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饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。
（1）培养基中除了添加植酸钙以外，还应含有________、________、水、无机盐等基本营养物质。
（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行____________________，而且须将接种后的培养皿呈________状态放置。
（3）接种以前进行的一系列操作，目的是在培养皿表面形成________。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的________就能大致推测出样品中的活菌数。
（4）由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中，________是产植酸酶的最理想菌株。
（5）以上方法对产生植酸酶的微生物进行了初步筛选，还需要进行____________的实验。
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饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用｡若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等｡以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图｡请分析作答｡
（1）培养基中除了添加 以外，应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质｡
（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行 ｡接种后须将培养皿呈 状态放置｡
（3）接种以前要进行的一系列操作，目的是在固体培养基表面形成 ｡根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的 就能大致推测出样品中的活菌数｡通常每种稀释液需涂布 个平板，取其平均值｡若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是C，则1g土壤中含有此菌的菌株数是 ｡
（4）若要对上述菌株进行纯化，通常使用的划线工具是 ;接种时，在第一区域划线后须将该工具 后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是从上一区域获得菌种。
（5）产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶｡实验结果显示A~E五种菌株中， 是产植酸酶最理想的菌株｡
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饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸梅的菌株的过程示意图。请分析作答。
（1）图示培养基中除了添加 以外，应含有碳源、氮源、水、其他无机盐等基本营养物质。
（2）接种以前要进行系列稀释操作，目的是在固体培养基表面形成 。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的 就能大致推测出样品中的活菌数。通常每种稀释液需涂布三个平板，取其平均值。若将最后一个试管中的菌液每次吸取 0．lmL涂布培养后获得平均值是48个菌落，则lg土壤中含有此菌的菌株数是 。
（3）在样品稀释和涂布平板步骤中，下到选项不需要的是 （填序号）。
①酒精 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水
（4）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是 。
（5）产植酸梅的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。图中降解圈大小与植酸酶的 有关。实验结果显示A-E五种菌株中， 是产值酸酶最理想的菌株。分离并获得菌种后，若需长期保存，应使用 法。
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饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。下图是学生们从作物根部土壤中分离产植酸酶菌株的过程。
（1）分离产植酸酶的菌株，需先配制合适的培养基。配制培养基时，在各成分都溶化后和倒平板前，要进行的是_______、分装和灭菌。对培养基进行灭菌的常用方法是_______。倒平板时，一般需冷却至50 ℃左右，在酒精灯火焰附近操作。依物理性质看，该培养基属于_______培养基。依功能看，该培养基属于_______培养基。
（2）接种以前进行的一系列稀释操作，目的是在培养基表面形成____________，这种接种方法是_______。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大致推测出样品中的活菌数。如果图示过程接种的培养基上平均有40个菌落，则1 g土壤中大致的活菌数量是_______个。该方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目_______。
（3）由于植酸钙的不溶解性，可使培养基形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中，_______是产植酸酶的理想菌株。
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饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。下图是学生们从作物根部土壤中分离产植酸酶菌株的过程。
（1）分离产植酸酶的菌株，需先配制合适的培养基。配制培养基时，在各成分都溶化后和倒平板前，要进行的是_______、分装和灭菌。对培养基进行灭菌的常用方法是_______。倒平板时，一般需冷却至50 ℃左右，在酒精灯火焰附近操作。依物理性质看，该培养基属于_______培养基。依功能看，该培养基属于_______培养基。
（2）接种以前进行的一系列稀释操作，目的是在培养基表面形成____________，这种接种方法是_______。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大致推测出样品中的活菌数。如果图示过程接种的培养基上平均有40个菌落，则1 g土壤中大致的活菌数量是_______个。该方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目_______。
（3）由于植酸钙的不溶解性，可使培养基形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中，_______是产植酸酶的理想菌株。
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为探究植酸酶对鲈鱼生长和消化酶活性的影响，研究者设计并进行了相关实验，实验步骤及结果如下：
①鲈鱼的驯养：将从海洋中捕获的鲈鱼鱼苗在浮式海水网箱中饲养14 d，用普通饲料投喂，备用。
②饲料的配制：在每千克普通饲料中添加200 mg植酸酶，配制成加酶饲料；并将普通饲料和加酶饲料分别制成大小相同的颗粒，烘干后储存。
③鲈鱼的饲养：挑选体格健壮、大小一致的鲈鱼随机分组，放养于规格相同的浮式海水网箱中，放养密度为60尾/箱。给对照组的鲈鱼定时投喂适量的普通饲料，给实验组的鲈鱼同时投喂等量加酶饲料。
④称重并记录：投喂8周后，从每个网箱中随机取20尾鲈鱼称重。结果显示，对照组、实验组鱼体平均增重率分别为859.3%、947.2%。
⑤制备鲈鱼肠道中消化酶样品，并分别测定消化酶的活性，结果如下表。
| 蛋白酶活性(U/mg) | 脂肪酶活性(U/mg) | 淀粉酶活性(U/mg) |
| 对照组 | 1.09 | 0.08 | 0.12 |
| 实验组 | 1.71 | 0.10 | 0.13 |
根据上述实验，回答下列问题：
(1)步骤①中选用鲈鱼鱼苗而不是成体的主要原因是_______________________________________；实验前的驯养是为了__________________。
(2)步骤②中将配制好的饲料进行烘干要特别注意_______________________________________，其原因是_______________________________________。
(3)步骤③中还应控制好的无关变量主要有________。
(4)本实验得出的初步结论是_______________________________________。
(5)推测鲈鱼的食性并说明理由：_______________________________________
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材料 饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中，猪禽等动物由于缺乏有关酶，无法有效利用植酸，造成磷源浪费，而且植酸随粪便排出后易造成环境有机磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成为目前重要的饲料添加剂之一。
(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生____________，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间内____________表示。
(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如图：
Ⅰ中的主要成分为________；Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。______________________________________。
(3)为制备基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步：________________________。反应过程中打开模板DNA双链的方法是____________________。
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（每空2分，共16分）饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中，猪、禽等动物由于缺乏有关酶，无法有效利用植酸，造成磷源浪费，而且植酸随粪便排除后易造成环境有机磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成为重要的饲料添加剂之一。请回答下列问题：
（1）磷元素不可能出现在下列哪个/哪些分子或结构中？______________。
A.核糖 B.核膜 C.核糖体 D.腺苷
（2）饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的________________，然后改变植酸酶的氨基酸序列，从而得到新的植酸酶。
（3）为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程，据图回答：
①图中基因组文库________________（小于/等于/大于）cDNA文库；
②A、C过程中________________（可以/不可以）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株；
③目的基因I和II除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中哪些分子为模板直接进行PCR扩增？________________________________。PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步，即__________________→__________________→__________________。
④将植酸酶基因导入水稻细胞最常用的方法是__________________。
（4）为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒转入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期可通过________________方法，从而一次得到多个转基因猪个体。
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某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下图所示。请回答：
（1）上壤悬液泞先经80℃处理15分钟，其目的是筛选出
（2）在无菌条件下，将经过处理的土壤悬液进行 ，然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到 ，其周围出现透明水解圈，圈的直径大小与 强弱相关。
（3）筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养。培养时需要振荡，其主要目的是 。液体培养基与固体培养基相比不含有的成分是 。
（4）在合适条件下，将提纯的植酸酶与海藻酸钠混合后，滴加到一定浓度的钙离子溶液中，使液滴形成凝胶固体小球。该过程是对酶进行 。
A．吸附 B．包
埋 C．装柱 D．洗涤
（5）温度与植酸酶相对酶活性的关系如图所示。下列叙述错误的是 。
A．测试温度中，固定化与非固定化植酸酶的最适温度分别为60℃和45℃
B．测试温度范围内，固定化植酸酶的相对酶活性波动低于非固定化植酸酶
C．固定化与非固定化植酸酶相比，相对酶活性在80%以上时的温度范围较宽
D．65℃时固定化与非
固定化植酸酶的相对酶活性因蛋白质变性而位于最低点
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水稻种子中70%的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子；同时，排出的大量磷进入水体易引起水华。为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程
据图回答：
(1)图中基因组文库________(小于/等于/大于)cDNA文库。
(2)B过程需要的酶是________；A、C过程中________(可以/不可以)使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。
(3)目的基因I和Ⅱ除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中______和_____为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是___________。
埋 C．装柱 D．洗涤
固定化植酸酶的相对酶活性因蛋白质变性而位于最低点