。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目_______（低/高）。

（3）若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_______________________。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格（体积为0.1mm3）有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为102，那么原菌液的菌群密度为________个/mL。

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某学校有三个兴趣小组，第一小组用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌；第二小组从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌单菌落；第三小组从土壤中筛选产脲酶细菌。请回答下列问题：

（1）第一小组分离纯化乳酸菌时，首先用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释的理由是____________________。分离纯化乳酸菌所用固体培养基中加入____________可中和产生的乳酸，分离纯化时选择具有透明圈的菌落作为候选菌。

（2）第二小组土壤采样后，通过选择培养增加纤维素分解菌的浓度，之后，在培养基中加入____________进行颜色反应直接筛选纤维素分解菌，该培养基从功能上看属于_________，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行_________的实验。

（3）第三小组选择培养基应该以__________为唯一氮源，鉴别培养基需添加__________作为指示剂。在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品0．1mL，培养一段时间统计菌落数量。该过程采取的接种方法是__________。

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土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据下图回答相关问题：

(1)能分解尿素的细菌代谢类型为＿＿，应从富含有机质的土壤表层取土样。

(2)为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用________的培养基进行分离，并加入＿＿＿指示剂进行鉴别。

(3)若取土样5g，应加入＿＿ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液。取样稀释前，一定要＿＿＿以减少误差。将10³-10⁷倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用＿＿＿＿将菌液铺平。这种接种方法称为＿＿＿＿。

(4)将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有＿＿＿＿(现象)的菌落数，结果如下表，其中＿＿＿＿倍的稀释比较合适。

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某纺织厂为使牛仔布呈现“穿旧”效果，准备用纤维素分解菌处理代替传统的浮石擦洗。工作人员拟从土壤样品中分离该类微生物，并进行扩大培养，相关工艺流程如图。请回答下列问题：

（1）进行土样中细菌数量的测定，常用稀释涂布平板法（选用104～106倍的稀释液）统计样品中活菌的数量。但第一次用稀释涂布平板法测定土样中纤维素分解菌的数量时，所进行实验的一般基本思路是______。

（2）在系列稀释操作前，“选择培养”的一般目的是______。

（3）“涂布接种”时，转动培养皿的目的是______。

（4）在鉴别培养基上，菌落周围的透明圈大小可能与纤维素酶的______有关。在分离出所需的菌株之后，还应通过______的实验来进一步确定分离出的菌株是纤维素分解菌，而后开展扩大培养。

（5）纤维素酶的测定方法一般是______。

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某纺织厂为使牛仔布呈现“穿旧”效果，准备用纤维素分解菌处理代替传统的浮石擦洗。工作人员拟从土壤样品中分离该类微生物，并进行扩大培养，相关工艺流程如图。请回答下列问题：

（1）进行土样中细菌数量的测定，常用稀释涂布平板法（选用104～106倍的稀释液）统计样品中活菌的数量。但第一次用稀释涂布平板法测定土样中纤维素分解菌的数量时，所进行实验的一般基本思路是______。

（2）在系列稀释操作前，“选择培养”的一般目的是______。

（3）“涂布接种”时，转动培养皿的目的是______。

（4）在鉴别培养基上，菌落周围的透明圈大小可能与纤维素酶的______有关。在分离出所需的菌株之后，还应通过______的实验来进一步确定分离出的菌株是纤维素分解菌，而后开展扩大培养。

（5）纤维素酶的测定方法一般是______。

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[生物—选修1]请回答关于“分解纤维素的微生物的分离”的实验的一些问题。

（1）采集土样时，应选择_____的环境，因为纤维素分解菌大多分布在这些环境的土壤中。

（2）为确保能够从样品中分离得到目的菌，可通过选择培养增加纤维素分解菌的浓度。选择培养基应以_____作为唯一的碳源。为什么选择培养能够“浓缩”目的菌？__________。

（3）分离得到分解纤维素的微生物，常用的方法是_____，常用的接种方法是______，判断是否是目的菌菌落的依据是_____，设置空白对照的目的是______。

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