焦化厂活性污泥中富含难降解的有机物苯甲酰肼,是当前焦化行业环保治理的难点。某同学通过查阅资...

焦化厂活性污泥中富含难降解的有机物苯甲酰肼,是当前焦化行业环保治理的难点。某同学通过查阅资料发现可通过微生物降解方法处理焦化厂污染物。下列有关分析错误的是

A．应该从农田土壤中筛选目的菌

B．配制以苯甲酰肼作为唯一碳源的选择培养基进行筛选

C．利用平板划线法可以对初步筛选出的目的菌进行纯化

D．逐步提高培养基中苯甲酰肼的浓度可以得到能高效降解污染物的优质菌株

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焦化厂活性污泥中富含难降解的有机物苯甲酰肼,是当前焦化行业环保治理的难点。某同学通过查阅资料发现可通过微生物降解方法处理焦化厂污染物。下列有关分析错误的是（　　 ）

A．应该从没有受污染的农田土壤中筛选目的菌

B．配制以苯甲酰肼作为唯一碳源的选择培养基进行筛选

C．利用平板划线法可以对初步筛选出的目的菌进行纯化

D．逐步提高培养基中苯甲酰肼的浓度可以得到能高效降解污染物的优质菌株

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甲醛是一种来源广泛的挥发性有机污染物，具有强烈的致癌和致畸作用，可利用微生物降解甲醛来治理甲醛污染，具有高效、环保、无二次污染等优点。如图甲是采集活性污泥作为优良菌源，通过筛选分离出能以甲醛为唯一碳源的高效降解菌的实验过程。分析回答下列问题：

（1）上述实验材料中，不需要进行灭菌处理的是___________，培养基灭菌的常用方法是____________。该实验③过程所用的选择培养基只能以甲醛作为唯一的碳源，其原因是____________________。

（2）由③→④的分离活性污泥中的细菌的接种方法（如图乙）为______________法，接种时，对接种环应采用______________方法进行灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始，这样做的原因是_____________________________________________________________________。

（3）为研究甲醛初始浓度对菌株降解能力的影响，进行了相应实验。当甲醛的初始浓度小于1200mg/L时，菌株可以完全降解甲醛：当甲醛的初始浓度增高至1600mg/L时，48小时后菌株对甲醛的降解能力很弱，甚至失去降解能力，其原因可能是___________________________________。

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甲醛是一种来源广泛的挥发性有机污染物，具有强烈的致癌和促癌作用，利用微生物降解甲醛来治理甲醛污染，具有高效、环保、无二次污染等优点。下图甲为采集活性污泥作为优良菌源。通过驯化分离筛选出能以甲醛为唯一碳源和能源的高效降解菌的实验过程。请分析回答：

(1)实验中震荡的目的是________，③过程获得了以甲醛为唯一碳源的细菌，所加的甲醛的作用是　　　　　　　　 和　　　　　　　　　　 。上述实验材料中，不需要进行灭菌处理的是　　　　　　　　 ，培养基灭菌的常用方法为　　　　　　　　　 。

(2)由③→④的接种方法为平板划线法如图乙所示，此处通过接种环在无机固体培养基表面连续划线，操作的目的是将聚集的菌种逐步_________到培养基的表面，通过培养能获得单个菌落。图乙表示在平板培养基上的第一次和第二次划线，请在图丙中画出第三次划线；划线后在恒温培养箱中培养时，培养皿倒置的原因是　　　　　　　　　　 。

(3)为研究甲醛初始浓度对菌株降解甲醛能力的影响，进行了相应实验。当甲醛的初始浓度小于1200 mg／L时，菌株可以完全降解甲醛；当甲醛的初始浓度增高至1600 mg／L时，48小时后菌株对甲醛的降解能力很弱，甚至失去降解能力，其原因可能是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。为了使该实验所得结果准确可靠，还应该设置　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 的对照实验，以排除甲醛自然挥发对实验结果的干扰。

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苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据如图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：

（1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有________。

（2）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐________，以达到富集酚降解菌的目的；若如图平板中菌落过于密集，应进一步________，以便于菌落计数与分离；制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加________。

（3）如图为连续划线法示意图，在图中________（填图中序号）区域更易获得单菌落。

（4）若选择培养的是纤维素分解菌，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行________的实验，测定其分解滤纸等纤维素后所产生的________进行定量测定。

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苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害．小明同学准备依据图1操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株．请回答下列问题：

（1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有___．

（2）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐__．以达到富集酚降解菌的目的．若图1平板中菌落过于密集，应进一步___________，以便于菌落计数与分离．制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加 ___________ ．

（3）小明同学利用平板划线法纯化酚降解菌,他在培养基上共划了5个区域,则需要__________次(填数字)灼烧接种环.

（4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量．先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为__________________．

如果废水为50mg/L 苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释_______（填序号：①5②10③20）倍后，再进行比色．

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苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：

（1）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐________，以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步___________，以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加___________。

（2）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为________________________。

如果废水为50 mg/ L 苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释_____________ （填序号：①5 ②10③20）倍后，再进行比色。

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回答下列（一）、（二）小题

（一）自生固氮菌是一类能独立固定氮气的细菌，其中有些好氧种类能产生 PHB（一种生物可降解的热塑性塑料）。现欲从活性污泥中分离、纯化、筛选出高产 PHB 的固氮菌，操作流程如下：采集土样→富集培养→分离、纯化培养→初步筛选 PHB 固氮菌→筛选高产 PHB 固氮菌→保存备用。请回答：

（1）富集培养时，为达到筛选自生固氮菌的目的，在配制培养液时不应添加________ 。培养时要将装有培养液的锥形瓶放置在__________上振荡培养，主要目的是为细菌的生长提供 ____________。

（2）用于筛选高表达量菌株的方法之一是经涂布分离获得______。涂布分离时用_______ 将菌液均匀涂布在培养基上，此时所使用的培养基与富集培养时有所不同，添加了一定量的_____________。

（3）在纯化过程中，在固体培养基上划线时，下列操作正确的是__________。

A．接种环采用 70%酒精灭菌　　

B．接种时应在酒精灯火焰附近进行

C．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连

D．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种

（二）毛角蛋白11型中间丝（KIF II）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关，获得转KIF II基因的高绒质绒山羊的简单流程如图：

（1）转基因过程用到的工具酶有_______________和____________。

（2）在过程②中，用________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。由于人们对动物细胞所猫营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养液中加入一定量的_________，在培养过程中，应将培养瓶宜于__________中培养。

（3）若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行_________后进行胚胎移植。

（4）下列有关墓因工程的叙述，正确的是___________。

A．切割目的基因和载体DNA时为获得相同的枯性末端，必须用相同的限制性核酸内切酶

B．基因工程的原理是基因重组，其核心是上图中的过程④

C．图示过程获得的转基因绒山羊并不是克隆动物

D．重组表达载体上含有RNA聚合的的识别结合位点

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南洋东华公司研发了两种石油降解产品BDB-n生物降解菌（厌氧型）和BDB-a生物降解菌（好氧型），降解菌是通过产生酶对石油进行分解的。如图为不同条件下，某种降解菌对某湖泊污泥中石油分解能力的测定结果。下列有关分析错误的是

A. 该实验的自变量为pH和污泥含水量

B. 该实验的检测指标是2天后污泥中的石油含量

C. 该实验中使用的降解菌最可能是BDB-a生物降解菌

D. 在不同污泥含水量条件下，降解菌体内酶的最适pH相同

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南洋东华公司研发了两种石油降解产品BDB-n生物降解菌（厌氧型）和BDB-a生物降解菌（好氧型），降解菌是通过产生酶对石油进行分解的。如图为不同条件下，某种降解菌对某湖泊污泥中石油分解能力的测定结果。下列有关分析错误的是

A. 该实验的自变量为pH和污泥含水量

B. 该实验的检测指标是2天后污泥中的石油含量

C. 该实验中使用的降解菌最可能是BDB-a生物降解菌

D. 在不同污泥含水量条件下，降解菌体内酶的最适pH相同

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