抗草胺磷（一种除草剂）转基因大豆的培育过程如下图所示。(l)用_______处理，获得上图...

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抗草胺磷（一种除草剂）转基因大豆的培育过程如下图所示。

(l)用_______处理，获得上图中所示的“来自矮牵牛的抗草铵膦基因”、含有抗四环素基因的“质粒”。其中质粒上的“抗四环素基因”作用是________。

(2)图中①应为________。

(3)部分农杆菌不能在培养基（含匹环素）上生长的原因是________。

(4)在A→D过程中，A→B过程在恒温箱中______（避光、光照）培养，注意观察、记录______　的生长情况。

(5)转抗草胺磷基因成功的大豆植株内，抗草胺磷基因能够高效表达，其高效表达的观察指标是　　。

(6)从某种蛋白质的氨基酸序列出发，利用_____方法获得目的基因，通过基因工程可以生产自然界中不存在的蛋白质。下列有关基因工程中运载体的描述，正确的是　　。

A.能够在宿主细胞中复制并稳定保存是运载体的必备条件之一

B．一种运载体只能运载一种目的基因

C．使用的运裁体有质粒、噬菌体衍生物和动植物病毒等

D．基因表达载体的构建上是一样的，不因受体细胞种类、目的基因导入方法的不同而有所差异

高三生物综合题中等难度题

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抗草胺磷（一种除草剂）转基因大豆的培育过程如下图所示。
(l)用_______处理，获得上图中所示的“来自矮牵牛的抗草铵膦基因”、含有抗四环素基因的“质粒”。其中质粒上的“抗四环素基因”作用是________。
(2)图中①应为________。
(3)部分农杆菌不能在培养基（含匹环素）上生长的原因是________。
(4)在A→D过程中，A→B过程在恒温箱中______（避光、光照）培养，注意观察、记录______　的生长情况。
(5)转抗草胺磷基因成功的大豆植株内，抗草胺磷基因能够高效表达，其高效表达的观察指标是　　。
(6)从某种蛋白质的氨基酸序列出发，利用_____方法获得目的基因，通过基因工程可以生产自然界中不存在的蛋白质。下列有关基因工程中运载体的描述，正确的是　　。
A.能够在宿主细胞中复制并稳定保存是运载体的必备条件之一
B．一种运载体只能运载一种目的基因
C．使用的运裁体有质粒、噬菌体衍生物和动植物病毒等
D．基因表达载体的构建上是一样的，不因受体细胞种类、目的基因导入方法的不同而有所差异

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抗草胺磷（一种除草剂）转基因大豆的培育过程如图所示。
（1）用________________处理，获得上图中所示的“来自矮牵牛的抗草胺磷基因”、含有抗四环素基因的“质粒”。其中质粒上“抗四环素基因”的作用是___________________。
（2）图中①应为____________________________________________________________。
（3）部分农杆菌不能在培养基（含四环素）上生长的原因是___________________________。
（4）在A→D过程中，A→B过程在恒温箱中________（填“避光”或“光照”）培养，注意观察、记录______________________________________________________________的生长情况。
（5）转抗草胺磷基因成功的大豆植株内，抗草胺磷基因能够高效表达，其高效表达的观察指标是_____。
（6）从某种蛋白质的氨基酸序列出发，利用________方法获得目的基因，通过基因工程可以生产自然界中不存在的蛋白质。下列有关基因工程中运载体的描述，正确的是________。（多选）
A．能够在宿主细胞中复制并稳定保存是运载体的必备条件之一
B．一种运载体只能运载一种目的基因
C．使用的运载体有质粒、λ噬菌体衍生物和动植物病毒等
D．基因表达载体的构建是一样的，不因受体细胞种类、目的基因导入方法的不同而有所差异

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在矮牵牛的体内能合成一种能抗除草剂的物质即抗草胺磷，下图是利用矮牵牛来培养转基因大豆的过程。
（1）图中①应为________________。在构建①的过程中，要用到的对识别的序列具有特异性的酶是________________。
（2）在将①导入土壤农杆菌之前，往往要用________处理土壤农杆菌，使之成为______细胞，然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。
（3）②中的部分农杆菌不能在含四环素培养基上生长，其原因是_______________________。
（4）A→B过程需要在恒温箱中_________培养，注意观察、记录_________的生长情况。
（5）人工种子是以图中_________（用字母和箭头表示）过程中形成的_________、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过____________包装得到的种子。

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草胺磷是一种除草剂，抗草胺磷转基因大豆的培育过程如下图所示。
（l）基因工程的目的基因可从_______中分离，也可以_______。
（2）对农杆菌筛选时需向普通培养基中添加____________，部分农杆菌不能在该选择培养基上生长的原因是____________________________。
（3）图中A→D过程称_________技术，该技术就是在_________和人工控制条件下，将离体的器官、组织、细胞，培养形成完整的植株。
（4）检测转基因大豆的DNA上是否插入了目的基因的检测方法是将__________提取出来与探针杂交，观察是否出现杂交带。从个体水平看，若___________，则可确定转基因大豆培育成功

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某研究小组欲将已知抗除草剂基因导人原生质体培育抗除草剂大豆。请回答下列问题：
（1）为获得大量抗除草剂基因，可通过_______技术进行扩增，也可将其连接到_______上，通过大肠杆菌培养扩增。
（2）制备叶片原生质体的酶混合液中，一般含较高浓度的甘露醇，其目的是避免制备的原生质体_________。酶混合液需通过_________灭菌，才能用于无菌原生质体的制备，整个无菌操作过程需在_________中进行。
（3）可通过___________方法，直接将抗除草剂基因导入原生质体的细胞核。此外，还可用聚乙二醇融合、电击等方法导入。导入后的原生质体需再生出__________，经持续分裂获得愈伤组织，进一步分化获得再生植株并扩大繁殖。
（4）利用带有标记的抗除草剂基因特殊片段与从转基因植株提取的RNA进行___________，验证抗除草剂基因是否被整合到受体的细胞中并转录。

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某研究小组欲将已知抗除草剂基因导人原生质体培育抗除草剂大豆。请回答下列问题：
（1）为获得大量抗除草剂基因，可通过_______技术进行扩增，也可将其连接到_______上，通过大肠杆菌培养扩增。
（2）制备叶片原生质体的酶混合液中，一般含较高浓度的甘露醇，其目的是避免制备的原生质体_____________。无菌原生质体的制备过程中，整个无菌操作过程需在__________中进行。
（3）可通过___________方法，直接将抗除草剂基因导入原生质体的细胞核。此外，还可用___________融合、电击等方法导入。导入后的原生质体需再生出__________，经持续分裂获得愈伤组织，进一步分化获得再生植株并扩大繁殖。
（4）利用带有标记的抗除草剂基因特殊片段与从转基因植株提取的RNA进行___________，验证抗除草剂基因是否被整合到受体的细胞中并转录。

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（20分）玉米自交系（遗传稳定的育种材料）B具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需依次进行步骤I、II试验。

Ⅰ．获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如下图。

（1）为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是______（单选）。

①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点

②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同

④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

A．①③　　　　　　　 B．①④　　　　　 C．②③　　　　 D．②④

（2）下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知，细胞脱分化时使用的激素是_______________，自交系_______________的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。

（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织，需使用含_____________________的选择培养基。

（4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是_______________（多选）。

A．无农杆菌附着的未转化愈伤组织

B．无农杆菌附着的转化愈伤组织

C．农杆菌附着的未转化愈伤组织

D．农杆菌附着的转化愈伤组织

（5）组织培养获得的转基因植株（核DNA中仅插入一个G基因）进行自交，在子代含G基因的植株中，纯合子占_____________。继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合自交系A。

II．通过回交使自交系B获得抗除草剂性状

（6）抗除草剂自交系A（GG）与自交系B杂交产生F1，然后进行多轮回交（下图）。自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代______________。

（7）假设子代生活力一致，请计算上图育种过程F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例，并在图1中画出对应的折线图。若回交后每代不进行鉴定筛选，直接回交，请在图2中画出相应的折线图。

（8）下表是鉴定含G基因植株的4种方法。请预测同一后代群体中，4种方法检出的含G基因植株的比例，从小到大依次是________。

方法　　　　　　　检测对象　　　　　　检测目标　　　　　　检出的含G基因植株的比例

PCR扩增　　　　基因组DNA　　　　 G基因　　　　　　　　　　　　 x1

分子杂交　　　　总mRNA　　　　 G基因转录产物　　　　　　　　 x2

抗原-抗体杂交　总蛋白质　　　　 G基因编码的蛋白质　　　　　 x3

喷洒除草剂　　　幼苗　　　　　　　　抗除草剂幼苗　　　　　　　　　 x4

对Hn继续筛选，最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系

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玉米自交系（遗传稳定的育种材料）B具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需依次进行步骤I、II试验。