基因工程技术包括一系列的分子生物学操作步骤。请回答下列问题：（1）基因工程操作的核心步骤是...

基因工程技术包括一系列的分子生物学操作步骤。请回答下列问题：

（1）基因工程操作的核心步骤是_________________________________

（2）cDNA文库的构建方法为___________________________________

（3）限制酶、DNA连接酶和___________是基因工程的基本操作工具。其中限制酶的特点是__________________________________

（4）Mullis教授因发明PCR技术获1993年诺贝尔奖，PCR技术中需要的酶是_______

（5）将目的基因导入动物受体细胞的方法是_______________________

（6）周光宇教授提出的花粉管通道法为我国的转基因抗虫棉作出重要贡献。请写出分子水平检测抗虫棉基因是否表达的方法_______________

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（12分）回答下列有关现代生物技术的有关问题：

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是_____________；PCR技术扩增目的基因是基因工程中常用的技术手段，这一技术的原理是_____________。

（2）克隆动物实际上是用_____________方法得到的动物，也就是将一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的_____________细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，最终发育为动物个体。

（3）受精卵是胚胎发育的开端，参与体外受精的卵细胞必须达到_____________期才具备受精的能力，而精子必须经过_____________过程才能和卵细胞结合。哺乳动物受精过程中防止多精入卵的两道屏障分别是_____________反应和_____________反应。

（4）桑基鱼塘体现了__________________________等生态工程的基本原理（选答两项）。

（5）我国禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆的研究，而美国国会反对治疗性克隆。请你谈谈为什么要反对克隆人？__________________________

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根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：　　　　　　 、　　　　　　 、 　　　　　　　　 、　　　　　 。

（2）在基因工程的操作过程中需要用到两种工具酶——限制酶和DNA连接酶。其中限制酶能切割ＤＮＡ分子切割后产生　　　　　　　　 末端和　　　　　　　　 末端；DNA连接酶能将目的基因和载体连接起来，按其来源不同可分为两类，即　　　　　　 　　 　　　　 和　　　　　　　　　　 。

（3）质粒载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）基因工程中常用的载体有质粒、　　　　　　　　　　　　　　　 和　　　　　　　　　　　　 。

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下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图．

请据图回答：

（1）制备“工程菌”的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是_____________。

（2）若A为未知的目的基因，获得A常用的方法是_____________。

（3）A、B形成C的过程中，需要的工具酶有_____________和_____________。为了利于C进入D,常用__________________处理D。

（4）制备所得的“工程菌”用LB____________培养基进行扩大培养，操作过程中要用________和______________来配制该培养基，还要加入一定量的________，以维持一定的渗透压；培养基使用前必须用___________进行灭菌处理。

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基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中基因工程的核心是

A．目的基因的获取

B．基因表达载体的构建

C．将目的基因导入受体细胞

D．目的基因的检测与鉴定

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以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。

(1)获得目的基因的方法通常包括　　　　　________　　和　　　________　　　　。

(2)切割和连接DNA分子所使用的酶分别是　　　　　和　　　________　。

(3)运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或　________　，后者的形状呈________ 。

(4)由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率　________，所以在转化后通常需要进行　________　操作。

(5)将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和　　序列上是相同的

(6) 大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它 _______

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下列关于基因工程操作程序的叙述，正确的是

A. 将目的基因导入受体细胞是基因工程的核心步骤

B. 检测目的基因是否翻译的原理是DNA分子杂交技术

C. 从cDNA文库中获取的DNA来源于mRNA的反转录

D. PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全巳知的基础上

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请分析回答下列有关现代生物科技方面的问题：

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是基因表达载体的构建，第三步是将目的的基因导入受体细胞，第四步是　　　　　 。

①通常在第一步和第二步的操作中都需要的工具酶是　　　　　 。

②利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在　　　 酶的作用下延伸形成DNA。

③采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞后，培养该细胞再生成植株的过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制　　　　　　 和　　　　　　 过程。

④蛋白质工程的基本程序是：

预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的　　　　　　 序列→找到相对应的　　　　　　 序列。

（2）请回答下列有关单克隆抗体制备的问题：

①与动物细胞融合过程相比，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用　　　　 处理。作用是去除　　　　　　 ,诱导原生质体融合的化学方法是用　　　　　 。

②经人工诱导后，骨髄痛细胞和产生免疫反应的动物的脾脏细胞中的B淋巴细胞融合。由于可能产生多种融合细胞，因此还需对融合细胞用　　　　　　 进行筛选，目的是选出　　　　　　 它的特点是　　　　　　　　 。单克隆抗体的特点是　　　　　 。

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以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。

（1）获得目的基因的方法通常包括________和________。

（2）切割和连接DNA分子所使用的酶分别是______和____  ___。

（3）运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或_，后者的形状成________。

（4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率________，所以在转化后通常需要进行____________操作。

（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和________序列上是相同的。

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请分析回答下列有关现代生物科技方面的问题：

(1)基因工程的基本操作程序主要包括五个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是________，第三步是将目的基因导入受体细胞，第四步是________，第五步是实现功能表达。

①获取目的基因的方法很多，常用的有________、  ________（至少写出两种）。

②通常在第一步和第二步的操作中需要的工具酶是________、________。

③如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括（多项选择）________。

A生物安全        B环境安全        C食品安全       D伦理道德问题

(2)请回答下列有关单克隆抗体制备的问题：

①与动物细胞融合过程相比，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用________处理去除细胞壁，动物细胞融合与植物原生质体融合方法的不同之处是________。

②小鼠体内注入抗原后可获已免疫的B细胞，这种细胞的特点是________。从患骨髓瘤的小鼠体内可获取骨髓瘤细胞，这种细胞的特点是________。

③经人工诱导后，骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞融合，还可能产生________、________的融合细胞（只考虑两两融合），因此还需对融合细胞进行筛选和检测。

④培养筛选出的杂交瘤细胞，可获得大量单克隆抗体，这种抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是________。

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