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天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类,用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用.研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌,获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精.请回答下列问题:

(1)将淀粉酶基因切割下来所用的工具是     ,用     将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子,此表达载体除目的基因外,必须含有         和标记基因.

(2)若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌,可采用的检测方法     ,该项方法要用     作探针进行检测;若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶,可采用     方法检测.

(3)采用PCR技术可对目的基因进行体外扩增.该反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种dNTP、模板DNA、引物和     .其中引物有     种,实质是     ,假如引物都用3H标记,从理论上计算循环4次,所得DNA分子中含有3H标记的占    

(4)已知BarnHⅠ与BglⅡ的识别序列及切割位点如图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BarnHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干循环后     序列明显增多.

高二生物综合题简单题

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