下图表示科学家培育转基因克隆长白猪的过程，期中调节基因可以抑制抗原决定基因的表达，培育的转基因克隆猪有望解决世界性的人源器官短缺问题。请据图分析回答：
（1）若通过①过程获得的调节基因M端的黏性末端是—CTAG，N端的黏性末端是—TTAA，则①②过程选用的限制酶是________。
（2）③过程常用的方法是________，⑤过程表示________。
（3）在进行步骤⑤前，应对受体长白母猪进行________处理。
（4）转基因克隆长白猪子代的器官是否一定可以作为人源器官？简要说明理由。
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下图表示科学家培育转基因克隆长白猪的过程，期中调节基因可以抑制抗原决定基因的表达，培育的转基因克隆猪有望解决世界性的人源器官短缺问题。请据图分析回答：
（1）若通过①过程获得的调节基因M端的黏性末端是—CTAG，N端的黏性末端是—TTAA，则①②过程选用的限制酶是________。
（2）③过程常用的方法是________，⑤过程表示________。
（3）在进行步骤⑤前，应对受体长白母猪进行________处理。
（4）转基因克隆长白猪子代的器官是否一定可以作为人源器官？简要说明理由。
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下图表示科学家培育转基因克隆长白猪的过程，其中“调节基因”可以抑制抗原决定基因的表达。请据图分析回答。
（1）若过程①获得的调节基因M端的黏性末端是一CTAG，N端的黏性末端是一TTAA，则①、②过程选用的限制酶是______________________。M、N端黏性末端序列不同的优点是____________。
（2）过程③常用的方法是____________________。移入成纤维细胞核的“卵母细胞”是指处于 ____________（填时期）的细胞，过程⑤一般选择桑椹胚或囊胚进行移植，其主要依据是____________________________________。
（3）在进行过程⑤前，对受体长白母猪进行同期发情处理的主要目的是________________________。
（4）转基因克隆长白猪子代的器官是否一定可以作为人源器官？_____。简要说明理由。______________。
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哥廷根小型猪因其器宫大小、结构和生理特点等方面与人的器官极为相似，已经成为国际上理想的异种器官移植的研究材料。如图表示科学家培育转基因小型猪的过程，其中调节基因可以抑制抗原决定基因的表达，培育的转基因克隆猪有望解决世界性的人源器官短缺问题。请据图分析回答：
（1）若通过①过程获得的调节基因M端的黏性末端是—CTAG，N端的黏性末端是—TTAA，则①②过程选用的限制酶是_______________。构建重组质粒的目的是__________________。
（2）核移植受体细胞常选择卵母细胞的原因是___________。
（3）③过程常用的方法是___________，⑤过程用到的技术手段是___________。在进行步骤⑤前，应对受体长白母猪进行___________处理。
（4）将转基因克隆小型猪器官向人类移植前，还需检测该克隆猪的______________，从而避免移植后发生免疫排斥反应。若转基因克隆小型猪符合移植要求，但其子代并不一定符合移植要求的原因是___________________。
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Anti基因是小型猪器官表面抗原基因，人工合成的reAnti基因的模板链与Anti基因的模板链互补。科学家利用合成的reAnti基因培育出转基因克隆猪，用于解决人类器官移植时免疫排斥。
(l)利用PCR技术对reAnti基因进行扩增，其原理是 ___，在构建基因表达载体时，用两种不同的限制酶切割reAnti基因和运载体DNA来获得不同的黏性末端，原因是____。
(2)猪胎儿成纤维细胞培养过程中，需要用 ___酶将组织分散成细胞悬液。培育转基因猪时，应使用 ___技术将含有reAnti基因的表达载体导入猪成纤维细胞。再将该转基因猪的细胞核注入____时期的卵母细胞中，构建重组胚胎。
(3)胚胎培养液中除了一些无机盐和有机盐外，还需要添加“两酸、两素”以及动物血清，其中的“两酸”是指____。
(4)用 ___技术检测出转基因克隆猪的细胞核DNA中含有reAnti基因，但器官表面不含有抗原，原因是____。
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资料甲：某种细菌体内有抗虫基因，该基因能指导抗虫毒蛋白的合成。我国科学家成功地将该抗虫基因导入棉花细胞中，培育出了抗虫效果好的棉花新品种。
资料乙：研究表明，抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，科学家利用小鼠制备出了抗H蛋白的单克隆抗体。
请回答下列问题：
（1）资料甲中，获取抗虫基因时可使用EcoRI，其原因是含抗虫基因的DNA片段中含有 。向棉花细胞导入抗虫基因时，我国科学家采用了 法。抗虫基因导入棉花细胞后，为确定棉花植株是否具有抗虫特性以及抗性的程度如何，需要做 实验进行个体水平的鉴定。
（2）资料乙中，选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织细胞中
（填“低表达”或“高表达”）。将H蛋白注射到小鼠体内，从该小鼠的脾脏中获得相应的B淋巴细胞，将其与骨髓瘤细胞进行融合，细胞融合利用的原理是 。与植物原生质体融合过程相比，该融合过程特有的诱导方法是 。在杂交瘤细胞的体外培养过程中，培养液中是否需要添加血清 （填“需要”或“不需要”）；培养箱中充入5% CO2的主要作是 。为避免培养过程中代谢产物对杂交瘤细胞的毒害，常采取的措施是 。
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下列有关克隆的叙述，错误的是
A．转基因植物的培育利用了细胞的全能性
B．动物组织培养过程中不会发生组织分化
C．“多利”绵羊的性状与供核绵羊不完全相同
D．肝细胞难以克隆成个体是因为存在阻止核基因表达的调节蛋白
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2012年我国科学家首次培育成功携带（Leqtin）蛋白的转基因克隆猪，下图为获得瘦素（Leqtin）蛋白转基因克隆猪的技术流程。请回答
（1）瘦素蛋白基因表达载体应有___________________识别和结合的位点，以驱动瘦素蛋白基因的转录。
（2）过程常用的方法是___________________。进行细胞培养过程中通常在培养液中添加___________________以防止培养过程中的污染。
（3）过程使用的成熟卵母细胞是处于___________________期的卵母细胞。
（4）重组胚胎能在受体猪子宫内存活并最终成功产下转基因克隆猪，说明受体猪对转入其子宫的外来胚胎基本上不发生___________________反应。
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(12分)【生物——现代生物科技专题】
牛结核病是一种慢性传染病，在世界范围内广泛传播，来自于小鼠的SP110基因能够抑制牛结核分枝杆菌的增殖。下图是培育抗结核病转基因克隆牛的流程图。请据图回答：
(1)培育过程中涉及到的细胞工程技术有_________________、_____________。
(2)重组质粒由目的基因、____________、____________、标记基因等组成，过程I最常用的方法是_____________________。
(3)过程Ⅱ的胚胎培养液中除无机盐、有机盐和营养成分外，还需要添加_________等天然成分。
(4)过程III表示诱导成纤维细胞与处于____________期的去核卵母细胞融合。重组胚胎通过_________技术移入受体母牛子宫内，暂时不移入的可使用__________方法保存。
(5)若要提高重组胚胎的利用率，可对__________期的胚胎进行分割。
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我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：
（1）过程①和②必需用到的酶分别是________ 。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是________。然后还要通过________技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上。如果导入到植物细胞通常采用的方法则是________。
（3）为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射________，做超数排卵处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到________期即可通过显微操作将其细胞核去除。
（4）在培养得到的重组细胞时，一般需要提供
________条件。（至少说出3点）
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我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平．下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：
(1)该过程使用质粒的目的是__________________________________________________。
(2)图中通过过程①②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来________，理由是： _____________。
(3)图示工程中，将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是__________。然后还要通过_______技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上。
(4)图示中，将所采集到的卵母细胞在体外培养到________期即可通过显微操作将其细胞核去除并形成重组细胞，用物理或化学方法进行激活，然后再通过________技术培养成早期胚胎。
(5)过程⑧的实质是__________________________________________________________。
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