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2003年，我国首创的基因治疗药物“今又生”被批准上市，其本质是利用腺病毒和人p53基因拼装得到的重组病毒。人的p53蛋白可对高危癌前病变的DNA损伤进行修复，对DNA损伤无法修复的细胞，p53蛋白则诱导其进入冬眠状态或细胞凋亡。“今又生”的载体采用毒性极弱的第一代人5型腺病毒，其基因不整合到宿主细胞基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，无环境污染。根据以上信息，完成下列问题：
（1）p53功能蛋白是由4条完全相同的肽链组装而成，每条肽链由393个氨基酸缩合而成。若考虑到翻译过程起始密码和终止密码的存在，则p53基因至少应该含有 个核苷酸。在形成p53蛋白时，需要脱去 个水分子，此时核糖体上不含有下列哪种结构 。
A．蛋白质 B．RNA C．核糖核苷酸 D．脱氧核苷酸
（2）试举一种人体中不含p53基因的细胞 。
（3）已知P53蛋白微量高效，只需极微量就可以完成功能，p53基因位于常染色体上。某男谢某表现型正常，但在他还是一个受精卵时，一条染色体上的p53基因突变成为无功能的假基因。若谢某和一个无遗传病史正常女性结婚，生下一儿晓东，晓东长大后娶了一个因p53突变导致的“易患癌症者”吴婷婷，晓东和婷婷准备生个娃娃，他们的娃娃是“易患癌症者”的概率应为 。
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（11分）2003年，世界上第一个基因治疗药物“今又生”通过临床实验，被准上市。“今又生”是我国为数不多的首创药物之一，由我国科学家于1998年开始研制的。其本质是利用腺病毒和人p53基因拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白对高危癌前病变的DNA损伤（如FOS基因损伤）可直接或通过调控其他途径进行修复，使其恢复正常；对DNA损伤无法修复的细胞，P53蛋白则诱导其进入冬眠状态或细胞凋亡，预防细胞癌变。“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，为腺病毒中致病力最弱的病毒株，野生型该病毒株也仅会偶致普通感冒，其基因不整合到宿主细胞基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改构，只对细胞实施一次感染，不能复制，无环境污染。
根据以上信息，完成下列问题：
（1）从题中分析，在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，在那些载体一般应具备的条件中，科学家选择性的放弃了一般的载体都应该具有的___________________。
（2）P53功能蛋白是由4条完全相同的肽链组装而成，每条肽链由393个氨基酸缩合而成。若考虑到翻译过程起始密码和终止密码的存在，则p53基因至少应该含有____________个核苷酸。在形成P53蛋白时，需要脱去___________个水分子，此时核糖体上不含有下列哪种结构___________。
A．密码子 B．反密码子
C．核糖核苷酸 D．脱氧核苷酸
（3）试举一种人体中不含p53基因的细胞：_______________________。
（4）已知P53蛋白微量高效，只需极微量就可以完成功能，p53基因位于常染色体上。某男谢某表现型正常，但在他还是一个受精卵时，一条染色体上的p53基因突变成为无功能的假基因。若谢某和一个无遗传病史正常女性结婚，生下一儿谢晓东，晓东长大后娶了一个因p53突变导致的“易患癌症者”吴月婷，晓东和月婷准备生个娃娃，他们的娃娃是“易患癌症者”的概率应为__________________。
（5）月婷为了治病，接受了“今又生”的基因治疗。在她接受注射后两个月，从她血液中提取了P53蛋白做了电泳分析，以便和治疗前对比。但是月婷慌乱中把治疗前后的底片搞混淆了，两张底片分别如下图所示，请帮月婷判断，她的治疗_________（是、否）有效，__________（左、右）边那幅图是治疗后的电泳分析图。
（6）月婷经过“今又生”注射后，仍然不幸的在三十五岁就患了癌。根据已有资料判断，她的治疗效果不显著的最可能原因是：（ ）
A．p53基因没有整合到体细胞中
B．p53基因没有转录出mRNA
C．p53基因没有表达出P53蛋白
D．注射浓度或注射次数不够
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【现代生物科技专题——选修3】（15分）“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一，其本质是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不能污染。请回答下列问题：
（1）在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，在载体一般应具备的条件中，科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的________。检测P53基因的表达产物，还可以采用________技术。
（2）如果要获取人类基因组中抑癌基因P53，可以采取的方法通常包括________和通过化学方法人工合成。目的基因的大量扩增则可以采用________，该技术中需使用的一种特殊的酶是________。
（3）在研究中如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎于细胞可来源于囊胚期的_________，或胎儿的原始性腺，也可以通过________技术得到重组细胞后在进行相应处理获得。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是________。
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“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一，其本质是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不会污染。
请回答下列问题：
（1）在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，在载体一般应具备的条件中，科学家选择性地放弃了一般载体都应具有的特点____________。检测P53基因的表达产物，可以采用_______________技术。
（2）如果要大量扩增P53基因，一般采用PCR技术，该技术中需使用的一种特殊的酶____________________。与体内DNA复制相比较，PCR反应要在_______________中才能进行，并且要严格控制_________条件。
（3）如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎干细胞可来源于囊胚的_________，或胎儿的原始性腺；在培养时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为_____。如果想继续培养则是需要重新用__________处理，然后分瓶继续培养，这样的培养过程通常被称为传代培养。
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“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一，其本质是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不能污染。请回答下列问题：
（1）在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，在载体一般应具备的条件中，科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的 。检测P53基因的表达产物，还可以采用 技术。
（2）如果要获取人类基因组中抑癌基因P53，可以采取的方法通常包括 和通过化学方法人工合成。目的基因的大量扩增则可以采用 ，该技术中需使用的一种特殊的酶是 。
（3）在研究中如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎干细胞可来源于囊胚期
的 _，或胎儿的原始性腺，也可以通过 技术得到重组细胞后在进行相应处理获得。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是 。
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通过基因工程研制的某新型基因治疗药物，其本质是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。该药物的载体采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不会污染。请回答下列问题：
（1）在该药物的生产中，为了获得更高的安全性能，在载体一般应具备的条件中，科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的_________________（在“能自我复制”“有多个限制性酶切位点”“在宿主细胞中能稳定保存”中选答）。检测P53基因基因是否插入到染色体上，可从分子水平上检测，方法是___________。
（2）如果要获取人类基因组中抑癌基因P53，可以采取的方法通常包括_____________和人工方法合成。目的基因的大量扩增则可以采用_________________技术，该技术中需使用一种特殊的酶是_________________。
（3）如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎干细胞可来源于______________的内细胞团，或胎儿的原始性腺，也可以通过_________________技术得到重组细胞后再进行相应处理获得。在培养液中加入_________________，如牛黄酸等化学物质时就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段。
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通过基因工程研制的某新型基因治疗药物，其本质是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。该药物的载体采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不会污染。请回答下列问题：
（1）在该药物的生产中，为了获得更高的安全性能，在载体一般应具备的条件中，科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的_________________（在“能自我复制”“有多个限制性酶切位点”“在宿主细胞中能稳定保存”中选答）。检测P53基因基因是否插入到染色体上，可从分子水平上检测，方法是___________。
（2）如果要获取人类基因组中抑癌基因P53，可以采取的方法通常包括_____________和人工方法合成。目的基因的大量扩增则可以采用_________________技术，该技术中需使用一种特殊的酶是_________________。
（3）如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎干细胞可来源于______________的内细胞团，或胎儿的原始性腺，也可以通过_________________技术得到重组细胞后再进行相应处理获得。在培养液中加入_________________，如牛黄酸等化学物质时就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段。
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基因工程在医药卫生、农牧业等方面应用广泛。请回答：
（1）p53基因是人体内的一种抑癌基因，其主要作用是___________，因此，p53基因与腺病毒拼装而成的重组病毒导入人体可用于肿瘤治疗。拼装该重组病毒所需的工具酶有_________________。
（2）用上述重组病毒治疗肿瘤，在再次给药时，重组病毒常常无法或很少能进入靶细胞，从而影响治疗效果。你认为原因是什么？________
（3）基因工程技术可以使母羊成为乳腺生物反应器，通过母羊分泌的乳汁来生产人抗凝血酶Ⅲ等药用蛋白。在具体操作过程中，要用_________法把目的基因导入受精卵并培养成早期胚胎。在胚胎移植前，还要取用囊胚的_______________细胞进行性别鉴定。构建基因表达载体时，必须把目的基因与羊乳腺分泌蛋白基因的启动子结合在一起。使用该启动子的原因是_____________________。
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质粒P含有氨苄青霉素抗性基因（Ampr）和四环素抗性基因（Tetr），外源DNA的插入会导致插入部位基因的失活。重组人干扰素a-1b是我国第一个国内批准生产的基因工程药物。下图所示为利用质粒P和人干扰素基因构建基因表达载体P1的示意图。回答下列问题：
限制酶
EcoR V
Sau3AI
BamH I
识别序列及切割位点
（1）据图分析，为便于过程①所获得的目的基因片段能够顺利与质粒P连接，需要在目的基因片段加上__________序列。成功导入P1的受体菌落具有的抗药性特点为__________。
（2）过程③用到的酶为__________。为了保证目的基因能够正常表达，在构建P1时需要将目的基因插入__________之间。
（3）科学家最早就是利用基因工程方法在大肠杆菌和酵母菌细胞内获得了干扰素，利用大肠杆菌作为受体菌的优点是____________________。以大肠杆菌为受体细胞时通常用人特定细胞的mRNA为材料来获得cDNA，其原理是______________________________。
（4）若要检测是否表达出干扰素，可用__________（物质）对工程菌中提取的蛋白质进行检测。
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干扰素α—1b是我国第一个批准生产的基因工程药物，该药物利用大肠杆菌作为受体获得，具有抗病毒、抑制肿瘤细胞增生、调节人体免疫功能的作用，广泛用于病毒性疾病和多种肿瘤的治疗，是当前国际公认的病毒性疾病治疗的首选药物和肿瘤生物治疗的主要药物。
（1）原核生物经常作为受体细胞是由于其具有其他生物没有的特点： 、 、 等。
（2） 是基因工程的核心，其目的是使目的基因在 中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够 和发挥作用。
（3）为使干扰素基因在大肠杆菌细胞内表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 和 之间。
（4）采用 技术可检测干扰素基因是否成功导入大肠杆菌的DNA上。
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