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【生物选修3现代生物科技】（15分）慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况（比如慢性肝病、慢性肾病、肿瘤等）。缺乏白蛋白，人就容易出现浮肿。人体的白蛋白正常值在每100ml血液中含有3．8～4．8克，如果比正常值低很多时就需要注射入血白蛋白，所以临床上对白蛋白需求量很大。下图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图：
（1）通过①采集的卵子，都需要进行体外培养，其目的是_________：通过②采集的精子需________后才能进行受精作用。
（2）要使人的白蛋白基因在奶山羊乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、乳腺蛋白基因的启动子和终止子、_______________等部分。
（3）过程④需将重组质粒用_________方法注入受精卵的雄原核内，在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是___________。正常生理状况下防止多精入卵的两道屏障分别是 、 。
（4）对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的__________细胞进行鉴定,一般采用SRY－PCR方法，选择出现阴性反应的____________（雌性／雄性）胚胎进行移植。
（5）为了使胚胎移植能成功，需要对代孕奶山羊C进行_______处理，使之与供体的生理状况保持相同。[
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（选3，15分）慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况（ 比如慢性肝病、慢性肾病、肿瘤等），缺乏白蛋白人就容易出现浮肿。人体的白蛋白正常值在每100ml血液中含有3．8～4．8克，如果比正常值低很多时就需要注射人血白蛋白，所以临床上对白蛋白需求量很大。下图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图：
（1）要实现①超数排卵，需用 激素对崂山奶山羊A进行处理。
（2）过程④需将重组质粒导入受精卵可采用 方法。冲卵能把供体母牛子宫内的早期胚胎冲洗出来，这是因为早期的该结构处于________________状态。
（3）在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是 。由供体获得早期胚胎后，可通过 技术，得到更多的相同优良个体，在操作时，要特别注意将囊胚的___________均等分割。
（4）为了使胚胎移植能成功，需要对代孕奶山羊C进行 处理，使之与供体的生理状况保持相同。移入受体的供体胚胎遗传特征的在孕育过程中 (“受”/“不受”)影响。
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（7分）慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况（比如慢性肝病、慢性肾病、肿瘤等），缺乏白蛋白，人就容易出现浮肿。人体的自蛋白正常值在每100mL血液中含有3.8～4.8g，如果比正常值低很多时就需要注射人体白蛋白，所以临床上对白蛋白需求量很大。下图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图：
（1）要实现①超数排卵，应在崂山奶山羊A发情周期的某一阶段用______________处理，采集的卵母细胞必须发育到_________期，才能与获能的精子受精。
（2）要使人的白蛋白基因在奶山羊乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、_______________、_______________、_______________、标记基因等部分。
（3）在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是_________________。
（4）对移植前的胚胎进行性别鉴定选择__________（性别）胚胎进行移植。
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(10分)慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况（比如慢性肝病、慢性肾病、肿瘤等），缺乏白蛋白人就容易出现浮肿。人体的白蛋白正常值在每100ml血液中含有3．8～4．8克，如果比正常值低很多时就需要注射人血白蛋白，所以临床上对白蛋白需求量很大。下图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图：
(1)要实现①超数排卵，应在崂山奶山羊A发情周期的某一阶段用 处理，然后在恰当时期采集卵子。通过②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，要对精子进行获能处理，对羊的精子常用化学诱导法，，即用一定浓度的 诱导精子获能。
(2)若我们已知白蛋白基因的碱基序列，一般采用 获取目的基因。要使人的白蛋白基因在奶山羊乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、 、 、标记基因等部分。
(3)过程④需将重组质粒用 方法注入受精卵的雄原核内，在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是 。
(4)对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的 细胞进行鉴定，一般采用SRY-PCR方法，选择出现阴性反应的 （性别）胚胎进行移植。
（5）为了使胚胎移植能成功，需要对代孕奶山羊C进行 处理，使之与供体的生理状况保持相同。
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慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况（ 比如慢性肝病、慢性肾病、肿瘤等），缺乏白蛋白人就容易出现浮肿。人体的白蛋白正常值在每100ml血液中含有3．8～4．8克，如果比正常值低很多时就需要注射人血白蛋白，所以临床上对白蛋白需求量很大。下图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图：
(1)要实现①超数排卵，应在崂山奶山羊A发情周期的某一阶段用 处理，然后在恰当时期采集卵子。通过②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，要对精子进行获能处理，对羊的精子常用化学诱导法，，即用一定浓度的 诱导精子获能。
(2)若我们已知白蛋白基因的碱基序列，一般采用 获取目的基因。要使人的白蛋白基因在奶山羊乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、 、 、标记基因等部分。
(3) 过程④需将重组质粒用 方法注入受精卵的雄原核内，在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是 。
(4)对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的 细胞进行鉴定，一般采用SRY-PCR方法，选择出现阴性反应的 （性别）胚胎进行移植。
（5）为了使胚胎移植能成功，需要对代孕奶山羊C进行 处理，使之与供体的生理状况保持相同。
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慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况（ 比如慢性肝病、慢性肾病、肿瘤等），缺乏白蛋白人就容易出现浮肿。人体的白蛋白正常值在每100ml血液中含有3．8～4．8克，如果比正常值低很多时就需要注射人血白蛋白，所以临床上对白蛋白需求量很大。
右图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图：
(1)要实现①超数排卵，应在崂山奶山羊A发情周期的某一阶段用 处理，然后在恰当时期采集卵子。
(2)过程④需将重组质粒用 方法注入受精卵的雄原核内，在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是 。
(3)为了使胚胎移植能成功，需要对代孕奶山羊C进行 处理，使之与供体的生理状况保持相同
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慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况，缺乏白蛋白人就容易出现浮肿。人体的白蛋白正常值在每100ml血液中含有3.8-4.8克，如果比正常值低很多时就需要注射人血白蛋白，所以临床上对白蛋白需求量很大。下图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图：
（1）要实现①超数排卵，应在崂山奶山羊A发情周期的某—阶段用___________处理，然后在恰当时期采集卵子。通过②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，常要用化学诱导法对羊的精子进行_________处理，即用一定浓度的_____________处理。
（2）若我们已知白蛋白基因的碱基序列，—般采用____________的方法获取目的基因。要使人的白蛋白基因在奶山羊乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、___________、___________、标记基因等部分。
（3）对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的_____________细胞进行鉴定，一般采用SRY—PCR方法，选择出现阴性反应的_____________（性别）胚胎进行移植。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]
MAP30蛋白是一种能使Ⅰ型核酸核糖体失活的蛋白质，存在于苦瓜果实和种子中。MAP30蛋白具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗艾滋病的功能，近年来引起人们的广泛关注。
（1）人们已经清楚MAP30蛋白的氨基酸序列，可以用_______________方法获得MAP30蛋白的基因。再利用PCR技术扩增该基因，PCR反应体系的主要成分应该包含：__________、________、____________、________________、扩增缓冲液（含Mg2+)和水等。
（2）科学家将MAP30蛋白的基因与某种病毒的DNA构建基因表达载体，导入南瓜细胞中，在这个过程中，需要使用到的酶是_______________。为了避免出现“目的基因自我环化”、“目的基因在运载体上反向连接”的问题，请提出一种解决该问题的思路：_____________________________。
（3）可用______________技术得到愈伤组织大规模生产MAP30蛋白，用__________技术检测MAP30的基因是否在南瓜果实中成功表达。
（4）弧菌是克氏原鳌虾养殖中重要的致病菌，大规模爆发会给水产养殖带来巨大的经济损失。科研人员为了研究MAP30蛋白抗弧菌的效果，用含不同浓度MAP30蛋白培养液培养弧菌，绘制弧菌生长曲线如下图： 
由图可以得出的结论是___________________________________。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]癌胚抗原（CEA）是一种位于肿瘤细胞膜表面的蛋白，白细胞介素（IL-2）是一种淋巴因子。研究人员利用质粒plRES、CEA基因、IL-2基因，分别构建了重组质粒plRES-CEA、plRES-IL-2和plRES-CEA- IL-2。将实验小鼠分成6组，每隔5天进行一次肌肉注射，共3次。最后一次注射完成7天后，检测小鼠体内CEA含量、NK细胞（即自然杀伤细胞，可杀伤肿瘤细胞，而不破坏自身组织细胞）活性等指标，结果如下表。
请回答问题：
（1）构建重组质粒需要用到的工具酶有 。要保证重组质粒能够在细菌中大量扩增，重组质粒必须具有 。
（2）注射plRES-CEA- IL-2后，小鼠体内产生的大量CEA是重组质粒中的目的基因经过 和 形成的。
（3）NK细胞的活性不依赖于抗原刺激，能自发地溶解多种肿瘤细胞和被病毒感染细胞，属于人体免疫的第 道防线。
（4）从实验结果看，第 组具有最好的特异性免疫效果。对比第3组和第 组结果可以说明IL-2有促进 的作用。
（5）第1，2，4组小鼠均可产生CEA抗体，各组之间无显著性差异，但与第3组、空载体及
空白对照组相比有显著性差异，说明 。
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【生物——选修3:现代生物科技专题】肺气肿病在北美比较常见，病人以前只能依赖于注射人的α—抗胰蛋白酶做替代疗法，但价格昂贵，英国罗斯林研究所研制成功的转基因羊，其乳汁中含有α一抗胰蛋白酶，可治疗肺气肿病。回答下列问题：
（1）为获取目的基因，需要在肝脏细胞中提取__________，通过反转录产生cDNA。
（2）α-抗胰蛋白酶基因与______、标记基因和终止子等调控组件重组在一起，构建基因表达载体，其中标记基因的作用是____________。然后通过显微注射技术，导入羊的受精卵中。也可以将构建好的基因表达载体导入羊体细胞中，再通过__________将该体细胞核注入处于_________期的去核的卵母细胞中。
（3）通过早期胚胎培养，得到早期胚胎。为了选育出能泌乳的雌羊，一般在胚胎的________部位取样，做性别鉴定。
（4）α—抗胰蛋白酶是一种糖蛋白，一般不用传统的转基因大肠杆菌生产，因为__________。
空白对照组相比有显著性差异，说明