(8分)某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补...

某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

（1）采样与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过　　　　　　　　　 法灭菌处理的　　　　　 （填“固体”或“液体”）培养基中，28℃振荡培养。

（2）接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行　　　　　　 处理。之后，将菌液涂布接种于以　　　　　　 为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈　　 状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计　　　　　　　　　　 作为空白对照。

（3）筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是　　　　　 ，则说明此种菌能够　　　　　　　　　　　 。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用　　　　　　　　 法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。

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某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

（1）采样与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过________法灭菌处理的（填“固体”或“液体”）培养基中，28℃振荡培养。

（2）接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计________作为空白对照。

（3）筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是，则说明此种菌能够________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用________法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。

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(8分)某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

（1）采样与培养：将采集的土样混匀后称取lg，置于经过＿＿＿＿＿＿＿法灭菌处理的＿＿＿＿（填“固体”或“液体”）培养基中，28℃振荡培养。

（2）接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行＿＿＿＿＿＿＿＿处理。之后，将菌液涂布接种于以＿＿＿＿为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈＿＿＿＿状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿作为空白对照。

（3）筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是＿＿＿＿＿＿＿＿，则说明此种菌能够＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

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某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

（1）采样与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过________法灭菌处理的________（填“固体”或“液体”）培养基中，28℃振荡培养。

（2）接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进

行________处理。之后，将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计 作为空白对照。

（3）筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是________，则说明此种菌能够________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采

用法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。

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某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，下列叙述不正确的是（　　 ）

A. 采样与培养: 称取1g土样置于刚配置的液体培养基中，30℃振荡培养

B. 接种：为避免培养液中菌体浓度过高，需经过系列稀释后接种

C. 选择：所用的固体培养基，作为唯一碳源的是淀粉

D. 筛选：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，出现透明圈的说明此种菌能分解淀粉

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某实验小组欲从土壤中筛选出能分解淀粉的芽孢杆菌。下列叙述不正确的是（　　　 ）

A．采样与培养：称量1 g土样置于灭菌后的固体培养基中，30 ℃振荡培养

B．接种：为避免培养液中菌体浓度过高，需经过系列稀释后接种

C．选择：所用的固体培养基，作为唯一碳源的是淀粉

D．筛选：将适量的碘液滴加到平板中，菌落周围出现透明圈说明此种菌能分解淀粉

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某实验小组欲从土壤中筛选出能分解淀粉的芽孢杆菌。下列叙述不正确的是（　　　 ）

A．采样与培养：称量1 g土样置于灭菌后的固体培养基中，30 ℃振荡培养

B．接种：为避免培养液中菌体浓度过高，需经过系列稀释后接种

C．选择：所用的固体培养基，作为唯一碳源的是淀粉

D．筛选：将适量的碘液滴加到平板中，菌落周围出现透明圈说明此种菌能分解淀粉

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某同学希望从土壤中分离能分解淀粉的微生物，设计了如下实验方案，请将其补充完整。

（1）土壤取样。

（2）配制选择培养基：配制以　　　　　　 为唯一碳源的固体培养基，用　　　　　　 法灭菌，倒平板备用。

（3）接种与选择：为避免样品中菌体浓度过高，需将培养液进行　　　　　　 处理。之后，采用　　　 　　 　　 法将处理后的菌液接种在上述培养基上，在适宜条件下培养48h。为了证明配制的培养基是否受到杂菌污染，可设置　　 　　　　　　 　　　　 作为对照组。

（4）筛选与纯化：将适量的　　　　　　　　 （指示剂）滴加在平板中，如果菌落周围出现　　　　　 　　　　　　 ，则说明此种菌能产生　　 　　　 　　　　 。

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（一）某同学为探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了如下实验。并通过该实验成功筛选出了能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如下图所示。请回答：

（1）制备培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、_____________、分装、加塞、包扎、灭菌等。

（2）“目的菌”生长所需的氮源为培养基中的_____________。用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基的原因为__________________________。为检测能降解尿素细菌的存在与否应在培养基中加入酚红指示剂，若存在，则菌落周围将形成_____________色环带。

（3）图中为将细菌转接到固体培养基上，应采用_____________法进行接种，获得单菌落后继续筛选。

（4）对尿素溶液进行灭菌的最适方法是_____________。

A.高压蒸汽灭菌　　 B.紫外灯照射　　 C.70%的酒精浸泡　　　 D.过滤

（二）下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，下图中标注了在某质粒及某DNA片段上相关限制酶的酶切位点，请回答下列问题：

（1）根据表中信息，Sau3A Ⅰ在该质粒上有____________个酶切位点。在将图中质粒和目的基因构建成重组质粒进程中，应从表中选爪的两种限制酶是______________________。

（2）若将BamHⅠ酶切的DNA末端与BcIⅠ酶切的DNA末端连接，对于该连接部位（_____）

A.BamHⅠ酶和BcIⅠ酶都能切开　　　　　　

B.BamHⅠ酶和BcIⅠ酶都不能切开

C.BamHⅠ酶能切开，BcIⅠ酶不能切　　　　

D.BamHⅠ酶不能切开，BcIⅠ酶能切开

（3）酶切后的载体和目的基因片段，通过_______________酶作用后可形成重组质粒。若将该重组质粒导入大肠杆菌需用_______________处理大肠杆菌，为了筛选出含有重组质粒的大肠杆菌，应在培养基中添加_______________。

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（10分）某校一个生物兴趣小组借助某大学的实验设备，对DNA复制方式等问题进行研究。

（1）该小组设计了以下实验程序，请对结果进行预测。实验步骤如下：

第一步：在氮源为的培养基上生长的大肠杆菌，其DNA分子均为分子；在氮源为的培养基生长的大肠杆菌，其DNA分子均为。用某种离心方法分离得到的结果如图所示，其DNA分别分布在轻带和重带上。

第二步：将亲代大肠杆菌（含）转移到含的培养基上繁殖一代，然后进行离心处理，请分析：如果其DNA分布的位置是一半在轻带，一半在重带，则说明DNA的复制方式为 　　 　　　　 　 复制；如果DNA分布的位置是全部在中带，则为　　　　　　　　 复制。根据已有知识，你认为第一种现象会不会出现？_________。

（2）有人提出：将以上实验第二步培养得到的大肠杆菌的DNA用解旋酶处理后再离心，就能直接判断DNA的复制方式，如果轻带和重带各占1/2，则一定为半保留复制。这位同学的说法是否正确？　　　　　　　 ，原因是_____________________。

（3）DNA复制的意义是_________________。

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