若要制备某种细菌的基因组文库,需首先将其基因组DNA片段分别导入到大肠杆菌细胞中,某科研小组设计的实验流程见下图:
回答下列问题:
(1)为制备基因组文库,步骤①中的成分X应为该细菌所有的________________(填“mRNA”、“DNA”或“cDNA” )。步骤②中的质粒含有氨苄青霉素抗性基因/选用该基因的作用是____________________。
(2)限制酶Sau3AI和BamHI的识别序列和切割位点为、,步骤③中经两种不同限制酶分别切割后的片段可以连接起来,原因是____________________________。
(3)步骤⑤中应选用对氨苄青霉素____________(填“敏感”或“不敏感”)的大肠杆菌作为受体菌,转化前通常先用_____________处理受体菌,使其处于感受态。
(4)科研小组采用下表方案进行转化,并检测转化是否成功。
一段时间后从上述三组取样,分别涂布到含有氨苄青霉素的培养基进行培养,观察是否有菌落的生长。
①三组实验菌落较多且相差不大,说明有杂菌污染或__________________________;
②若__________________________,说明转化成功且结果可信。
高二生物非选择题中等难度题
若要制备某种细菌的基因组文库,需首先将其基因组DNA片段分别导人到大肠杆菌细胞中,某科研小组设计的实验流程见下图, 回答下列问题:
(1)为制备基因组文库,步骤①中的成分X应为该细菌所有的______(填“mRNA”、“DNA” 或“cDNA”)。步骤②中的质粒含有氨苄青霉素抗性基因,选用该基因的作用是________。
(2)限制酶Sau3A I识别序列和切割位点为BamH I的识别序列和切割位点为步骤③中经两种不同限制酶分别切割后的片段可以连接起来,原因是________。
(3)步骤⑤中应选用对氨苄青霉素 ________________(填“敏感”或“不敏感”)的大肠杆菌作为受体菌,转化前通常先用 ____________________处理受体菌,使其处于感受态。
(4)科研小组采用下表方案进行转化,并检测转化是否成功。
一段时间后从上述三组取样,分别涂布到含有氨苄青霉素的培养基进行培养,观察是否有菌落的生长。若 _________________________________________,说明转化成功且结果可信。
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若要制备某种细菌的基因组文库,需首先将其基因组DNA片段分别导入到大肠杆菌细胞中,某科研小组设计的实验流程见下图:
回答下列问题:
(1)为制备基因组文库,步骤①中的成分X应为该细菌所有的________________(填“mRNA”、“DNA”或“cDNA” )。步骤②中的质粒含有氨苄青霉素抗性基因/选用该基因的作用是____________________。
(2)限制酶Sau3AI和BamHI的识别序列和切割位点为、,步骤③中经两种不同限制酶分别切割后的片段可以连接起来,原因是____________________________。
(3)步骤⑤中应选用对氨苄青霉素____________(填“敏感”或“不敏感”)的大肠杆菌作为受体菌,转化前通常先用_____________处理受体菌,使其处于感受态。
(4)科研小组采用下表方案进行转化,并检测转化是否成功。
一段时间后从上述三组取样,分别涂布到含有氨苄青霉素的培养基进行培养,观察是否有菌落的生长。
①三组实验菌落较多且相差不大,说明有杂菌污染或__________________________;
②若__________________________,说明转化成功且结果可信。
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科研人员利用基因工程技术构建蜂鸟的基因组文库,研究β-球蛋白基因的功能,流程如图1所示。
(1)首先需要用同种__________处理蜂鸟的DNA和质粒,并用DNA连接酶处理,得到__________,再与经__________处理得到的感受态大肠杆菌混合。将混合物接种到添加__________的培养基上培养,一段时间后,选择颜色为__________(填“白色”或“蓝色”)的菌落进一步培养,获得导入蜂鸟DNA片段的大肠杆菌。用上述方法可以获得导入蜂鸟不同基因的大肠杆菌,构建出蜂鸟的__________。
(2)科研人员可从获得的大肠杆菌中提取__________,利用图2中的__________引物组合进行PCR,以进一步研究蜂鸟β-球蛋白基因的功能。
(3)导入大肠杆菌的蜂鸟β-球蛋白基因并未表达正常功能的蛋白质,可能的原因是__________。(写出一项即可)
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下图中图1表示某细菌的抗除草剂基因的部分片段,其中a、b、c分别表示该基因片段中特定的碱基对。图2表示该细菌细胞内DNA自我复制及控制多肽合成的过程。请分析回答下列问题:
(1)在真核细胞内,图2所示的①②③过程中发生在同一场所的是______(选填序号)。过程①的产物分子中只有一条单链是新合成的,因此这种合成方式被称为____________。过程②需要________催化mRNA合成。完成③时,一般在一条mRNA上会结合多个核糖体,其意义是_________________________。
(2)基因突变是由于__________________,导致基因结构的改变。若图1中基因位点a的碱基对变为,位点b的碱基对变为,位点c的碱基对变为,则其中位点________的突变对生物性状表现无影响。
(3)若将此抗除草剂基因转入大豆根细胞中,常用 技术对抗除草剂基因进行扩增。欲检测转基因是否成功转入,应将转入目的基因的细胞培养在含__________的全营养固体培养基中。
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(11分)下图1表示某细菌的抗除草剂基因的部分片段,其中a、b、c分别表示该基因片段中特定的碱基对。图2表示该细菌细胞内DNA自我复制及控制多肽合成的过程。请分析回答:
图1 图2
(1)在真核细胞内,核基因控制的该过程发生在同一场所的是________(选填序号)。过程②需要________催化。完成③时,一般在一条mRNA上会结合多个核糖体,其意义是________
________。
(2)基因突变是由于碱基的增添、缺失和替换,导致基因结构的改变。若图1中基因位点a
的碱基对变为,位点b的碱基对变为,位点c的碱基对变为,则其中位点________
的突变对生物性状表现无影响,其原因是________。
(3)若将此抗除草剂基因转入大豆根细胞中,欲检测转基因是否成功,应将转入目的基因的细胞培养在含________的全营养固体培养基中。抗除草剂基因能在大豆细胞中表达说明________。
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农杆菌侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的TDNA插入植物基因组中。图示为利用农杆菌培育转基因植物的基本流程,请据图回答下列问题:
(1)剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中,需用多种限制酶处理,原因是_________________________________________,需用________(填“E.coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”)“缝合”双链DNA片段的平末端。
(2)目的基因是指________________和一些具调控作用的因子。由过程②形成的基因表达载体中,目的基因的首端具有________识别和结合的部位。
(3)过程③常用________处理使农杆菌成为感受态细胞。抗生素抗性基因T的作用是_____________________________________________________________________。
(4)过程④获取原生质体的过程中,应用__________________处理植物细胞。
(5)在过程⑤⑥前,常采用________________技术检测农杆菌和愈伤组织细胞中是否含有目的基因。
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科研人员以抗四环素基因为标记基因,通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白,治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计中,不合理的是( )
A.利用小鼠DNA分子通过PCR克隆出β-珠蛋白基因的编码序列
B.用编码序列加启动子、抗四环素基因等元件来构建表达载体
C.用Ca2+处理大肠杆菌后,将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中
D.用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌
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科研人员以抗四环素基因为标记基因,通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白,治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计不合理的是( )
A. 从小鼠DNA分子上克隆出β-珠蛋白基因的编码序列
B. 用编码序列加调控序列、抗四环素基因等元件来构建基因表达载体
C. 用Ca2+处理大肠杆菌后,将基因表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中
D. 用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌
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科研人员以抗四环素基因为标记基因,通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白,治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计不合理的是( )
A.从小鼠DNA分子上克隆出β-珠蛋白基因的编码序列
B.用编码序列加调控序列、抗四环素基因等元件来构建基因表达载体
C.用Ca2+处理大肠杆菌后,将基因表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中
D.用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌
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下图1表示某细菌的抗除草剂基因的部分片段,其中a、b、c分别表示该基因片段中特定的碱基对。图2表示该细菌细胞内DNA自我复制及控制多肽合成的过程。下列有关说法正确的是( )
A.图2中的①②③分别指的是复制、转录和翻译,在真核细胞内,①②只能发生在细胞核内
B.过程②需要DNA聚合酶的催化
C.完成③时,一般在一条mRNA上会结合多个核糖体,其意义是提高翻译的效率(短时间内合成大量蛋白质)
D.若将此抗除草剂基因转入大豆根细胞中,欲检测转基因是否成功,应将转入目的基因的细胞培养在含青霉素的全营养固体培养基中
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