大肠杆菌是与我们日常生活关系非常密切的一类细菌，它寄生在人体的大肠和小肠里，结构简单，繁殖...

大肠杆菌是与我们日常生活关系非常密切的一类细菌，它寄生在人体的大肠和小肠里，结构简单，繁殖迅速，容易培养，是生物学上重要的实验材料。正常情况下，大多数大肠杆菌不但不会给我们的身体健康带来任何危害，反而还能竞争性抵御致病菌的进攻，同时还能帮助人体合成维生素K2，与人体是互利共生的关系。

（1）实验室常用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养。下表为培养基配方(配制1000mL）：

①表中的牛肉膏和蛋白胨为大肠杆菌的生命活动提供__________________________(至少答两点）；NaCl的作用是__________________________________(至少答两点）。

②为了达到纯化目的，该配方中还应该加入____________________________。

③培养基的配制过程为：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。其中溶化后灭菌前一定要进行的操作是调pH，培养细菌时需将培养基的pH调至______________________。

④纯化大肠杆菌：微生物的接种方法很多，其中不仅能纯化而且能计数的接种方法是_________，另外一种方法不能作为计数的方法的原因是________________________。

（2）大肠杆菌分解乳糖产生酸，因细菌带正电会被伊红染成红色，再与美蓝结合会形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽。在牛肉膏蛋白胨固体培养基加入一定量的伊红一美蓝溶液，这样的培养基是________(填“选择”或“鉴別”)培养基。中国的卫生标准是每1000mL饮用水中大肠杆菌不得超过3个，在培养基上每1000mL合格饮用水形成的菌落数_______(填“大于”、“小于”或“等于”)3个，原因是___________。

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大肠杆菌与我们日常生活关系非常密切，它寄生在人体的大肠和小肠里，结构简单，繁殖迅速，容易培养，是生物学上重要的实验材料。正常情况下，大多数大肠杆菌不但不会给我们的身体健康带来任何危害，反而还能竞争性抵御致病菌的进攻，同时还能帮助人体合成维生素K2，与人体是互利共生的关系。

（1）实验室常用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养。下表为培养基配方(配制1000mL)：

①表中的牛肉膏和蛋白胨主要为大肠杆菌的培养提供____________等营养物质(至少答两点）；NaCl的作用是_________________(至少答两点)。

②为了达到纯化目的，该配方中还应该加入___________________。

③培养基的配制过程为:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。其中溶化后灭菌前一定要进行的操作是调PH，培养细菌时需将培养基的pH调至____________________。

④纯化大肠杆菌:微生物接种最常用的方法是_________和__________，前者不仅能纯化而且能计数。

（2）大肠杆菌分解乳糖产生酸，因细菌带正电会被伊红染成红色，再与美蓝结合会形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽。在牛肉膏蛋白胨固体培养加入一定量的伊红一美蓝溶液，这样的培养基是________(填“选择”或“鉴別”)培养基。中国的卫生标准是每1OOOmL饮用水中大肠杆菌不得超过3个，在培养基上每1000mL合格饮用水形成的菌落数_______(填“大于”、“小于”或“等于”)3个，原因是______________。

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大肠杆菌是寄生在人体肠道中的一种细菌，繁殖迅速，容易培养，生物学上常常需要分离纯化大肠杆菌作为实验材料。回答下列问题：

（1）制备纯化大肠杆菌的培养基时，需要加入—定量的NaCl，目的是为大肠杆菌的生长提供_________。培养基溶化后、灭菌前一般还需要_____________________。

（2）实验室中可以使用平板划线法纯化大肠杆菌，操作时需要将接种环___________后再用于接种。该接种方法不能用于大肠杆菌计数，原因是______________________。

（3）某同学对大肠杆菌进行计数，通过系列稀释得到三个浓度，每个浓度分别接种三个平板，发现其中某一浓度组的某一个平板上的菌落连成一片，出现这种现象的原因可能是：________、______。若实验操作都正确规范，但通过菌落计数并计算后发现，稀释倍数高的组计算结果往往越大于稀释倍数低的组，导致这种结果的原因最可能是______________。

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(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑　　 、　　 和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、　　 、　　 等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。

(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行　　 (填“消毒”或“灭菌”);操作者的双手需进行清洗和　　 ;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能　　 。

(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的　　 。

(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的　　 。

(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是________　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及培养物必须经过　　 处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。

点睛:本题综合考查微生物的培养条件、培养基种类和计数等知识,考查学生的识记能力和综合应用能力。

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[生物——选修1:生物技术实践]

在日常生活中，一提到细菌、真菌及病毒这些微生物，人们往往首先想到它们的害处，其实，很多微生物对人类是有益的，它们与我们人类的关系非常密切，而且人类巳经应用微生物造福于我们的生活。请回答下列问题。

（1）从自然界获得纯种酿酒酵母菌的基本程序：配制培养基→接种→培养→观察记录→纯化培养。

①采用平板划线法接种，开始接种时要灼烧接种环，目的是________________________。

②若葡萄汁中含有醋酸菌，在葡萄酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将酒精转变成醋酸？____________________，原因是____________________。

（2）在腐乳的制作过程中，有多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是_____________。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的_____________，_________可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

（3）利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中选择出能分解纤维素的细菌，经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌的常用方法有___________和__________。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、________________。

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【山西大学附属中学2017届高三下学期3月模块诊断理综生物试题】生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题：

（1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用________法灭菌。检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用_________进行一系列的梯度稀释。

（2）将稀释后的水样分别接种到LB固体培养基，_______（填“正置/倒置”）于恒温培养箱，在_____℃条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时_________（填“需要/不需要”）设置对照组。

（3）对于生活饮用水中大肠杆菌的数量统计，也可以采用滤膜法，该法是利用滤膜的直径_______（填“大于/小于”）大肠杆菌的直径，将大肠杆菌留在滤膜上进行的计数。

（4）下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述错误的是_____（多选）。

A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置

B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线

C．步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落

D．步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数

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生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题：

（1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用________法灭菌。检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用_________进行一系列的梯度稀释。

（2）将稀释后的水样分别接种到LB固体培养基，_______（填“正置/倒置”）于恒温培养箱，在_____℃条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时_________（填“需要/不需要”）设置对照组。

（3）对于生活饮用水中大肠杆菌的数量统计，也可以采用滤膜法，该法是利用滤膜的直径_______（填“大于/小于”）大肠杆菌的直径，将大肠杆菌留在滤膜上进行的计数。

（4）下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述错误的是_____（多选）。

A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置　　　　　　　　　　

B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线　　　

C．步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落

D．步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数

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生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题：

（1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用________法灭菌。检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用_________进行一系列的梯度稀释。

（2）将稀释后的水样分别用玻璃刮刀_______到LB固体培养基，_______于恒温培养箱，在_______℃条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时_________（填需要或不需要）设置对照组。

（3）下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是_________。

A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置　　　　　　　　　　

B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线　　　

C．步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落

D.步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数

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（一）生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题：

（1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用________法灭菌。检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用_________进行一系列的梯度稀释

（2）将稀释后的水样分别用玻璃刮刀_______到LB固体培养基，_______于恒温培养箱，在_____℃条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时_________（填需要或不需要）设置对照组。

（3）下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是_________。

A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置　　　　　　　　　　

B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线　　　

C．步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落

D．步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数

（二）科学家通过诱导黑鼠体细胞脱分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出克隆鼠。流程如下：

（1）从黑鼠体内获得一部分组织细胞，经过___________消化，使其分散成单个的细胞，然后放入____________中保温培养。在培养过程中细胞保持生长、分裂（繁殖）乃至___________和有规律的衰老、死亡等生命活动现象。

（2）下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是___________。

A．二倍体细胞大多具有异倍体核型

B．某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞

C．细胞克隆的最基本要求是必须来源于单个细胞

D．未经克隆化培养的细胞系细胞往往遗传性状不均一

（3）图中重组囊胚通过_________技术移入白鼠子宫内继续发育。克隆鼠的遗传物质来自图中______鼠。为了提高成功率，代孕母鼠需进行激素处理，使其________________。

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水质细菌学检验是培水和污水水质分析工作中的一项重要指标。作为水质日常检测的七项指标（色度、浊度、细菌总数、大肠菌群、余氯、铁、锰）之一的细菌总数和大肠杆菌指数，能非常直观地反映水费细菌污染的程度。例如，我国饮用水标准规定，每升饮用水中大肠杆菌不超过3个。某学校生物兴趣小组欲通过实验来检测自来水中大肠杆菌的含量，已知大肠杆菌在伊红—美蓝培养基培养时，菌落呈深紫色。请根据下列有关实验步骤回答问题：

（1）配制培养基：配置伊红—美蓝培养基时，除水、无机盐、蛋白胨、乳糖、伊红、美蓝等基本原料外，还需要加入__________作为凝固剂。从功能上讲，这种培养基属于__________________。

（2）倒平板：配置好的培养基用_________法灭菌后，待培养基冷却到50℃左右倒平板。平板冷凝后应将平板__________放置，以防止皿盖上的水珠落入培养基。在接种之前，要随机选取若干灭菌后的空平板先行培养一段时间，这样做的目的是__________。

（3）接种：该小组采用平板划线法分离自来水中的细菌，操作时，接种环通过_________灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_________。培养一段时间后，能正确表示该小组得到的结果为上图中的_________。

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